Способ индикации микобактерий

 

СПОСОБ ИНДИКАЦИИ-МИКОБАКТЕРИЙ , путем парэнтерального введения лабораторным животным вещества, снижающего резистентность организма, с последующим введением исследуемого материала и анализом органов животного , отличающийся тем, что с целью повьшения чувствительности способа, животным в качестве вещества, снижающего резистентность организма, вводят однократно коклющную моновакцину в дозе 20-30 млрд микробных клеток за 6-7 дней до введения исследуемого материала.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) . (51) 4 С 12 И 1/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPGHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 27 61 821 28-1 8 (22) 28. 04. 79 (46) 23.07.86. Бюл, И 27 (7 1) Казанский ордена Трудового Красного Знамени государственный медицинский институт имени С.В.Курашова (72) Н.Ф.Амфитеатрова и Ю.Е.Брудная (53) 576.8.093.35(088.8) (56) Финкель Е.А. и Иихайлова Л.В.

Гидрокортизонный метод в биологичес-. ких исследованиях при туберкулезе.

Фрунзе, 1976, с. 3-5. (54) (57) СПОСОБ ИНДИКАЦИИ. МИКОБАКТЕРИЙ, путем парэнтерального введения лабораторным животным вещества, снижающего резнстентность организма, с последующим введением исследуемого материала и анализом органов животного, отличающийся тем, что с целью повьппения чувствительности способа, животным в качестве вещества, снижающего резистентность организма, вводят однократно коклюшную моновакцину в дозе 20-30 млрд микробных клеток за 6-7 дней до введения исследуемого материала.

Изобретение относится к области микробиологии и может найти применение в медицине и ветеринарии при исследовании микобактерий.

Известен способ индикации микобактерий путем парэнтерального введения лабораторным животным вещества, снижающего резистентность организма с последующим введением исследуемого материала и анализом органов животного.

Однако известный способ является недостаточно чувствительным.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Эта цель достигается тем, что способ индикации микобактерий осуществляют путем парэнтерального введения лабораторным животным вещества, снижающего резистентность организма, с последующим введением исследуемого материала и анализом органов животного, при этом животным в качестве вещества, снижающего ре-. зистентность организма, вводят однократно коклюшную моновакцину в дозе

20-30 млрд микробных клеток за 67 дней до введения исследуемого материала.

Предложенный способ осуществляют следующим образом.

Используют белых мьппей обоего пола массой 16-18 г. Животным внутри брюшинно однократно вводят коклюш— ную моновакцину в дозе 20-30 млрд микробных тел. Заражение животных культурой микобактерий производят через 6-7 дней после введения вакцины, внутривенно, по 0,5 мг сухой мас сы культуры в объеме 0 5 мл физиологического раствора. По истечении

1 мес после заражения животных за-. бивают. Трупы погибших ранее и забитых животных вскрывают и делают следующие анализы: микроскопия мазковотпечатков внутренних органов, посев суспензии этих органов на питательные среды, патогистологические ис:следования.

Пример 1. Беспородные белые мыши обоего пола массой 16-18 r были разделены на 3 группы по 10 мьппей в каждой. Первой группе животных с целью сенсибилизации организма одновременно внутрибрюшинно вводят коклюшную моновакцину в дозе 20 млрд микробных тел в объеме 1 мл за 6 дней до заражения исследуемой культурой.

Введение коклюшной

5 вакцины

1,57-+0,47 1,12- 0 5

786328 1

Второй группе животных в течение

5 дней до заражения ежедневно подкожно вводят гидрокортизон в дозе 1,0 мг. Третью группу составляли

5 интактные животные (контроль).

Животным всех трех групп внутривенно вводят фотохромогенную культуру М.kansasii (эталонный штамм) в дозе 0,5 мг сухой массы в объеме

10 0,5 мл физиологического раствора.

Зараженных животных наблюдают один месяц.

Пример 2. Для заражения используют скотохроммогенную культуру микобактерий, штамм Р 55, свежевыделенный от больного. Методика опыта была такой же, как в первом примере.

По истечении сроков наблюдения выживших животных, зараженных обеи20 ми культурами, забивают. Трупы животных, забитых и погибших ранее, вскрывают. Приготовляют мазки-отпечатки из легкого, печени, селезенки каждого животного; мазки окрашивают по методу Циля-Нильсена. При микроскопии подсчитывают количество кислотоупорных микобактерий в 100 полях зрения. Из тех же внутренних органов приготовляют суспензии в

Зо физиологическом растворе 1:5 и засевают по 0,2 мл на 3 пробирки среды Левенштейна-Йенсена. Посевы выдерживают в термостате до 2-3 месяцев, далее подсчитывают количество колоний в каждой пробирке. Результаты опытов оценивают по четырехбальной системе.

В каждой группе животных определяют среднее значение индекса веге4О тации микобактерий.

Полученные данные приведены в таблице.

Средние индексы вегетации микобактерий у зараженных животных по

45 данным микроскопии и посева

3 786328 4

Продолжение таблицы Как видно из таблицы, показатели вегетирования микобактерий у живот2 ных интактных (контрольная группа) значительно ниже, чем при использо5 ванин коклюшной моновакцины и гидрокортизона. Различие с контролем стаЮ,78 0,68+0,6, д, (p 0 01) Введение гидрокортизона

Редактор П, Горькова Техред И.Попович Корректор E. Ñèðîõìàí

Заказ 4033/2 Тираж 490 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Интактные живот- 10 ные (контроль),0,47 0,23 0,34 0,33

П р и м е ч а н и е: индекс указан с предельной ошибкой, при достоверности p=95X.

Предложенный способ позволяет по-, высить чувствительность лабораторных животных к микобактериям с.ослабленной вирулентностью по сравнению с интактными животными в 2-3 раза.