Камера для культивирования клеток

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (ii)905276

Ф

В ,l -° "òÔ (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) За я влеио 29.09.75 (21) 2176604/28 — 13 (53)М. Кл.

С 12 М 1/00 с присоединением заявки М

3Ъоудзрстввнный комнтвт

СССР (28) Приоритет (53) УД К663.032..14 (088.8) но лолам нзаорвтеннй н отнрытнй

Опубликовано 15.02.82. Бюллетень щ 6

Дата опубликования описания 15,02.82 (72) Авторы изобретения

М. И. Грутман и С. Л. Ягуд г

Киевский научно-исследовательский институт эпидемтгологии, микробиологии и паразитологии (71) Заявитель (54) КАМЕРА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК

Изобретение относится к иммунологии к микробиологии и может быть использовано для культивирования клеток животных и человека и изучения их взаимодействия с микроорганизмами.

Наиболее близкой к предлагаемой является камера для культивирования клеток, содержащая корпус, патрубок для введения питательной среды и клеток и покровные стекла (1) .

Однако покровные стекла в известной камере уложены на ее дне, что создает определенные неудобства при работе с ней, поскольку при смене отработанной среды часть ее из-за капиллярного эффекта задерживается в щелях между стеклами (пластинками), к которым прикрепляются культивируемые клетки, и корпусом камеры.

Остающиеся в задерживающейся при смене отработанной культуральной среде внеклеточно расположенные микробы и продукты их распада вызывают быструю гибель культивируемых клеток. В связи с этим в такой камере нельзя осуществлять изучение взаимодействия клеток с микробами, Кроме того, стеклянные пластинки, на ко; торых фиксируются культнвируемые клетки, не закреплены и в ходе культивирования при замене среды или при извлечении их иэ камеры могут смещаться, переворачиваться, накладываться друг на друга, что ведет

° ° к повреждению клеток и соответственно к их гибели.

Цель изобретения — пролонгация жизни клеток путем облегчения полной смены среды °

Цель достигается тем, что камера для л культивирования клеток, содержащая корпус, патрубок для введения питательной среды и клеток и покровные стекла, снабжена вкладышем, состоящим из вертикальных радиально расположенных пластин, соединенных по периметру и в центре перемычками, рас.положенными íà высоте, исключающей задержку среды при сливе, и имеюгцими в сечении форму треугольника, направленного

5276

45 кл. С 12 К 9/00, 1965.

3 90 вершиной вверх, а покровные стекла размещены на этих перемычках.

При такой конструкции вкладыша и таком расположении стекол на вкладыше объем и количество капиллярных пространств, в которых задерживается при смене отработанная среда, зараженная микробами, сводится до минимума. Это создает воэможность путем частой (подобранной для каждого вида микробов) смены среды практически освободить культуральную жидкость от внеклеточно расположенных микробов и тем самым исключить губительное влияние их самих и продуктов их распада на культи. вируемые клетки и значительно продпить сроки культивирования клеток.

На фиг. 1 изображена камера с вкладышем в собранном виде; на фиг. 2 — вкладыш, диаметральный разрез; на фиг. 3— то же, вид в плане; иа фиг. 4 — перемычка, поперечный разрез; на фиг. 5 — покровное стекло, вид в плане.

Камера для культивирования клеток содержит корпус 1, пробку 2, патрубок 3 для слива отработанной среды, патрубок 4 для введения свежей питательной среды, ятрубок 5 дпя отвода возщиа. В полости корпуса 1 расположен вкладыш 6, который состоит из вертикальных радиально расноло женных пластин, нижняя часть 7 которых служит ножками, а верхняя 8 — бортиками.

Пластины соединены по периметру и в центре перемычками 9, которые в сечении имеют форму треугольника направленного вершиной вверх. На перемычках расположены покровпые стекла 10, имеющие форму трапеции.

Перемычки расположены на высоте, исключающей задержку среды при сливе.

Наилучшим материалом для вкладышей является химически инертный фторопласт, который выдерживает стерилизацию в автоклаве при 1 ати..

Культивирование клеток в камере осуществляется следующим образом.

Первоначально ее заполняют питательной средой, содержащей культивируемые клетки и оставляют па несколько часов в термостате для того, чтобы клетки фиксировались на стеклах 10. Затем в камеру вводят культуру микробов и инкубируют в течение

1,5 ч для взаимодействия микробов с культивнруемыми клетками После этого среду сливают. Стекла 10 в камере трижды промывают свежей средой для удаления нефагоцитированных микробов. Затем камеру подключают к устройству, производящему автоматическую смену среды в следующей последовательности: полный слив отработанной среды, заполнение камеры свежей средой.

В такой последовательности смену среды, осуществляют с частотой., позволяющей ocsoбодится от внеклеточно расположенных микробов и продуктов их жизнедеятельности (подбирается для каждого вида микробов отдельно). В случае работы с брюшнотифозными микробами эта частота равна примерно

20 мин. По мере необходимости стекла 10 с культивируемыми клетками извлекают из камеры для исследования.

Пролонгация жизни культивируемых клеток с сохранением их функциональной активности зйачительно расширяет возможности в решении ряда актуальных проблем инфекционной патологии. Камеру можно использовать для изучения патогенеза инфекций, механизмов формирования бактерионосительства, механизмов иммунитета и роли клеточных факторов иммунитета в борьбе с возбудителем, для изучения вопросов, раскрывающих взаимодействие возбудителя с клеточными и внутриклеточными структурами организма при различных инфекциях.

Формула изобретения

Камера для культивирования клеток, ссдержащая корпус, патрубок для введения питательной среды и клеток и покровные стекла, отличающаяся тем, что, с целью пролонгации жизни клеток путем облегчения полной смены среды, камера снабжена вкладышем, состоящим иэ вертикальных радиально расположенных пластин, соединенных по периметру и в центре перемычками, расположенными на высоте, исключающей задержку среды при сливе, и имеющими в сечении форму треугольника, направленного вершиной вверх, а покровные стекла размещены на этих перемычках.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1, Авторское свидетельство СССР И 180759,