Патенты автора Забережный Алексей Дмитриевич (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ диагностики энзоотической пневмонии свиней методом полимеразной цепной реакции, включающий проведение реакции ПЦР с использованием реакционной смеси, праймеров к фрагменту генома Mycoplasma hyopneumoniae с помощью амплификатора с заданными температурно-временными параметрами проведения ПЦР, после проведения амплификации результат анализируют с помощью электрофореза в 2%-ном агарозном геле с использованием 50-кратного ТАЕ-буфера, содержащего бромистый этидий в конечной концентрации 1,2 мг/мл, и учетом положительных проб в ультрафиолетовом свете с длиной волны 254 нм, где реакцию ПЦР проводят в один раунд, в качестве мишени используют фрагмент гена специфического поверхностного белка р102 Mycoplasma hyopneumoniae, в качестве реакционной смеси на одну реакцию ПЦР используют 15,25 мкл однократного реакционного буфера, содержащего 1,5 ммоль MgCl2; 1,0 мкл (10 пмоль) прямого праймера р102 F; 1,0 мкл (10 пмоль) обратного праймера p102R; 2,5 мкл дНТФ (по 0,25 ммоль каждого дНТФ); 0,25 мкл (1,25 ед.) Taq-полимеразы и 5,0 мкл исследуемой ДНК; в качестве праймеров к фрагменту гена специфического поверхностного белка р102 Mycoplasma hyopneumoniae берут одну пару праймеров - прямой P102F 5'-AGACTCGCTTTTGATGCAACC-3', обратный P102R 5-AGGCTTTGGAAATACAGAACAAGC-3'; задают следующие температурно-временные параметры амплификатору для проведения ПЦР: предварительный нагрев прибора («пауза») - 95°C; первичная денатурация ДНК - 95°C - 5 минут - 1 цикл; денатурация ДНК - 95°C - 30 сек, гибридизация праймеров - 60°C - 30 сек, элонгация комплементарных цепей - 72°C - 30 сек, 40 циклов; конечная элонгация 72°C - 5 мин - 1 цикл; положительными считаются пробы с выявленным фрагментом размером 201 п.н. Изобретение позволяет выявить фрагмент генома Mycoplasma hyopneumoniae в один раунд с низким шансом ложноположительных результатов. 3 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для диагностики цирковирусной болезни свиней 2 типа. Способ включает исследование биологического материала, где в качестве исследуемого объекта используют органы свиней, нарезанные в криотоме, на наличие антигена ЦВС-2 прямым иммуногистохимическим методом. Используют моноклональные антитела с меткой пероксидазы хрена клона 6h12, специфичные к рекомбинантному белку С вируса ЦВС второго типа, с последующим специфическим окрашиванием и выявлением конгломератов буро-коричневого цвета. Использование данного способа позволяет диагностировать цирковирусную болезнь свиней 2 типа в органах свиней на основании моноклональных антител 6h12 к рекомбинантному белку С вируса ЦВС-2 для идентификации антигена данного вируса. 4 ил.
Изобретение относится к биотехнологии. Предложены олигонуклеотидные ДНК-праймеры для выявления и филогенетического анализа провирусной ДНК вируса лейкоза кошек, а также для синтеза фрагмента гена поверхностного гликопротеина gp70, содержащего протективные антигенные эпитопы, отличающиеся тем, что две пары олигонуклеотидных ДНК-праймеров имеют следующие последовательности: внешние (1 fwd: 5'TCCAACGCACCCAAAACCCT3'; 1 rev: 5'GCTTTAGTCCCTGTTCCGAC3'), внутренние (2 fwd: 5'TCCTGCCTATCTACTCCGCA3'; 2 rev: 5'ATGCATGGGGTGAGTCCAGT3'). Изобретение может быть использовано диагностическими ветеринарными лабораториями, научно-исследовательскими учреждениями, биотехнологическими компаниями. Техническим результатом предполагаемого изобретения является синтез целевого фрагмента ДНК, кодирующиго фрагмент поверхностного гликопротеина gp70 вируса лейкоза кошек, который может быть использован для проведения филогенетического анализа и синтеза вирусного антигена. 1 ил., 3 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для диагностики репродуктивного респираторного синдрома свиней. Для этого диагностику репродуктивного респираторного синдрома свиней проводят непрямым иммуногистохимическим анализом на основании моноклональных антител. В качестве патологического материала используют органы свиней, далее выявляют вирус, в качестве моноклональных антител берут моноклон 4h7h9 для идентификации антигена rN вируса репродуктивного респираторного синдрома свиней и антитела с меткой пероксидазы хрена. Выявляют специфическую окраску с учетом результатов по выявлению конгломератов красно-кирпичного цвета. Использование данного способа позволяет диагностировать репродуктивный респираторный синдром в органах свиней на основании моноклональных антител для идентификации антигена rN вируса. 3 ил.
