Способ получения биомассы
Союз Советскик
Соцмалистмческик
Республик
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
Опубликовано 230880. бюллетень М 31 Дата опубликования описания 23.0880 (Я)М. Кл.з С 12 В 1/08 Госуяарствечный аомятет СССР оо аелам ямбретеняй я открытнй (5З) Ю)(663.14:636. 087 (088 8) Иностранцы Паскуале Цаффарони, Антонио Сенин, Паоло Брандуззи и Ламберто Формикоии (Италия) (72) Авторы изобретения Иностранная фирма "Снампрогетти С. и. A" (Италия) (71) Заявмтель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССИ Изобретение относится к микробиологической промлаленности, а именно к способам получения биомассы, включает культивирование дрожжей на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода метанол. Известен способ получения биомассы, включающий культивирование дрожжей рода,Candlda на метаноле (1) . Недостатком известного способа является невысокое содержание белка в биомассе. Для повышения содержания белка в биомассе используют из рода Candida штамм Candida Sp. SPM 180cc, при !5 этом культивирование ведут при температуре 20-35 С и рН среды 2,5-6,5. Способ выполняют следующим образом. Штамм Candida Sp. 5РМ 180сс куль-20 тивируют на питательной среде, содеркащей в качестве источника углерода метанол, а также источники азота, фосфора, калия, железа и кальция, а так..е биостимуляторы — дрожжевой экстракт, биотин. Культивирование штамма проводят при энергичном перемешивании с тем пературой среды от 20 до 354С, предпочтительно в пределах 30-33 С. рН D среды поддерживают в пределах 2,56,5, предпочтительно в пределах 4-4,5. Среду аэрируют газовой смесью, содержащей кислород, предпочтительно воздухом. Полученную в процессе культивирования биомассу отфильтровывают, промывают водой и сушат при подогреве. Биомасса может быть использована в качестве белкового компонента пищевых продуктов или кормов для животных. Из биомассы могут быть выделены облагороженные продукты: белок, аминокислоты, а также нуклеиновые кислоты. Штамм выделен в непрерывном про цессе культивирования на специально обогащенной питательной среде. Штают Candlda Sp. 5РМ 180 сс культивируют периодическим и непрерывным способом. В жидкой питательной среде штамм образует пучки удлиненной формы (псевдомицелий), которые выпадают в осадок. В твердой среде штамн образует гладкие глянцевые колонии, либо 759055 D-глюкоза D-галактоза Сахароза Мальтоэа Трегалоза Лактоза + (Слабо) 30 40 або) . ющими + (Сл леду примерами . 45 колбы татель50 55 имеет сле60 дующий состав: CuSO»- 5H 0 Н,80 Мп504-Н 0 KI СоС1 ° 6Н О 200 мг/л 500 мг/л 500 мг/л 10 мг/л 10 мг/л непрозрачные складчатые колонии. Споры не образует. Физиологическая характеристика штамма Candida Sp. SPM 180 сс: .Использование источников гле о а зооз О-глюкоза 0-галактоза t-сорбоза Сахароза Мальтоэа Пеллобиоза Трегалоза Лактоэа Мелибиоза Раффиноза Мелецитоза Инулин Крахмал 0-ксилоза В-арабиноэа D-арабиноза О-рибоза 2-рамн о з а Этанол Глицерин Эритритол Рибитол Галактикол О-маннитол D-глюцитол Молочная кислота Янтарная кислота Лимонная кислота Инозит Нитраты Отсутствие витаминов при 37 Способ иллюстрируется с Пример 1. В конические емкостью 500 мл вносят 50 мл пи ной среды следующего состава: КН РО4 2,0 г/л МН РО4 Н ф 2,0 г/л (йН4) SO4 5,0 г/л MgSO4 7Н О 0,2 мг/л FeS04 7Н О 2,0 мг/л CaCi 2,0 мг/л ZnS04 7Н 0 2,0 мг/л Дрожжевой экстракт 2,0 мг/л Биотин 200 мг/л Микроэлементы 1 мл/л . Раствор микроэлементов 5 (0 10 мг/л Mo"g Н 504 (концентрированная) 1 мг/л, Среду доводят до рН 5,0. Среду в колбе стерилизувт при температуре 116 С в течение 20 мин. В две колбы добавляют 0,75 мл (1,9Ъ по объему) метанола, и засеивают штаммом Сandida Sp. SPM 180 сс. Колбы инкубируют в течение 72 ч на вращающемся перемешивающем устройстве при скорости вращения 220 об/мин с разбегом по диаметру 3,5 см. Температура контролируется термостатированием и составляет 32,5ос. К содержимому других колб, в которых имеется та же среда, добавляют: 1% (об/об) метанола, 2% (об/об) этанола и 2% (вес/об) глюкозы. Эти колбы засеивают 5 мл культуры, описанной выше. Спустя 24 ч после начала инкубирования,в каждую колбу дополнительно добавляют 1% метанола (об/об). Через 48 ч инкубации определяют содержание биомассы в колбах и содержание белка в биомессе. Полученные результаты приведены в таблице. О, 340 0,270 0,095 Глюкоза Метанол 3,99. 54,5 3,68 51,0 1 18 54,1 Этанол Содержание белка определяется биуретовым методом. Пример 2. D ферментер с эффективным объемом 8 л вводят питательную среду, укаэанную в примере 1, и засеивают штамм Candida Sp SPM 180 сс в виде суспензия. В ферментер, температура которого поддерживается на уровне 32,5 С, добавляют метанол с таким расчетом, чтобы его остаточная концентрация в среде не превышала 1 об.Ъ. После процесса накопления культуры начинают непрерывно вводить стерильную питательную среду в фе лентер. Содержание метанола в ней составляет 29,6 г/л. Одновременно производят отбор дрожжевой суспензии из ферментера. Скорость разбавления среды постепенно увеличивают до 0,166 час ". При работе в таком режиме отходящий поток содержит 10,28 г/л сухой биомассы и 146 ч на миллион остаточного метанола. Выход полезного продукта составляет 35%, продуктивно .ть 1,72 г/л в час. Получаемая биомасса содержит 55,6% белка (определено с помощью биуретовой реакции). 759055 Составитель Великославинская:, Tехред Н. Барадулина Корректор О. Ковинская Редактор Т. Шагова Заказ 5664/53 Тираж 522 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобертений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Пример 3. К ферментеру, описан ному в примере 2, подключают отстойник. Часть дрожжевой суспензии отводят в отстойник, где биомасса отстаивается, и ее регулярно возвращают в ферментер. В ферментер вводят также свежую питательную среду, содержащую 24 г метанола. Скорость разбавления была 0,267 час-<. Дрожжевая суспензия, выводимая из ферментера, содержит 7,80 г/л-биомассы н 120 ч на миллион остаточного метанола. Выход полезного продукта составляет 32,5%. Продуктивность по биомассе была 2,08 г/л в час. Биомасса содержит 53,0% белка (определено с помощью биуретовой ре- 15 акции). Формула изобретения Способ получения биомассы,предусматривающий культивирование дрожжей рода Сàndidа на питательной среде, содержащей метанол в качестве источника углерода, источник азота и минеральные соли и биостимуляторы в условиях аэреации среды, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повыаения выхода белка в биомассе, из рода Candida используют штамм Candida Sp. SPM 180 сс, при этом культивирование ведут при температуре 20-35 С и рН среды 2,5-6,5. Источники информации, принятые во внимание при экспергизе 1. Патент Англии Р 1435865, кл. С 6 F, опублик. 1976.