Патенты автора Ярыгин Константин Никитич (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейрональных прогениторных клеток в условиях теплового шока. Указанная композиция характеризуется тем, что в ее состав входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 3 кДа до 250 кДа, из которых 60% имеют молекулярную массу в диапазоне от 10 до 50 кДа, мозговой нейротрофический фактор (BDNF) не менее 120 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 40 пг/мл, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) не менее 60 пг/мл, суммарная масса белка не менее 1 мг/мл препарата. При этом клеточная культура нейрональных прогениторных клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию нейронального маркера β3-тубулина, молекулы адгезии нервных клеток (PSA-NCAM) и состоит из 99,5±2,45% TUBB3+-клеток. Изобретение позволяет эффективно получать белково-пептидную композицию, в которую будут включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы, эффективность действия которых факторов заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 4 пр.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейрональных прогениторных клеток в условиях гипоксии, а также к ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейрональных прогениторных клеток в условиях гипоксии. Указанная композиция характеризуется тем, что в ее состав входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 5 кДа до 250 кДа, мозговой нейротрофический фактор (BDNF) не менее 130 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 30 пг/мл, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) не менее 90 пг/мл, суммарная масса белка не менее 1 мг/мл препарата. При этом клеточная культура нейрональных прогениторных клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию нейронального β - тубулина III, молекулы адгезии нервных клеток (PSA-NCAM) и состоит из 95±5% TUBB3+ - клеток. Изобретение позволяет эффективно получать белково-пептидную композицию, в которую включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы, эффективность действия которых заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. 2 н.п. ф-лы, 4 пр., 2 ил.
Изобретение относится к получению ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из глиальных прогениторных клеток в условиях теплового шока. Способ включает забор биоптата кожи, получение культуры фибробластов, криоконсервацию культуры фибробластов, размораживание культуры фибробластов, адаптирование культуры фибробластов к xeno free условиям культивирования, репрограммирование фибробластов для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК), культивирование ИПСК, криоконсервацию ИПСК, размораживание ИПСК, дифференцировку ИПСК в глиальные прогениторные клетки, культивирование глиальных прогениторных клеток в условиях теплового шока, сбор кондиционированной среды и получение белково-пептидного комплекса. Для моделирования теплового шока глиальные предшественники культивируют в течение часа при 40°С в ростовой среде, содержащей DMEM/F12, 2% добавки В27, 20 нг/мл FGF-2, 1 мкМ пурморфамин, после чего производят замену среды на DMEM/F12 и культивируют в течение 6 часов, после чего кондиционированную среду собирают и центрифугируют при 300 об/мин в течение 5 минут, супернатант отбирают и концентрируют в 24 раза с помощью 3 кДа мембран Amicon Ultra, затем полученный концентрат подвергают стерилизующей фильтрации и получают ноотропную композицию. В состав композиции входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 3 до 250 кДа, из которых 65% имеют молекулярную массу в диапазоне от 10 до 60 кДа, содержание белков теплового шока не менее 40% от общей массы белков, мозговой нейротрофический фактор (BDNF) не менее 140 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 60 пг/мл, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) не менее 80 пг/мл, суммарная масса белка не менее 1 мг/мл препарата, при этом клеточная культура глиальных прогениторных клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию астроглиальных маркеров S100b и GFAP и состоит из 98±2% S100b+ - клеток. Изобретение позволяет расширить арсенал технических средств. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 4 пр.
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НЕРУБЦОВОЙ АЛОПЕЦИИ // 2695364
Изобретение относится к эстетической медицине и может быть использовано для лечения нерубцовой алопеции. Способ лечения нерубцовой алопеции, заключающийся в том, что предварительно получают клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, для чего выдергивают волосы из волосистой части головы взрослого донора и помещают их в раствор Хенкса с антибиотиком и антимикотиком, отбирают волосы, находящиеся в стадии анагена, и отсекают от них волосяные фолликулы, которые промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотика и антимикотика и переносят в раствор коллагеназы I-го типа, где их инкубируют, и переносят в культуральные флаконы, а через 21 день клеточный материал диссоциируют из сфероидов, образованных в культуральных флаконах, получая окончательно клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, и получают также клеточный материал в виде мезенхимальных стромальных клеток плаценты человека и клеточный материал в виде эндотелиоцитов пуповинной вены, после чего каждый вид клеточного материала переносят в суспензию с использованием раствора трипсина с версеном, материал промывают физиологическим раствором с последующим переносом в стерильной среде в вакуумную пробирку, затем клеточный материал трех полученных видов, полученный при определенных условиях, смешивают, переносят в пробирку и хранят, при определенных условиях, для последующего введения через иглу в мезодермальный слой кожи в виде папул с размером от 2 до 4 мм при угле наклона иглы в 45°. Вышеописанный способ позволяет расширить арсенал способов лечения нерубцовой алопеции. 5 ил.
