Устройство для получения селекциони-рованных культур микроорганизмов изкультуральной взвеси, содержащей кровь

 

Союз Советских

Социалистических

Республик (ii)823424

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (63) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 31.01,79 (21) 2720955/28-13 с присоединением заявки Рй (51)M. Кд.

С 12 N 1/02

Госудорстаенний комитет

СССР по делам нзооретеннй н открытей (23) Приоритет

Опубликовано 23.04.81. Бюллетень М 15

Дата опубликования описан 27.04.81 (53 ) УД f(66 3,038 (088.8) (72) Авторы изобретения

К. Ф. Дубров и В. И. Фейгельман. (7! ) Заявитель

Ленинградский научно-исследовательский и вакцин и сывороток (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ СЕЛЕКШ4ОНИРОВАННЫХ

КУЛЬТУР МИКРООРГАНИЗМОВ ИЗ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ВЗВЕСИ, СОДЕРЖАЩЕЙ КРОВЬ

Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии и может быть использовано для получения селек.=

IJHoHHpoBBRHbIx .культур микроорганизмов- возбудителей инфекций и продуктов их жизнедеятельности из культуральной взвеси, содержащей кровь организма, чувствительного к данной инфекции.

Наиболее близким к предлагаемому является устройство для получения селекционированных культур микроорганизмов из культуральной взвеси, содержащей кровь, включающее селекционную камеру с элементом для фиксации лейкоцитов flf.

Селекционная камера в известном устройстве имеет глубину до 100 мк, а элементом для фиксации лейкоцитов явля« ется покровное стекло.

Недостатком известного устройства является малое количество и низкая кон20 центрация получаемых микрокапсульных бактериальных клеток и, как следствие этого, принципиальная невозможность получения продуктов жизнедеятельности по2 следних (токсинов, ферментов и пр.) в связи стем,,что нельзя увеличить глубину камеры, поскольку селекция возможна только в том слое камеры, где находятся прикрепленные х стеклу лейкоциты.

Цель изобретения — повышение выхода конечного продукта и обеспечение возможности получения продуктов жизнедеятельности селекционированных культур.

Указанная цель достигается тем, что устройство, включающее селекционную камеру с элементом для фиксации лейкоцитов, содержит трубопровод и насос с импульсным прерывателем, подсоединенные к камере с образованием замкнутого циркуляционного контура, при этом элемент для фиксации лейкоцитов выполнен из псристого материала на основе стекла.

На чертеже изображено устройство для получения селекционированных культур микроорганизмов из культуральной взвеси, содержащей кровь.

Устройство содержит селекционную камеру 1, содержащую элемент 2 для фик3 8234 .сации лейкоцитов, выполненный из пористого материала на основе стекла (например, стекловаты или пористого стекла), трубопровод 3 и насос 4, подсоединенные к камере 1 с образованием замкнутого циркуляционного контура, импульсный прерывагель 5, управляющий работой насоса, обеспечивая тем самым импульсный режим рециркуляции кул ьгуральной взвеси.

Устройство может содержать дополнительную камеры 6 для органов и тканей,,Пля предотвращения попадания частиц элемента 2 или кусочков органов или тканей в трубопровод 3 в местах присоединения его к камерам 1 и 6 установлены сетки

7, которые могут быть изготовлены из ха прона.

Йля изготовления трубопровода 3 и корпусов камер 1 и 6 удобно использовать >р селикон, что позволяет. осуществлять визуальное наблюдение за ходом .селекции.

Не допускается изготовление упомянутых элементов из стекла, так как это приводит к загрязнению устройства и, в конечном иго- 5

re, к снижению его производительности по причине прилипания лейкоцитов к стеклу.

Устройство работает следующим образом.

Предварительно простерилизованное 3О (например, облучением радиоактивным кобальтом) устройство стерильно заполняют

Достигнутая концентрация микробных клеток, млрд/мл

Титр токсина

1:160

0,.2

Время импульса 3 сек

Время паузы 3 мин

1;320

0,2,"

1: 12 80

0,5 щения выхода конечного продукта и воз45 можности получения также и продуктов жизнедеятельности селекционированных культур, устройство содержит трубопровод .и насос с импульсным прерывателем, подсоединенные к камере с образованием зам5О кнутого циркуляционного контура, при этом элемент для фиксации лейкоцитов выполнен из пористого материала на основе стекла.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1.Авторское свидетельство СССР по заявке ¹ 2223919/28-13, кл, С 12 К /10, 10.08,77. именение устройства для получе селекционированной, культуры возбудителя брюшного тифа позволило обеспечить накопление гемолизина до титра 1:24, тог-. да как в исходной культуре гемолизин не . обнаруживался . Устройство аппробировано также при селекции золотистого стафи— лококка и гемолитического стрептококка., -Формула изобретения

Устройство для получения селекциьнированных культур микроорганизмов из культуральной взвеси, содержащей кровь, включающее селекционную камеру с элементом для фиксации, лейкоцитов, о г л ичаю шее с ятем, что, сцельюповыРежим работы импульсного прерывателя

Непрерывный (импульсный прерыватель отключен) Время импульса 3 сек

Время паузы . 0,5 мин

24 4 исходной культурой микроорганизма-воз-будителя инфекции и плазмой крови (с взвешенными в ней лейкоцитами) организма, чувствительного к данной инфекции.

Устройство устанавливают в помещении с температурой, оптимальной для роста и развития селекционируемой микробной культуры. Затем включают насос 4 и импульсный прерыватель 5. При этом осу-. ществляются повторяющиеся циклы прилипания диссоциированных форм бактерий к прикрепленным к фиксирующим элементам лейкоцитам, их захвата Hl переваривания фагоцитирующей фракцией лейкоцитов. В то >ке время формы микроорганизмов, обладающие защитными приспособлениями (в частности, микрокапсульные), не фагоцитируются, они циркулируют и размножаются в магистралях, выделяя при этом в циркулирующую среду продукты своей жизнедеятельности (ферменты, токсины), как это происходиг в живом организме.

При повторном использовании устройства необходимо заменить элемент 2.

B таблице представлены результаты работы устройства при получении селекционированной культуры NG1SSBY 1с1

memngAjdiS, штамм А-208 и менингококкового токсина.

Использование устройства позволило получить менингококковый токсин впер: вые в мировой практике.

823424

Составитель Б. Фейгельман

Редактор А. Шандор Техред N Контура Корректор Ю. Макаренко.

Заказ 2004/33 Тираж 528 . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открьггий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5

Филиал ППП Патент, r, Ужгород, ул. Проектная, 4