Способ культивирования личинок ш стадии подкожных оводов крупного рогатого скота

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Сециалистических

Республик (и)1001900

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 12. 12. 80 (21) 3252955/30-15 (И1М. Кп.з с присоединением заявки йе

А 01 К 67/00

Государственны Я кеивтет

СССР ве хелен «зебретеепЯ в еткрмтеЯ (23) Приоритет (S3) УДК 576 е 895. 7 .

:636.2(088.8) Опубликовано 07.03,83. Бюллетень Йе 9

Дата опубликования описания 07,0383 (72) Автор изобретенйя

М,Н.Евстафьев

Всесоюзный научно-исследователъскнй институт. ветеринарной энтомологии и арахнологии (71) Заявитель (54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЛИЧИНОК III СТАДИИ

ПОДКОЖНЫХ ОВОДОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Изобретение относится к ооласти ветеринарной паразитологии и может быть использовано для испытания инсектицидов, получения -йммупрепара-. тов и диагностикумов.

Известен способ культивирования личинок подкожнйх оводов в увлажненном песке (1).

При этом способе взрослые особи оводов выращиваются без питательной среды.

Известен .способ кулътивировання личинок III стадии Hypoderma 1Ыеаturn в питательной среде (2), по которому личинок извлекают из желваков, помещают в узкий стеклянный сосуд, содержащий 1/4 часть сыворотки .крови животных. Сыворотку крови меняют ежедневно. Личинки выживают в течение

I0 дней.

Недостатки этого метода заключаются в том, что личинки, saxagacs a вертикалъном положении упираются в дно сосуда ротовыми отверстиями, что затрудняет их питание. Отсутствие циркуляции питательной среды и незначительное количество вызывают необходимость частой замены ее. Нсполъэование одной сыворотки крови животных очень дорого, кроме того, последняя недостаточно усваивается личинками.

Цель изобретения - получение высококонцентрированной продукции жизнедеятельности личинок в питательной среде.

Цель достигается тем, что личинки оводов III.стадии развития помещают з отдельную ячейку, сверху покрывают гидрофильным материалом и помещают в питательную среду, состоящую из

3/4 частей жидкости Рингер"Локка, 1/4 части инактивированной сыворотки крови крупного рогатого скота и ан" тибиотиков. Личинок собирают в апреле-мае на тушах и шкурах животных.

Отбирают личинки только серо"корич" невого цвета, чтобы при культивировании они не смогли перейти в следующую стадию развития.

При культивировании личинок соэдаЮт условия, приближенные к организму животного, для чего их помещают в садок с ячейками для каждой личинки, сверху покрывают поролоном, что пре" пятствует высыханию непогруженных частей личинок. В питательную среду добавляют антибиотики. Ежедневно производят циркуляцию питательной среды, которую. меняют через 7-10 дней.

100190О

Формула изобретения

Составитель В.Осипов

Редактор Е.Хейфиц Техред А.Бабинец КорректорЕ.Рошко .

Заказ 1669/1 Тираж 719 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r.Óæãoðoä, ул.Проектная, 4

Пример. Личинки III стадии

Hypoderma bovis и Н. lineatum серокоричневого цвета собирают на шку" рах и тушах животных, обмывают физиологическим раствором.и помещают в садок для культивирования. Садок представляет собой четырехугольную стеклянную банку размером 15 15- 20 см.

Внутри банки на подставке на высоте

12 см от дна устанавливают плексигла1 совую пластинку размером 14 13 см, 10 оторая содержит 48 ячеек. С нижней стороны ячейки пропиливают с таким расчетом, чтобы было свободное сообщение с внутренней полостью банки и чтобы личинки не выпадали (ширина

2 мм). С верхней стороны плексигласовую пластинку покрывают поролоном толщиной 8 мм. Напротив каждой луночки в поролоне делают отверстие, которое у основания равно диаметру лун-20 кИ (15 мм), а к вершине конусообразно сужается и на выходе достигает

5 мм. В центре плексигласовой пластинки проделывают отверстие диаметроМ 15 мм для вставления вала смеси- 25 теля. Снаружи банку закрывают крышкой, в середине которой имеется квад" ратное отверстие размером 5 ° 5 мм, эаклеенйое капроновой сеткой. Оно необходимо для свободного доступа воздуха, В садок наливают питательную среду (4 части жидкости Рингер-Локка, одна часть инактивированной сыворотки крови, взятой у здорового крупного рогатого скота и по 25 тыс. ед. стрептомицина и пенициллина íà 100 мл среды) до тех пор, пока не скроется плексигласовая пластинка, Садок с личинками помещают в термостат при 31 С и относительной влаж-4О ности 85Ъ. Периодически ежесуточно в течение 7 суток вынимают из термостата банку, снимают крышку и .поролон, вставляют в отверстие гибкий вал сме" сителя и проводят смешиван. :.а питатель45 ной среды в течение 5 мин при 700 об/мин. Одновременно следят за состоянием личинок. Погибших выбрасывают, на их место помещают новых, ко" торых берут из запасного садка. Че- 50 рез 7 дней питательную среду меняют.

Использованные питательные среды и часть личинок применяют для изготов" ления иммунопрепарата. Спустя 14"18, даже 28 дней оставшуюся часть личиной переносят в грунт, где зарывают на глубину 3-5 см. Там они окукливаются, и через 16-24 дня появляются взрослые особи оводов. Предлагаемый метод культивирования личинок подкожных оводов крупного рогатого ско- та позволяет одновременно с выращиванием взрослых особей оводов получать продукты жизнедеятельности(питательная среда)для дриготовления иммунопрепарата. Применение метода позволяет выращивать личинок в условиях, приближенных к организму животного, уменьшает в три раза количество применяемой сыворотки крови крупного рогатого скота,,увеличивает продолжительность жизни личинок с 10 до 28 дней.

1. Способ культивирования личинок

ХХХ стадии подкожных оводов крупного рогатого скота, включающий сбор личинок, культивирование их в питательной среде из сыворотки крови крупного рогатого скота, о т л и ч а ю ц и и с я тем, что, с целью увеличе ния выхода продукта жизнедеятельности личийок, улучшения качества продукта и повышения производительности труда, личинку помещают в отдельную ячейку, сверху покрывают гидрофильным материалом и помещают в питательную среду, состоящую из Э/4 частей жидкости

Рингер-Локка, 1/4 части инактивиро" ванной сыворотки крови крупного рогатого скота и антибиотиков, 2. Способ по и. 1, O т л и ч а ю" шийся тем, что питательную среду меняют через 7-10 дней.

3. Способ по п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что ежедневно производят циркуляцию питательной среды..

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Вредители животновод(ства. Работа по переносчикам пироплазмозов и энтопараэитов. М-Л., Изд-во AH СССР, 1935, с. 101.

2. Beesleg W.Н. Experimental Techniques for Evolytion of Systemic

Igsert1cides against oxwarble Fly

Garwal. — Ехр. Parasitol, 1962, 9 12, о. 102-106.