Изобретение представляет собой ноотропную белково-пептидную композицию на основе полипептидных комплексов, выделенных из нейронов и глиальных клеток, полученных методом направленной дифференцировки индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека, характеризующуюся тем, что в ее состав входят белки и полипептиды с молекулярной массой от 0,5 до 100 кДа, из которых 75% имеют молекулярную массу в диапазоне от 10 до 90 кДа, содержание мозгового нейротрофического фактора (BDNF) не менее 50 пг/мл и глиального нейротрофического фактора (GDNF) не менее 40 пг/мл, суммарная масса белка не менее 20 мг/мл препарата, при этом клеточная культура индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, из которой получают композицию, демонстрирует экспрессию генов, специфичных для ИПСК ОСТ4, SOX2, NANOG, FOXD3, HESX1, SALL4, а также для нейральных клеток DARPP-32, РАХ6, FOXP2, NCAM1, ENO2, Nestin, TUBB3, НТТ и синаптического транспортера ГАМК GAT1. Использование клеточных культур человека позволяет получить белково-пептидную композицию, в которую будут включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы. Эффективность действия таких факторов заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. Использование ИПСК в качестве источника получения белково-пептидной композиции позволяет решить проблему дефицита донорского материала и этические вопросы, возникающие при применении для аналогичных целей эмбрионального материала и культур эмбриональных стволовых клеток человека. 4 пр., 3 ил.
Изобретение относится к способу получения белково-пептидной композиции с ноотропными свойствами и включает в себя: забор биоптата кожи, получение культуры фибробластов, криоконсервацию культуры фибробластов, размораживание культуры фибробластов, репрограммирование фибробластов для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК), культивирование ИПСК, криоконсервацию ИПСК, размораживание ИПСК, нейрональную дифференцировку ИПСК, получение белково-пептидного комплекса. Получение белково-пептидного комплекса таким способом позволяет избежать иммунологических конфликтов, развитие которых возможно при использовании пептидных композиций ксеногенного происхождения, полученных из тканей мозга свиней, овец и других животных. Кроме того, использование клеточных культур человека позволит получить белково-пептидную композицию, содержащую белки и пептиды с молекулярной массой до 100 кДа, в которую будут включены не только небольшие пептиды, но и полноразмерные белковые нейрональные ростовые и дифференцировочные факторы. Эффективность действия таких факторов заведомо выше, чем у коротких пептидов, а иммуногенность отсутствует. Использование ИПСК в качестве источника получения белково-пептидной композиции позволяет решить проблему дефицита донорского материала и этические вопросы, возникающие при применении для аналогичных целей эмбрионального материала и культур эмбриональных стволовых клеток человека. 3 ил., 4 пр.
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НЕРУБЦОВОЙ АЛОПЕЦИИ // 2681854
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу лечения нерубцовой алопеции. Способ лечения нерубцовой алопеции включает введение в мезодермальный слой кожи в зоне облысения клеточного материала, полученного путем выдергивания волос из волосистой части головы взрослого донора, помещения в раствор Хенкса с антибиотиком и антимикотиком, отбирают волосы в стадии анагена и отсекают от них волосяные фолликулы, промывают раствором Хенкса с антибиотиком и антимикотиком и переносят в раствор коллагеназы, инкубируют и переносят во флаконы с коллагеновым покрытием, содержащие DMEM:F12 и фетальную телячью сыворотку в растворе гентамицина, стрептомицина и глутамина, через 21 день клеточный материал диссоциируют, переносят в суспензию с использованием раствора трипсина с версеном, клеточный материал промывают физиологическим раствором путем центрифугирования, переносят в стерильной среде в вакуумную пробирку, вводят в мезотермальный слой кожи при определенном угле наклона иглы. Вышеописанный способ - эффективный пролонгированный регенеративный способ лечения нерубцовой алопеции. 3 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к сосудистой хирургии, гематологии и ангиологии, и может быть использовано для лечения ишемической ангиопатии сосудов нижних конечностей. Для этого осуществляют инъекции клеток мезенхимального происхождения в пораженные нижние конечности. В качестве клеток мезенхимального происхождения используют клетки пуповины или плаценты, полученные после нормальных родов. Клетки вводят путем инъекций 1 мл физиологического раствора, содержащего 5-10⋅106 клеток, в каждую акупунктурную точку. При этом используют рецепт 1 и рецепт 2, чередуя использование рецептов через процедуру. Рецепт 1 включает точки Е36, RP6, Е41, VB41, F8, V56, V63. Рецепт 2 включает точки Е40, F5, R8, F4, Е43, R10, V57, V65. Курс лечения составляет 10 процедур, проводимых через день. Способ обеспечивает повышение эффективности лечения за счет коррекции нарушений гемодинамики в очаге ишемии и улучшения реологических свойств крови. 1 табл., 3 пр.
