Патенты автора Шерстнев Филипп Сергеевич (RU)
Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для расчета трансплантационной дозы CD34-позитивных клеток-предшественниц в донорском лекоцитаферезном продукте. Способ расчета включает мечение клеточного материала флуорохром-конъюгированными моноклональными антителами к маркерам CD34 и CD45 с одновременным окрашиванием флуоресцентным ДНК-тропным красителем 7-аминоактиномицином D. Далее определяют содержания CD34-позитивных предшественниц гемопоэза методами гемоцитометрии и лазерной проточной цитофлуориметрии. При расчете трансплантационной дозы учитывают коэффициенты изменения целостности мембран гемопоэтических стволовых клеток - 0,985, 0,971, 0,958, 0,947 и 0,930, соответственно, для 1, 2, 3, 4 и 5-ых суток хранения клеточного материала до трансплантации реципиенту при температуре плюс 2 ÷ плюс 6°C. Расчет осуществляется по формулам 1 и 2:
где CD34+ относ. - относительное содержание CD34+ клеток-предшественниц гемопоэза в лекоцитаферезном продукте; CD34 абс. - количество клеток-предшественниц, которое определяется как число событий с высокой экспрессией антигена CD34, низкой экспрессией антигена CD45 и низкой гранулярностью, подсчитанное в полигональном регионе «HSC 1»; kn - коэффициент изменения целостности мембран CD34+ клеток на n-ый день хранения; CD45 абс. - количество лейкоцитов в образце, которое определяется как число событий позитивных по антигену CD45, подсчитанное в прямоугольном регионе «CD45+»; доза CD34+ - трансплантационная доза CD34+ клеток-предшественниц гемопоэза в лекоцитаферезном продукте; С (лейк.) - концентрация лейкоцитов в образце, кл/мкл; V - объем лекоцитаферезного продукта, мкл; m - масса тела реципиента CD34-позитивных клеток-предшественниц гемопоэза, кг. Использование данного способа позволяет при расчете дозы CD34+ клеток учитывается изменение целостности их мембран при хранении в условиях охлаждения до трансплантации. 7 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. Способ определения оптимального криопротектора по цитохимическому показателю содержания сукцинатдегидрогеназы в лейкоцитах аутокрови заключается в том, что у больного до начала криогемотрансфузионной терапии получают порцию венозной крови, делят на равные части в пробирки, в одной из которых контрольная проба крови (КП) не содержит криопротектора, в другие добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов - опытные пробы (ОП), капли ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, из них делают тонкие мазки, высушивают на воздухе, готовят препараты по методике Нахласа в модификации Р.П. Нарциссова, лейкоциты микроскопируют в проходящем свете, проводят сравнительное исследование среднего цитохимического коэффициента (СЦК) сегментоядерных нейтрофилов и лимфоцитов с гранулами синего цвета СДГ ОП и КП; при равности значений СЦК ОП и СЦК КП тестируемый криопротектор оценивают как оптимальный для конкретного больного и пригодный к использованию; при значениях СЦК ОП, отличных от СЦК КП, делают заключение как о непригодном к использованию криопротекторе. 3 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. Способ определения персонифицированного криопротектора по лейкоцитарной кислой фосфатазе (ЛКФ) консервированной крови заключается в том, что у пациента до начала компонентной трансфузионной терапии эксфузируют порцию свежей аутокрови, стабилизируют раствором цитрата натрия, делят в пробирки на равные части, в контрольной пробе (КП) добавки криопротекторов исключают, в опытные пробы (ОП) добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов, перемешивают при плюс 37°С в течение 4 ч, капли приготовленных биологических жидкостей из ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, делают 2-3 мазка, высушивают на воздухе, фиксируют в 10% спирт-формалиновой смеси, лейкоциты окрашивают на кислую фосфатазу по методике азосочетания Берстона в модификации Ю.Ф. Руденса, И.М. Буйкиса, микроскопируют в проходящем свете, производят подсчет содержания ЛКФ в сегментоядерных (с/я) нейтрофилах и лимфоцитах с подсчетом среднего цитохимического коэффициента (СЦК); при совпадении значений показателей СЦК ОП и СЦК КП тестируемый криопротектор оценивают как оптимальный для конкретного больного и пригодным к использованию; при значениях СЦК ОП, отличных от СЦК КП, делают заключение как о непригодном к использованию криопротекторе. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови. Для этого у больного до начала криогемотрансфузионной терапии получают порцию венозной крови, делят на равные части в пробирки, в одной из которых контрольная проба (КП) крови не содержит криопротектора, в другие добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов - опытные пробы (ОП). Пробирки герметизируют пробками, содержимое перемешивают на шейкере при температуре плюс 37°C в течение 4 ч, капли ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, делают 2-3 мазка, быстро высушивают на воздухе при комнатной температуре, фиксируют в 10% спирт-формалиновой смеси, окрашивают на гликоген по методу Шабадаша, лейкоциты микроскопируют в проходящем свете. Проводят сравнительное исследование среднего цитохимического коэффициента (СЦК) сегментоядерных (с/я) нейтрофилов и лимфоцитов ОП и КП; при равности показателей СЦК ОП и СЦК КП тестируемый криопротектор оценивают как оптимальный для конкретного больного и пригодный к использованию; при значениях СЦК ОП, отличных от СЦК КП, делают заключение как о непригодном к использованию криопротекторе. Изобретение обеспечивает возможность индивидуального подбора оптимального криопротектора на доклиническом этапе криогемотрансфузионной терапии. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления эффективного криопротектора по цитохимическому показателю содержания лейкоцитарной щелочной фосфатазы (ЛЩФ) аутокрови. Для этого у больного до начала криогемотрансфузионной терапии эксфузируют порцию свежей аутокрови. Стабилизируют кровь раствором цитрата натрия. В контрольную пробу (КП) добавки криопротекторов не вносят. В опытные пробы (ОП) вносят по одной равной дозе тестируемых криопротекторов, перемешивают при плюс 37°С в течение 4 ч. Капли приготовленных ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла и делают мазки. Готовят препараты для выявления ЛЩФ в с/я нейтрофилах по методике азосочетания Кеплоу. Проводят сравнительное исследование среднего цитохимического коэффициента (СЦК) ЛЩФ для с/я нейтрофилов в ОП и КП. Тестируемый криопротектор оценивают как эффективный для пациента при значениях СЦК ЛЩФ ОП, равных значениям СЦК ЛЩФ КП. Тестируемый криопротектор оценивают как неэффективный для пациента при значениях СЦК ЛЩФ ОП, отличных от СЦК ЛЩФ КП. Изобретение позволяет выявить in vitro оптимальный криопротектор на доклиническом этапе криогемотрансфузионной терапии и снизить риск посттрансфузионных осложнений у пациентов. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к физиологии, криобиологии и медицине, а именно к технологии консервирования ядерных клеток крови человека с применением инертного газа. Способ включает насыщение клеток в пластикатном контейнере «Компопласт 300», помещенном в металлический криобароконтейнер, инертным газом ксеноном под давлением 0,6 атм в течение 20 мин в условиях комнатной температуры 21±2°C с последующим удалением избытка газа и извлечением из металлического контейнера, замораживанием биообъекта до -28°C в этиловом спирте и перемещением в электроморозильник на -80°C. Размораживание биообъекта осуществляется в водяной ванне 39±1,5°C в течение 1,5 мин. Осуществление изобретения обеспечивает надежное криоконсервирование лейкоцитов в среде инертного газа и высокий уровень количественной и морфологической сохранности лейкоцитных концентратов крови человека. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к комбинированному криопротекторному раствору для замораживания тромбоцитов при низкой (-80°C) температуре, включающему гексаметиленбистетраоксиэтилмочевину, лимонную кислоту и воду для инъекций, отличающемуся тем, что дополнительно содержит диметилацетамид при следующем соотношении ингредиентов, мас.%: гексаметиленбистетраоксиэтилмочевина 1,0%; диметилацетамид 1,25%; лимонная кислота 0,1%; вода для инъекций остальное
КРИОПРОТЕКТОРНЫЙ РАСТВОР ДЛЯ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ ПРИ УМЕРЕННО-НИЗКОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ (-40°C) // 2439877
Изобретение относится к физиологии, криобиологии и медицине
