Способ получения дезоксирибонуклеиновой кислоты
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЬ .из молок рыб путем их гомогенизации с последующим промыванием гомогената физиологическим liacTBOpoM и депротеинизацией выделенного комплекса ДНК с белком, отличающийся тем, что, с целью повышения степени чистоты коночного продукта и удешевления способа, депротеинизацию комплекса ДНК с белком ведут препаратом протосубтилин , вьщеленным из Bacillus Zubtilis.
„„SU „„780444
СОЮЗ СОаЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
4(П С 07 D 13/06
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОсудАРстаенный номитет сссР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21} 2784850/28-13 (22) 25.06.79 (46} 23.04.85. Бюл. Ф 15 (72) В, Ф. Подгорный, Н. А. Цехановская, Н. С. Касаткина и.С, Н. Загребельный (53) 6!6.36(088.8)
1 (56у 1. Прикладная биохимия и микробиология, т. 14 Ф 4, с. 602, 1978. (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ .из молок рыб путем их гомогенизации с последующим промыванием.гомогената физиологическим раствором и депротеинизацией выделенного комплекса ДНК с белком, отличающийся тем, что, с целью повышения степени чистоты конечного продукта и удешевления способа, депротеинизацию комплекса
ДНК с белком. ведут препаратом протосубтилин, выделенным из Bacillus
Zubti1is.
78044
Редактор Л. Письман Техред M,Гергель Корректор А. Тяско
Заказ 2784/2 Тираж 384 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Изобретение относится к области органической химии, более тс чно к химии физиологически активных соединений.
Известен способ получения дезоксирибонуклеиновой кислоты из молок рыб путем их гомогенизации с последуюшим промыванием гомогената физиопогическим раствором и депротеинизациеи выделенного комплекса 1НК с белком („" .
Т,1J . 1О
Однако известный способ не обл .дает высокой степенью, чистоты конечного продукта и является очень дорогим.
Цель изобретения — повышение степени чистоты конечного продукта и 1-5 удешевление способа.
Цель достигается тем, что депротеинизацию комплекса ДНК с белком ведут препаратом протосубтилин, выделенным из Bacillus Zubtilis. 20
Пример. 1 кг замороженных молок лосося пропускают через мясорубку, затем гомогенизируют в гомогенизаторе РТ-2 {2-3 мин., 8000 об./мин), добавляют равный объем О, 1 5 M Xi a(. 1 . Гn> nrcsra ui нтрифугирук:т при 3000 q В 1еченпе 15 мин., супернатант отбрас ывают, oc >!g(к трижды промывают 0,15 1! МаС1 (порциями по l .л), затем осадок ДНП дважды промывают становом (порциями пс 1 л).
Далее ДНП суспензируют в 0,25 М
ИаС1 — 0,05 M НлНСОэ гН 9,0 (концентрация 2 мг/мл), нагревают смесь ооп 35 С, добавляют протосубтилин до о, 1,2 ед. акт./мл. и выдерживают 30 мин при слабом перемешивании. Затем центрифугируют при !0000 о в течение
30 мин. Недостаточный слой смешивают с равнь.м объемом эганола, пряди ДНК извлекают из смеси, промывают этанолом и высушивают. Выход препарата
600000 о.е. 260/кг, содержание ДНК687., PHK — 1,6%, белка — 2,47., Предложенный способ позволяет получить конечный продукт, обладающий высокой степенью чистоты и удешевить процесс, поскоЛьку используется протосубтилин.
