Способ получения диплоидного гиногенетического потомства у карповых рыб
ь, I ° . с {ая иете а Е 54
Союз Соеетскнх
Соцналнстнческнк
Респубпнк о л и н-к е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
o1)738565
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 220774 (21) 2046249/28-13 (51)М. К . с присоединением заявки №вЂ”
А 01 К 61/00
Государственный комитет
СССР но делам изобретений и открытий (23) Приоритет
Опубликовано 050680. Бюллетень ¹ 21
Дата опубликования описания 0506.80 (53) УДК 63е.3.04 (088. 8) (72) Авторы изобретения
К.A.Ãoëîâèíñêàÿ, Н.Б.Черфас и Л.И.Цветкова
Всесоюэ ный научно-исследов ательский институт прудового рыбного хозяйства (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИПЛОИДНОГО ГИНОГЕНЕТИЧЕСКОГО
ПОТОМСТВА У КАРПОВЫХ РЫБ
Изобретение относится к области рыбоводства, в частности к способу получения диплоидного гиногенетического потомства у карповых рыб.
Известен способ получения диплоидного гиногенетического потомства (т. е. с чисто материнской наследственностью) у карповых рыб путем осеменения икры инактивированной спермой (т.е. предварительно облученной ионизирующей радиацией) с последующим обесклеиванием, инкубацией ее и отбором гиногенетических диплоидов.
В известном способе осеменение икры рыб инактивированной спермой вызывает генетическую инактивацию мужского наследственного аппарата. Получаемое потомство в этом случае имеет в своем составе гиногенетических гаплоидных особей, т.е. особей с одинарным набором женских хромосом и гиногенетических диплоидных особей, т. е. особей с удвоенным набором женских хромосом. Основную массу потомства составляет гаплоидные потомки, являющиеся нежизнеспособными.
Численность гиногенетических диплоидов зависит от частоты диплоизации и беэ применения специальных воздействий составляет меньшинс во от чис— ла осемененных икринок(Ц
При получении диплоидного гиногенетического потомства требуется проводить отбор диплоидов иэ общей массы гаплоидов, что и осуществляется обычно в первые двое суток после вылупления по внешним различиям.
Гаплоидные личинки характеризуются определенным комплексом морфологических нарушений, известных под названием гаплоидного синдрома, (т. е. искривление тела, вздутие перикарда и т. д. ), степень выраженности которого варьирует. На более поздних стадиях развития гаплоидные личинки отличаются от нормальных диплоидных потомков своей неспособностью нормально плавать и вскоре погибают.
Отбор диплоидных личинок визуально вручную с помощью пипетки не поеволяет использовать инкубационные аппараты в промыаленном масштабе, поскольку диплоидные личинки в первое время после вылупления лежат на дне вместе с гаплоидными.
Также затруднен отбор диплоидных личинок от гаплоидных на ранних ста3О диях их развития в сиЛу слабого про7385б5 явления у некоторой части личинок гаплоидного синдрома, последние попадают вместе с отобранными диплоидными личинками. Совместное же выдерживание диплоидных личинок с гаплоидными до того периода, когда диплоидные личинки начинают активно плавать в толще воды, чтобы их можно было легко отобрать, в свою очередь,. создает неблагоприятные условия в инкубационном аппарате.
Целью изобретения является повы- 10 шение эффективности селекционного ,процесса, Для достижения этой цели, отбор гиногенетических диплоидов осуществляют при помощи пластин, вертикально )5 устанавливаемых в инкубационном co— суде, для приклеивания выклюнувшихся личинок, Способ поясняется чертежом.
Настоящий способ основан на том, 7О что в естественных условиях личинки большинства карповых рыб сразу после вылупления приклеиваются к субстрату (обычная мягкая растительность в водоеме) и в таком состоянии находятся в течение нескольких суток до рассасывания желточного мешка и начала активного питания. Это свойство личинок карповых рыб использовано ,цля отбора гиногенетических диплоидов, поскольку гаплоиды, возникающие в гиногенетических их партиях и составляющие в них основную массу, лишены способности приклеиваться к субстрату и находятся на дне.
Способ заключается в том, что для получения текучей икры и спермы проводят инъецирование производителей рыб, отцеживают сперму и подвергают последнюю облучению в высоких дозах ионизирующей радиации (80-100 тыс. 40 рентгенов) .
Режим облучения спермы зависит от типа аппарата, на котором оно проводится. Например, на аппарате РУП режим облучения следующий: 210 кВ, 4
15 мА 3240 р/мин, время облучения около 5 мин. Далее проводят осемене— ние икры, облученной спермой, т.е. инактивированной, при этом на 300500 тыс. штук икринок достаточнс иметь 1-1,5 мл инактивированной спермы.
После осеменения икру обесклеивают растворами гиалуронидаэы и танина и переносят в инкубационный сосуд 1, например аппарат Вейса, в котором вертикально устанавливают пластины 2.
Процесс инкубации проводят обычным образом, т.е. воду подают в сосуд 1 аппарата по водопадающему патрубку 3, а слив воды осуществляют из сливного патрубка 4, Восходящий поток воды создает оптимальный режим инкубации икры рыб, которая продолжается 45 дней при 19-20 С.
Вскоре после вылупления диплоидные гиногенетические личинки, совершая короткие движения, выходят из общей массы потомства и приклеиваются к пластинам 2. Основная же масса гаплоидных личинок держится в нижней части сосуда, пассивно перемещаясь в тоЛще воды, и не прикрепляется к пластинам 2.
Использование настоящего способа в рыбоводстве позволит сократить сроки получения инбредного потомства, решив вопросы регуляции пола у рыб и ряд других вопросов теоретической и прикладной селекции.
Формула изобретения
Способ получения диплоидного гиногенетического потомства у карповых рыб путем осеменения икры инактивированной спермой с последующим обесклеиванием, инкубацией ее и отбором гиногенетических диплоидов, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения эффективности селекционного процесса, отбор гиногенетиче ских диплоидов о суще с т вляют при помощи пластин, вертикально устанавливаемых в инкубационном сосуде, для приклеивания выклюнувшихся личинок.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Цветкова Л.И. Исследование потомства or самки карпа гиногенетического происхождения, — Труды ВНИИПРХа, т. КЧн1, М., 1971, с. 234-239 (прототип) .
738565
Составитель Лебедок
Техред И.Асталош Корректор Н.Григорук
Редактор Л. Курасова
Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4
Эакаэ 3524/56 Тираж 72 3 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам нэобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5