Изобретение относится к области ветеринарии и молекулярной биотехнологии и предназначено для диагностики анаплазмоза рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Осуществляют выявление фрагмента гена MSP4, кодирующего ДНК анаплазм, с использованием 10 различных пар прямых и обратных олигонуклеотидных праймеров. Проводят электрофоретическое определение размера амплифицируемого фрагмента нуклеотидной последовательности. По наличию на электрофореграмме фрагментов соответствующей длины диагностируют в крови животного кровепаразитов Anaplasma marginale или Anaplasma ovis. Изобретение обеспечивает эффективный способ обнаружения фрагментов генома Anaplasma marginale и Anaplasma ovis методом ПЦР с использованием специфических олигонуклеотидных праймеров. 3 табл.
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу выявления РНК вируса бешенства и набору, который используется в данном способе. Способ включает проведение ОТ-ПЦР с олигонуклеотидными праймерами. Праймеры имеют следующие нуклеотидные последовательности: fp_850_gp_rabv 5' TTAGACTTATGGATGGAACATGGGT 3', rp_850_gp_rabv 5' AGTGACTGACACCTCCCTCCCT 3', fp_350_gp_rabv 5'TCAGACGAAATTGAGCACCTTGT3', rp_350_gp_rabv 5'ACCTCCCCCCAACTCTTAAACA3'. ОТ-ПЦР проводят в два раунда, при этом в случае положительной реакции синтезируется фрагмент, соответствующий размеру в первом раунде - 755 п.н., во втором - размеру 259 п.н. Предложенное изобретение позволяет проводить выявление РНК штаммов и изолятов вируса бешенства различного происхождения на ранних этапах клинического проявления, а также снизить себестоимость диагностики. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к ЛОР-онкологии, и может быть использовано для профилактики и лечения грибковой инфекции у больных с голосовыми протезами. Для этого используют свежеприготовленный водный раствор «Гидролактива». Этим раствором с первого дня после ларингэктомии и установки голосового протеза осуществляют обработку полости рта. После удаления зонда дополнительно обрабатывают и заднюю часть протеза, расположенную в пищеводе, и стенки глоточного-пищеводного сегмента. При этом водный раствор «Гидролактива» готовят при соотношении компонентов - 20-25 г сухого вещества на 150 мл теплой воды. Полость рта обрабатывают путем полоскания раствором «Гидролактива» 3-5 раз в день. После удаления зонда этим раствором дополнительно обрабатывают полость протеза и зону защитного клапана. Для обработки задней стенки протеза и глоточно-пищеводного сегмента используют 150 мл раствора «Гидролактива», который вводят перорально через коктельную трубочку в положении больного с наклоном головы и туловища вперед. Способ позволяет препятствовать возникновению и развитию грибковой инфекции в области глотки и пищевода, а также в значительной степени увеличивает срок эксплуатации голосовых протезов, тем самым повышая качество жизни пациентов после удаления гортани по поводу рака. 1 пр.
Изобретение относится к пищевой промышленности, медицине, ветеринарии и животноводству
Изобретение относится к молекулярной биологии, вирусологии
Изобретение относится к медицинской вирусологии
