Способ отбора свиней по устойчивости к стресс-синдрому
Союз Советскык
Соцыапыстыческык
Республик
ОП ИСАНИЕ
И ЗОБ РЕТЕ Н И Я
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
А 01 К 67/00 Гоеударстееииый комитет СССР (23) Приоритет— Опубликовано 30. 04. 82, Бюллетень № 16 Дата опубликования описания 30. 04 ° 82 (53) УДI(57.7 ° 6. 6 (088. 8) ао лелем иэа4ретеиий н открытий (72) Авторы изобретения Ю.Д,Романов, Л.В.Трощенкова и И.Н.Никитчейко t Белорусский научно-исследовательский инстиТК1 " "---"-животноводства (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОТБОРА СВИНЕЙ ПО УСТОЙЧИВОСТИ К СТРЕСС-СИНДРОМУ Изобретение относится к животноводству, в частности к разведению сельс" кохозяйственных животных. Известен способ отбора животных по устойчивости к различным неблаго5 приятным воздействиям стресс-факторам. В результате применения этого :способа, животные, например свиньй, предрасположенные к заболеванию стресс-синдромом, а следовательно, к появлению бледного мягкого экссудативного (РЯЦ или сухого темного плотного (DFS) мяса, исключаются из дальнейшей селекции. Животных разделяют по устойчивости к стресс-синдрому путем определения активности фермента креатинфосфокиназы(1 . Известен способ отбора свийей, основанный на определении реакции организма на воздействие наркотического газа-галотана )2) . Недостатками способа являются высокая смертность от злокачественной гипертермии и нарушение сердечнососудистой системы у здоровых поросят. Наиболее близким к предлагаемому является способ, основанный на определении количества поглощенного животными кислорода при внешней температуре 0 С (31. Недостатком известного способа является использование сложного оборудования и неполное разделение животных по устойчивости к стресс-синдрому. Цель изобретения - повышение надежности способа. Поставленная цель достигается тем, что в способе отбора свиней по устойчивости к стресс-синдрому, включающем воздействие неблагоприятным фактором с последующим биологическим исследованием, в качестве неблагоприятного фактора используют инъекцию эритроцитов, имекщих на поверхности антиген А с системы А групп крови и по отсутствии или наличии у сви3 92348 ней феномена иммунологического шока судят об устойчивости к стресс-синдрому. Инъекцию эритроцитов проводят путем внутривенного введения суспензии свиньям, имеющим "естественные" неполные антитела анти-А с . Кроме того, инъекцию эритроцитов проводят однократно животным в возрасте от 3 недель до 3 мес. в коли- 1о честве .13-14 млн. эритроцитов на голову, в возрасте 3-6 мес. - 32,535,0 млн. эритроцитов на голову, в возрасте 6 мес. и старше 65-70 млн, эритроцитов на голову. 15 Способ осуществляют следующим образом. Для выявления стрессустойчивых и неустойчивых животных у всего поголовья свиней, от трех недель и старше, берут образцы крови на сыворотку с целью определения " естественных" неполных антител анти -Ac с помощью известной реакции - пробы Кумбса. В популяции обычно бывает от 60 до 90 ь животных, имеющих в сыворотке крови "естественные" неполные антителя анти-Ас с титром от 4 до 512. Эти животные в дальнейшем подлежат разделению на стресс-устойчивых и неустойчивых. У двух-трех свиней, позитивных по антигену Ас системы А групп крови на строме эритроцитов, берут кровь s объеме, который зависит от 35 числа предполагаемых к исследованию животных. Кровь центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. Плазму отсасывают. Эритроциты каждого животного еще трижды промывают физио4О логическим раствором, каждый раз центрифугируя и отсасывая надосадочную жидкость. Одинаковые объемы эритроцитов от каждого животного смешивают и к общему количеству добавляют рав-! 5 ныи объем физиологического раствора. Полученная суспензия должна содержать 6,5-7 млн. эритроцитарных клеток в 1 мл взвеси. ных, учащенным дыханием, частым сер, дечным ритмом, повышенной ректальной Концентрация эритроцитов в суспензии определяется любым общеизвестным методом. Соответствующую дозу суспензии инъецируют внутривенно животным, проверяемым на устойчивость к стрессам. Для этого животное фиксируют, обрабатывают спиртовым тампоном место прокола краевой ушной вены, накладывают резиновое кольцо на ухо животного и после набухания вены, вводят инъекционную иглу. После того, как из иглы покажется капля крови, снимают резиновое кольцо с уха животного, к иголке присоединяют шприц с предварительно набранной суспенэией эритроцитов и вводят суспензию эритроцитов в вену, Доза введения суспензии животному в возрасте от 3 недель до 3 мес - 13-14 млн. эритроцитарных клеток (1,8-2 мл взвеси) в возрасте 3-6 мес. - 32,535 млн. (4,5 5 мл взвеси), в возрасте от 6 мвс. и старше - 65-70 млн. эритроцитарных клеток (9,5-10 