Способ количественного определения 3-метокси-4- оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты

 

Союз Советских

Социалистических

Республнк

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ИТИЛЬСТВУ

<1 в864074 (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 181279 (21) 2858271/23-04 с присоединением заявки Мо (23) Приоритет (5ЦМ. Кл.

6 01 и 21/64 .

Государственный комитет

СССР оо делам изобретений и открытий

Опубликовано 15.09,81, Бюллетень Но 34 (53) УДК 543.544 (088.8) Дата опубликования описания 15,0981 (72) Авторы изобретения

J t

A.A.Õàáàðoâ и Л.И.Поваляев ("

Читинский медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ 3-МЕТОКСИ-4-ОКСИБЕНЗИЛИДЕНГИДРАЗИДА ИЗОНИКОТИНОВОЙ

КИСЛОТЫ

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения 3-метокси-4-оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты (фтивазида).

Известен способ определения 3-метокси-4-оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты, заключающийся в обработке анализируемой пробы этиловым спиртом при кипячении раствора с обработкой горячего раствора сульфатом меди и роданидом аммония с получением желто-зеленого осадка с последующим весовым определением

3-метокси-4-оксибензилиденгидразина 1з изоникотиновой кислоты (ij, Недостаток способа — енизкая чувствительность 10 мкг/мл.

Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигае- 20 мому результату является способ количественного определения 3-метокси— -4-оксибенэилиденгидразида изоникотиновой кислоты, заключающийся в спектрофотометрировании анализируемой 25 пробы 2) .

Недостатки данного способа — низкая чувствительность (1,3 мкг/мл) и избирательность (определению мешают почти все органические соединения,,30 которые поглощают в ультрафиолетовой области). с, Целью изобретения является повыше" ние чувствительности и избирательности определения. .Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения З-метокси-4-.

-оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты, последовательно обрабатывают анализируемую пробу диметилформамидом, нитратом цинка, гидроксидом аммония с последующим измерением флюоресценции,полученного при этом раствора.

Отличительным признаком способа является последовательная обработка анализируемой пробы диметилформамидом., нитратом цинка, гидроксидом аммония и последующее измерение флюоресценции полученного при этом раствора.

Пример 1. Определение фтивазида в таблетках по 0,5 r, 0,03-0,04 г (точная навеска) мел коизмельченных таблеток переносят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют

70-80 мл диметилформамида и энергич- но встряхивают 3-5 мин. Затем доливают диметилформамидом до метки 864074 таблица 2

0,05

Таблица

Метрологические хахарактеристики

Навеска, г

Найдено по калибровочному графику, мкг/мл

70 50

О, 0281

0,0284

О, 0302

0,0309

2, б 0,4946

2, 7 0,4968

+21. 10 4

0,0321

0,0338

2,8

О;4948

0,4921

2,8

E 0,06

+15 10

0,0346 2,9 е

0,0349 3, О

0,4971

0,4948 a=0,4936>

+15 . 10

0,0361

0,0378

3,2

0,4828

0,4916

3,4

Формула изобретения (раствор А). 1 мл раствора А переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят диметилформамидом до метки.

К 9 мл данного раствора -прибавляют .1 мл 1Ъ-ного раствора нитрата цинка в диметилформамиде, одну каплю 3 н. раствора гидроксида аммония, перемешивают и флюориметрируют по отноше нию к стандартному раствору с содержанием 1, 2, 3 или .4 мкг/мл фтиваэида. Для чего к 9 мл стандартного раствора фтивазида в диметилформами« 10 де прибавляют 1 мл 1%-ного раствора нитрата цинка, 1 каплю 3 н. раствора гидроксида аммония, перемешивают и флюориметрируют по отношению к исследуемым образцам. 35

Результаты флюометрического определения фтивазида в таблетках по 0,5 r представлены в табл. 1.

2,4 0,4961

2,4 0,4948 Х=0,4936

Пример 2. Определение фти- 5й вазида в крови или моче.

К 1 мл плазмы крови или мочи прибавляют 5 мл иэоамилового спирта, встряхивают в течение 5 мин, центрифугируют при 3000 об/мин 3 мин и органический слой сливают в выпарительную чашку. Экстрагирование повто. ряют. Изоамиловый спирт выпаривают на водяной бане. К остатку добавляют 9 мл диметилформамида, 1 мл 1%ного раствора нитрата цинка в диме- 40 тилформамиде, 1 каплю концентрированного раствора гидроксида аммония, флюориметрируют против стандарта с содержанием 0,5, 1,0 или 4 мкг/мл фтивазида в диметилформамиде. 65

Зависимость между интенсивностью флюоресценции и концентрацией фтивазида показана в табл. 2.

0,01 0,1 1,0 10 10 10

0,02 0,2 2,0 17 18 18

0,03 3,0 25 26

0,04 О 4 4,0 33 33 34

0,5 5,0 40 41 39

0,06 0,6 6,0 47 48 44

О 07 О 7 7 О 54 55 48

0 08 0,8 8,0 61 62 50

0,09 0,9 9,0 68

0,10 1,0 10,0 75 77 50

Чувствительность известного спо соба 1,3 мкг/мл, предлагаемого0,01 MKI /MII. Спектр возбуждения флюоресценции полученного при этом раствора лежит в области 260-380 нм с максимумом 328 нм, а спектр излучения флуоресценции - 360-560 нм с максимумом 498 нм.

Сопутствующие ингредиенты, находящиеся в таблетках, не мешают прямому определению фтивазида. Линейная зависимость между интенсивностью фйооресценции и концентрацией фтивазида лежит 0,01-4 мкг/мп (табл.2).

В.биологических жидкостях (кровь, моча) 100% фтиваэида открывается с

О 1 мкг/мл.

Использование предлагаемого изобретения позволяет без отделения от сопутствующих ингредиентов проводить определение фтивазида в лекарствена ных препаратах, а также в биологических жидкостях, что выгодно отличает его oT ранее известного

Способ количественного определения 3-метокси-4-оксибензилиденгидразида изоникотиновой кислоты, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствисельности к избирательности определения, анализируемую пробу последовательно обрабатывают диметилформамидом, нитратом цинка, гидрооксидом аммония с последующим измерением флюоресценции полученного при этом раствора.

864074

Составитель Л. Соломенцева

Техред М. Голинка Корректор У.Пономаренко

Редактор М.Келемеш

Заказ 7763/61 Тираж 910 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, .4

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Пособие по качественному анализу фармацевтических препаратов в двухкомпонентных лекарственных смесях. М., "Медицина", 1973, с. 172.

2. Брушко JI.È., Гриценко С.В. .,Руководство по количественному анализу лекарственных препаратов . М., 1978, с. 113 (прототип).