Способ количественного определения аммиака в крови

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А8ТОР СКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

iiii898327 (6I ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 04.01.80 (2l ) 2864517/28 -13 с присоединением заявки РЙ (23) Приоритет

Опубл вковано 1 5. 01. 82. Бюллетень ® 2

Дата опубликования описания 17.01.82 (5! )М. Кл.

Gi 01Ì ЗЗ/84

Государстоеииый комитет оо делам изооретений и откоытий (53) ЙК 543.272. .35 (088.8) (72) Автор изобретения

A. Г. Магарламов

Киевский научно-исследовательский институт ге и переливания крови (7!) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АММИАКА

В КРОВИ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической практике для диагностических и прогностических целей.

Известен способ количественного определения аммиака в крови путем осажде5 ния белка с последующей обработкой безбелкового фильтра фенолгипохлоритным реактивом и спектрофотометрии окрашенного раствора (11

1о

Однако известный способ не обеспечивает высокой точности, так как аммиак окрашивают в определяемой пробе в при сутствии различных экстрактивных азотосодержащих веществ и некоторых органи15 ческих и неорганических ионов, которые в той или иной степени ингибируют образование окраски.

Целью изобретения является повышение точности способа, 2о

Эта цель достигается тем, что способ количественного определения аммиака в крови осуществляют путем осаждения белка с последующей обработкой безбелковоro фильтрата фенолгипохлоритным реактивом и спектрофотометрии окрашенного раствора, в кровь перед осаждением белка вносят 3,5%-ный раствор тетрафейилбората в этиловом спирте и образовавшийся осадок растворяют в ацетоне.

Пример . B 1 мл крови добавляют 2 мл 3,5%ного раствора тетрафенилбората натрия в этиловом спирте, центрифугируют при 2000-2500 об/мин 3- .

4 мин. После центрифугирования надосадочную жидкость отбрасывают, к осадку добавляют 2 мл ацетона, смешивают и вновь центрифугируют. Затем в полученную надосадочную жидкость прибавляют

2 мл нитропруссид фенолового реактива и 2 мл гипохлоритного реактива, хорошо перемешивают, ставят в термостат и инкубируют 15 мин при 37-38 С. После о инкубации пробы колориметрируют при длине волны 625-630 нм.

Количество аммиака вычисляют по стандартному калибровочному графику.

Поскольку аммиак отделяют от других

27 4

Способ благодаря своей надежности и точности может быть использован при диагностике и прогностике различных заболеваний (прекоматозное состояние эндогенного и экэогенного характера, порто-системная энцефалопатия, кровотечения в верхней части желудочно-кишечного тракта, циррозы и другие заболевания, связанные с коллатеральной циркуляцией в портокаввльной системе, паренхиматоэные и холестатические желтухи, асциты и карциномы органов брюшной полости ) .

16,1 + 0,7

29,9 + 2,1

42,1+ 2,4

53,7 « 4,3

69,2 1 4,3

:. 60

100

Примечание. Аммиак, имеющийся в самой крови, учитывается вычитанием показателей контрольной пробы. кровь перед осаждением белка вносят

3,5%- ный раствор тетрафенилбората в этиловом спирте и образовавшийся осадок растворяют в ацетоне.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Балоховский С. Д., ВалоховскийИ.С.

Методы химического анализа крови.

Медгиэ, 1953, с. 320-322.

Составитель С. Малютина

Редактор М. Биткина Техред М. Надь Корректор Ю. Макаренко

Заказ 11939/60 Тираж 882 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 8083 взотосодержаших соединений, имеющихся в крови, калибровочный график строится

s водно-ацетоновых (1:3) растворах сернокислого аммония.

Предлагаемый способ обладает высокой чувствительностью (0,1 мкг азота аммиака в пробе), надежностью и точностью, легко воспроизводим.

В таблице показаны результаты сравнительного определении в донорской кро- 10 ви количества аммиака, добавленного извне по известному способу и по предлагаемому способу.

Формула изобретения

Способ количественного определения аммиака в крови путем осаждения белка с последующей обработкой беэбелкового фильтрата фенолгипохлоритным реактивом и спектрофотометрии окрашенного раствора, о т л и ч а ю ш и и с я тем, что, с целью повышения точности способа, в

193+ 0,6

38,9 0,9

58,1 + 1,7

77,6 2,8

95,9 + 4,8