Способ лечения нерубцовой алопеции // 2631642
Изобретение относится к эстетической медицине и может быть использовано для лечения алопеций. Способ основан на введении в мезодермальный слой кожи мезенхимальных стволовых клеток. Эти клетки выделяют из биоптата кожи с волосистой части головы взрослого донора. Дополнительно выделяют мезенхимальные стволовые клетки из плаценты. После этого указанные клетки смешивают в соотношении от 3:1 до 1:3, доводят объем смеси до 2-4 мл. Эту смесь вводят в мезодермальный слой кожи в зоне облысения на глубину 2-3 мм через каждые 2-3 мм при объеме каждой инъекции, равном 0,02 мл. 1 пр., 1 табл., 1 ил.
Способ оценки качества клеточного материала // 2620969
Изобретение относится области микробиологии и медицины. Изобретение представляет собой способ оценки жизнеспособности клеточного материала, полученного из пуповины и плаценты человека, согласно которому клетки пересевают в полной ростовой среде на 96-луночный планшет по 5000 клеток первые 8 лунок, по 2500 клеток во вторые 8 лунок и по 1250 клеток в третьи 8 лунок, через 6 часов из лунок удаляют среду и вносят в каждую лунку по 100 мкл культуральной среды без фетальной телячьей сыворотки и по 10 мкл раствора бромид 3 -(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-тетразолия (МТТ) 10 мг/мл в PBS (натрий-фосфатный буфер, представляющий собой водный раствор солей, содержащий хлорид натрия, гидрофосфат натрия, хлорид калия и дигидрофосфат калия, в котором осмолярность и концентрации ионов в растворе соответствуют концентрациям в теле человека - изотонический буферный раствор), затем инкубируют 1 час при 37°С в атмосфере 5% СО2, после инкубации из лунок культурального планшета удаляляют среду без захвата клеток и вносят по 100 мкл диметилсульфоксида для экстракции внутриклеточного МТТ-формазана и измеряют оптическую плотность спектрофотометрически при длине волны 540 нм против диметилсульфоксида, где к жизнеспособному клеточному материалу относят III-VI пассажи с сигналом 6,5*105 опт.ед. и выше на 5 тыс./кл. Изобретение позволяет повысить оперативность. 8 ил.
Изобретение относится к медицине. Предложен способ выделения мезенхимальных стволовых клеток из плаценты новорожденного (после родов на 38-40 неделе гестации). Небольшие кусочки амниона плаценты вместе с неглубоким захватом хориона промывают от крови раствором Хенкса с добавлением антибиотика и антимикотика, измельчают, инкубируют 1-2 ч при 37°С в 0,1% растворе коллагеназы I-го типа. Полученную суспензию осаждают центрифугированием, осадок ресуспендируют, затем культивируют со сменой ростовой среды до достижения полученной первичной культурой клеток 80%-ной конфлюэнтности. Изобретение обеспечивает возможность долговременной криоконсервации клеток в жидком азоте (-196°С) и дальнейшее восстановление препарата с сохранением высокого процента жизнеспособных клеток. 3 ил.
Изобретение относится к области ветеринарии и клеточных технологий. Предложен способ лечения экспериментального туберкулеза легких у мышей с использованием трансплантации стволовых клеток путем введения в хвостовую вену мышей один раз в неделю суспензии стволовых клеток, выделенных из костей мышей гибридов, резистентных к туберкулезу, с генотипом "k" в области H-2E. 3 табл.
Изобретение относится к ветеринарии и касается лечения заболеваний роговины у собак
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и касается лечения артроза височно-нижнечелюстного сустава
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПАРОДОНТИТА // 2440060
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургической стоматологии, и может быть использовано при лечении заболеваний пародонта
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для изучения этиологии и патогенеза пародонтита, а также для определения тактики лечения пародонтита в случае, когда явные признаки обострения пародонтита отсутствуют
СПОСОБ БИОСТИМУЛЯЦИИ ОРГАНИЗМА СОБАК // 2371188
Изобретение относится к области ветеринарии
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПАРАЛИЧА И ЭПИЛЕПСИИ У СОБАК // 2371187
Изобретение относится к области ветеринарии
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ УШИБА ГОЛОВНОГО МОЗГА // 2347578
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, травматологии, нейрохирургии, и может быть использовано при лечении острых черепно-мозговых травм
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ МЕЗОТЕРАПИИ И ПРЕПАРАТ, ПОЛУЧЕННЫЙ ЭТИМ СПОСОБОМ (ВАРИАНТЫ) // 2308957
Изобретение относится к области медицины и может использоваться в способах получения препаратов для мезотерапии, применяющихся для коррекции возрастных изменений кожи лица при старении
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии
