Способ получения вещества,обладающего противоопухолевой активностью

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАКЯЦЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ, путем предварительной аутог.емостимуляции доноров последующим забором крови, плазмофореза ее, вьоделения из полученной плазмы глобулиновой фракции и осаждения их нее целевого продукта; отличающийс я тем, что, с целью повышения активности целевого продукта, осаждение его ведут последовательной обработкой глобулиновой фракции этанолом, взятым в концентрации 26,53 и 96%, охлажденным до (-10)-(+15)"С.Iсл§00сл&9

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (И) А (594 А61 К 39 395

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 2818310/28-13 (22) 23.08.79 (46) 23.08.87. Бюл, Иу 31 (7I) Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови, Институт биофизики и Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.A.Герцена (72) О.К.Гаврилов, Н.С.Мурашова, А.В.Сиротенко, M.À.Козлова, Э.Н.Луковкина, В.M.Русанов, Н.Н.Клемпарская, T.Ä.Êóçüìèíà, А.М.Уланова, Г.А.Шальнова, И.П.Терещенко, З.М.Сараева, Ю.Я.Грицман и Э.К.Возный (53) 615.45: 615. 961. 018 (088.8) (56) Клемпарская Н.Н., Голосова Т.В., Шальнова Г.А. и др. О получении препаратов нормальных противотканевых антител человека и оценка их эффективности при экспериментальной лучевой болезни мышей. — "Радиобиология", 1978, т. ХУШ, вып. I, с. 66-68. (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ, путем предварительной аутогемостимуляции доноров последующим забором крови, плазмофореэа ее, выделения из полученной плазмы глобулиновой фракции и осаждения их нее целевого продукта; о т л и ч а ю щ и й— с я тем, что, с целью повышения активности целевого продукта, осаждение

его ведут последовательной обработкой глобулиновой фракции этанолом, взятым в концентрации 26,53 и 96Х охлажденным до (-10) -(+15) С.

811530

Способ осуществляют следующим образом.

Предварительно при отсутствии противопоказаний донорам крови проводят аутогемостимуляцию с последующим плазмофорезом. Аутогемостимуляцию проводят не более 2-х раз во избежании снижения выхода антител.. С этой целью из вены донора стерильным шприцем извлекают 8-8,5 мл крови и немедленно . вводят внутримышечно. Через 2-4 ч после аутогемостимуляции проводят плазмофорез известным методом.

Полученную плазму титруют при помощи реакции Уанье с антигеном почки человека на наличие аутоантител храо нят при температуре -20 G до 10 мес, затем подвергают фракционированию с помощью этанола. Для фракционирования подбирают только плазму, содержащую

Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения лечебных препаратов на основе белков плазмы крови человека.

Известен способ получения вещества, обладающего противоопухолевой активностью путем предварительной аутогемостимуляции доноров последующим забором крови, плазмофореза ее, вы деления их полученной плазмы глобулиновой фракции и осаждения из нее . целевого продукта.

Однако получаемое известным способом вещество обладает низкой активностью, что снижает эффективность лечения.

Целью изобретения является повышение активности целевого продукта.

Цель достигается тем, что при осуществлении способа получения вещества, обладающего противоопухолевой активностью путем предварительной аутогемостимуляции доноров последующим забором крови, плазмофореза ее выделения из полученной плазмы глобулиновой фракции и осаждения из нее целевого продукта, осаждение его ведут последовательной обработкой глобулиновой фракции этанолом, взятым в концентрации 26,5„ 3 и 96Х охлажденным до -10 — 15 С. аутоантитела. Наличие аутоантитела оценивают на основании реакции Уанье с плазмой крови донора и с антигенами

5 гомологичной почки. Для фракционирования наиболее пригодными являются пробы с резко положительными реакциями. Из отобранной плазмы получают осадок фракции» П+Ш. Затем из осадка готовят суспензию с 0,9Х-ным раствором натрия хлорида и дистиллированной водой и добавляют равный объему суспензии объем 26Х-ного этанола. Температура осаждения при этом составляет

15 -3 С. рН смеси корригируют ацетатным о буфером до 5,0-5,1. В этих условиях выпадают липоиды и глобулины. Затем центрифугированием удаляют липоиды и

96Х-ным этанолом осаждают глобулины.

20 При этом конечная температура осаж-. дения -5 -8 С, рН смеси корригируют

1 M NaHCO до 6,9-7,0. Затем осадок глобулина отделяют на центрифуге и иэ него готовят белковый раствор с

25 гликоколом, фильтруют через мезгу и подвергают лиофильной сушке. Сухой порошок растворяют в дистиллированной воде до концентрации 5Х и подвергают стерилизующей. фильтрации на

30 фильтре Millipor и стерильный раствор глобулинов оставляют для выхлопковывания на 2 Мес. По истечении этого срока производят стерильный розлив в ампулы, подвергают бактериоло->: гическому, физико-химическому, биологическому контролю, титруют на содер- жание противотканевых антител.

Таким образом, настоящий способ позволяет получить непирогенные, нетоксичные препараты глобулина с высоким содержанием нормальных противотканевых аутоантител, способствующих активизации неспецифической и противоопухолевой сопротивляемости opra низма онкологических больных.

Так как противотканевые аутоантитела связывают продукты распада тканей и активируют функцию иммунокомпетентных клеток, то их применение может быть полезным не только при опухолевом росте, но и при других патологических состояниях, связанных с деструкцией тканей и.иммунодепрессией.

ВНИИПИ Заказ 3985/1 Тираж 594 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4