Способ получения эмбрионов у крупного рогатого скота для трансплантации

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭМБРИОНОВ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ , включающий введение животным-донорам гонадотропина на 10-12-й день полового цикла с последующим через двое суток введением простаглан4, дина, трехкратным осеменением с интервалом 12 ч замороженным семёнём и извлечением эмбрионов на 7-8-е сутки после первого осеменения, отличающийся тем , что, с целью повышения выхода эмбрионов, животным-донорам в начале проявления охоты. внутримишечно:инъецируют витамины А и Е в доЗах 120-150 тыс. ИЕ и 80-100 мг соответственно, при этом одновременно вводят с кормом однократно в сутки в течение 18-25 .дней йодистый калий в дозе 100200 мг/гол, а с-введением гонадотропина дополнительно инъецируют витамины А и Е в половинной дозе от первоначательной , вводимой в период nposraления охоты. (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦ)ИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (19) SU (и) (5 ) А 01 К 67/02; A 61 D 7/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 1

Н ABTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

i3 а

1 г

Ф Ь

Фюа

° Ю

Ъю

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 2974936/30-15 (22) 15.08.80 (467 07.04.83, Бюл. 9 13 (72) Н.И.Сергеев, Ю;Д.Клинский, Г.И.Иванов и A.Â.Oâ÷èííèêîâ (71) Всесоюзный ордена Трудового

Красного Знамени научно-исследовательский институт животноводства (53> 612. 621.9.636.22.28(088.8) (56) 1. Доклады ВАСХНИЛ, 1979, 10, с. 37. (54) (57) СПОСОВ ПОЛУ ЕНИН ЗИВРИОНОВ

У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ, включающйй введение животным-донорам гонадотропина на 10-12-й день полового цикла с последующим через двое суток введением простаглан дина, трехкратным осеменением с интервалом 12 ч замороженным семенем и извлечением эмбрионов на 7-8-е сутки после первого осеменения, о т .л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода эмбрионов, .животным-донорам в начале проявления охоты. внутримышечно:инъецируют витамины A и Е"в дозах 120-150 тыс.

ИЕ и 80-100 мг соответственно, при этом одновременно вводят с кормом однократно в сутки в течение 18-25 .дней йодистый калий в дозе 100200 мг/гол, а с -введением гонадотропина дополнительно инъецируют витами- ны A u E в половинной дозе от первоначательной, вводимой в период прояв-©

Ф

PQ ления охоты.

1009366

Изобретение относится к области животноводства, в частности, к способам получения эмбрионов у крупного рогатого скота для трансплантации.

Известен способ получения эмбрионов у крупного рогатого скота для. 5 трансплантации, включающий введение животным-донорам ганадотропина на

10-12 день полового цикла с последующим через двое суток введением простагландина, трехкратным осеменением 19 с интервалом 12 ч замороженным семенем и извлечением эмбрионов на 7.8 сутки после первого осеменения j 1).

Недостатком данного способа явля.ется то, что при тщательном отборе животных-доноров удается получить множественную овуляцию (суперовуляцию). только у 50-70% коров и телок.

Кроме того, способ не обеспечивает достаточного выхода нормальных (не.дегенерированных ) эмбрионов, пригодных для трансплантации (около 2 эмбрионов на 1 донора) .

Целью изобретения является повышение выхода нормальных эмбрионов, пригодных для трансплантации.

Указанная цель достигается тем, что животным-донорам в начале проявления охоты, внутримышечно инъецируют витамины A и Е в дозах 120150 тыс. HE и 80-100 мг соответствен- 30 но, при этом одновременно вводят с кормом однократно в сутки в течение 18-25 дней йодистый калий в дозе 100-200 мг/гол, а с введением гонадотропина животным дополнительно З5» инъецируют витамины A и Е в половинной дозе от первоначальной, вводимой в период проявления охоты у животных.

Пример. Животным-донорам сразу же после выявления половой охоты .4О вводят внутримышечно 120-150 тыс.

ИЕ витамина А, 80-100 мг витамина Е на одно животное и ежедневно в течение 18-25 дней скармливают йодистый калий в дозе 100-200 мг/гол. В качестве растворителя витаминов исполь- 45 зуют растительное масло, йодистого ка. лия — воду. Через 10-12 дней, в середине полового цикла животным-донорам вводят сывороточный гонадотропин (СЖК) в дозе 2800 ИЕ и одновременно дополни, 50 тельно инъецируют витамины А и Е в дозах 60-75 тыс. ИЕ и 40-50 мг на голову, соответственно. Через 48 ч после введения СЖК животным вводят простагландин в дозе 30 мг/гол. Подготовленнйх 55 доноров осеменяют трехкратно с интер-,, валом 12 ч спермой, содержащей до

100 мпн. живчиков в каждой дозе.

Н а 7-8 день после первого осеменения осуществляют извлечение эмбрионов хирургическим, либо нехирургическим путем. На промывание каждого рога используют от 500 до 700 мн среды.

Промывную жидкость собирают в мерные цилиндры емкостью 500 мл. После., окончания промывания рогов матки промывную жидкость в течение 30 мин отстаивают,нацосадочную жидкость удаляют, а осадок (80-100 мл) исследуют под микроскопом на предмет обнаружения зародышей.

Были испытаны различные схемы обработки животных-доноров.

Контрольным животным-донорам на

10-12 день полового цикла вводили гонадотропин (СЖК), через 48 ч после инъекции СЖК животным вводили простагландин. После введения простагландина, через двое суток после прихода животных в охоту их осеменяли и на 7-8 день после первого осеменения у них извлекали эмбрионы.

Животным †донор второй опытной группы дополнительно однократно инъекцировали витамины A в дозе

60 тыс. ИЕ и Е-в дозе 40 мг, а йодистый калий задавали с кормом в течение 20-25 дней в дозе 50 мг/гол.

Животным-донорам третьей опытной группы дополнительно однократно инъецировали витамины А и Е в дозе. соответственно 100 тыс. ИЕ и

80 мг, йодистый калий задавали с кормом в течение 20-25 дней в дозе 100 мг/гол. Животным-донорам четвертой опытной группы дополнительно двухкратно инъецировали витамины A и Е: первый раз в день выявления охоты в дозе 120 тыс. ИЕ и

80 мг соответственно и второй раз в день обработки гонадотропином (СЖК) в Дозах 60 тыс. ИЕ и 40 мг соответственно, йодистый калий задавали с кормом в течение 20-25 дней в дозе

150 мг/гол. Животным-донорам пятой опытной группы дополнительно двух» кратно инъецировали витамины A u

E соответственно, в дозЕ 150 тыс.

ИЕ и 100 мг, и 75 тыс. ИЕ и 50 мгу йодистый калий — 200 мг в течение ,20-25 дней. Животным-донорам шестой опытной группы дополнительно двухкратно инъецировали витамины A ,и E соответственно, 135 тыс. ИЕ и !

90 мг 70 Фыс. ИЕ и 45 мг, йодистый калий — 100 мг на животное в сутки., Результаты испытания приведены. в таблице.

1009366 олучено яйцеклеток и эмбрионов (среднее на 1 донорау

Средне количество овуляций на донора

Число животных

Группы мбрионов яйцекле ток нормаль- дегенериро ных ванных неплодотворенных яйцеклеток

29 8,4+Оi4 4,88т0,6 .2,81+0,5 0,86т0,33 1,21%11,4

Контрольная

" П. Витамин

A-60 тыс.ИЕ

E-40 мгРйодистый калий—

50 мг 10

4,47+0,7

0,67+0,13 0,90 0,83

8,2+О, 2

2,9т0,4

Й. Витамин

A-100 тыс.ИЕ;

Е-80 мг;йодистый калий—

100 мг 10

9,1 -0,3 .

3, 1"-0,61

5,6т0,61

0,85

1,65

IV . Витамин

A-120 и

60 тыс. ИЕ Е-80 и 40 мг; йодистый ка- лий — 200 мг 10

10,9+0,71 6,5+0,87 5,8+О, 37 0,2t0, 1 0,5%0,42

Ч. Витамин

A-150 и 75. тыс. ИЕ;

Е-100 и .50 мг; йодистый калий — 200 мг 10

0,62+0, 3, 0, 58 0,64

9,4+О, 8

5,4+0,91

4,3+0,43

VX. Витамин й-135 и 70 тыс.ИЕРЕ-90 и 45 мг; йодистый калий—

100 мг. 30

11,97+0, б 7,36+0,8

О,бтО 21 О 610 43

6,16 0,4

Экспериментальное испытания инъек-, ций различных доэ витаминов A и Е в сочетании с подкормкой йодистым препаратом показало, что использование однократной инъекции в период проявления охоты витаминов .А и Е

{ 60-100 тыс. ИЕ и 40-80 мг) и ежедневно 50-100 мг йодистого калия в течение 20-25 дней почти не влияло на уровень суперовуляции и качество эмбрионов. Имекщиеся различия стати. чески не достоверны (Р.>0,5$ .

r увеличение дозы витамина А До-.

150-75 Фыс. ИЕ, витамина Š— до 100, 50 мг и при двухкратном введении в период проявления охоты и в период обработки гонадотропином (через:.,-1012,дней) и йодистого калия по 200 мг незначительно повышало уровень суперовуляции и качество эмбрионов по сравнению с контрольной груп-

: пой.

Найлучшие результаты были по45 нучены при двухкратном:введении витамина А в дозе 120-135 тыс ЙЕ (первая инъекциями и 60-70 тыс. ИЕ {вто-.,рая инъекция и витамина Е, соответственно, 80-100 мг и 40-50 мг при

:ежедневном скармпивании с кормом в- течение 20-25 дней 100-200 мг.йодистого калия. Разница в пользу опытных, четвертой и шестой групп по сравне-. нию с контролем составила по уровню суперовуляции на 29,7 и 41, 7Ъ, числу

55 извлеченнх яйцеклеток и эмбрионов— на 33,1 и 50,8%. Ко)хнчество нормаль-. ных эмбрионов,.пригодных для трансплантации, повысилось в 2 и 2,2-ра-.

3а. Заметно снизилось число деге60 нерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток.

Использование предложенного способа позволит повысить выход нормальных эмбрионов, пригодных для пере садки или закладки их в эмбриобанк,