мл взвеси) . У животных, предрасположенных к стресс-синдрому, через 1-2 мин после инъекции развивается типичная картина иммунологического шока, которая сопровождается падением живот температурой (до 41 С), красной пигментацией некоторых участков кожи, иногда дефекацией. Через 3-8 мин животные самостоятельно выходят из шока, без дополнительного применения лекарственных веществ и в дальнейшем остаются здоровыми, без ви-. димых последствий от перенесенного стресса. У животных, устойчивых к стрессу, после введения суспенэии эритроцитов описанной выше картины посттранс- фузионного иммунологического шока не наблюдается и они остаются совершенно спокойными. Опыты по разделению свиней на стресс-устойчивых и неустойчивых проведены в племзаводе "Заречье" Минской области. На поголовье 5500 свиней разного возраста установлено, что частота встречаемости "естественных" неполных антител анти-АС в крови животных составляет 60-90 ь. Кроме того, при изоиммунизации 500 голов свиней с целью приготовления имунных моноспецифических антисывороток для определения групп крови было отмечено шоковое состояние у 30 животных Установлено, что причинаи шоковои реакции реципиента является перераздражение его центральной нервной системы в результате взаимодействия в кроBRHoM русле "естественныхм неполных антител анти-АС, при их титре от 923485 8 до 512, с соответствующим антигеном Ас эритроцитов донора. С целью установления дозы инъекции эритроцитарных клеток для искусственного вызывания иммунологического шока был проведен эксперимент, в племзаводе "Заречье" на свиньях разного возраста, Оивотных., имекщих титр "естественных" антител анти-Ас от 8 до 512, подразделили в зависимости от возраста на 9 групп по 5 голов в каждой группе: три группы в воз1 асте от 3 недель до 3 мес, (1,2,3), три группы от 3 до 6 мес (4,5,6), . три группы от 6 мес. и старше (7,8,9) . 5 Свиньям каждой группы была внутривенно инъецирована определенная доза суспензии эритроцитов с антигеном Ас системы А групп крови на строме, но в любой дозе в одном мл суспен" 20 эии содержалось одинаковое коли". чество эритроцитарных клеток равное 6,5-7 млн (соответствующее физиоло- гической норме эритроцитов в крови у свиней) . Животным каждой группы была инъецирована следующая доза эритроцитдр" ных клеток: первой — 6,5-7 млн. j(0,8-1 мп); второй - 13-14 млн. (1,8-Z мл.); третьей - 19-21 млн. (2,8-3 мл!; четвертой - 26-28 млн. (3, 8-4 мл); пятой - 32, 5 - 35 мпн. (4,5-5 мл); шестой - 38-42 млн, (5,8-6 чл); седьмой - 51-56 млн. (7,8-8 мл); восьмой - 65-70 млн. 35 (9,5-10 мл); девятой — 78-84 млн. . (11, 5-12 мл) . В результате исследований в первой группе выявлен 1 стресс-неустойчи" вый поросенок и 1 с сомнительной ре. акцией," во второй — 2 стресс-неус" тойчивых, в третьей - 2 стресс-неус" тойчивых, в четвертой - все стрессустойчивые, в пятой - 1 стресс-неустойчивый, в шестой - 1 стресс-неус- 45 тойчивый; в седьмой - 1 стресс-неустойчивый; в восьмой - 2 стресс-неус" тойчивых, в девятой - 2 стресс-H6yc" тойчивых. На основании опыта, для дальней" шей работы была выбрана оптимальная доза инъекции суспензии эритроци" тов с антигеном Ас на строме для одного животного в возрасте от 3 недель до 3 мес. !3-14 мпн. (1,8-2 мл 45-50ь 55 суспензии);3-6 месяцев - 32,5-35 млм. (4,5-5 мл); 6 мес. и старше - 6570 мпн. (9,5-!О мл) . С целью выявления возможности разделения взрослых свиней по устойчивости к стресс-синдрому из 199 опытных животных, принадлежащих племзаводу "Заречье", предварительно обследованных на наличие анти-Ас антител, отобрали 23 (б хряков и 17 холостых свиноматок) с титром антител от 8 до 512. Через 1 мин после внутривенного введения этим животным 9,5l0 мл суспенэии эритроцитов (6570 мпн. клеток) с антигеном Ас на строме у 8 (34,83) свиней проявилась четкая картина иммунологического шока, что свидетельствует о том, что эти 8 взрослых свиней предрасположены к стресс-синдрому. Остальные 15 живот ных не проявили никаких реакций после внутривенного введения суспензии эритроцитов. Следовательно, они были устойчивы к стресс-синдрому. Для проверки эффективности разделения молодняка свиней по устойчи" вости к стресс-синдрому 46 животным 3-х недельного возраста, имекщим в крови титр "естественных" неполных антител от 8 до 64, внутривенно инъецировали 13-14 млн, эритроцитарных клеток с антигеном Ас на строме. Из сорока шести голов молодняка только 5 (10,83) имели явную клиническую картину иммунологического шока. Весь молодняк опытной группы (46 голов) и контрольной (30 голов) ! был подвергнут испытанию на устойчивость к стресс-синдрому с помацью 3 мин галотановой пробы. В результате использования этого теста ни одного животного, предрасположенного к стресс-синдрому не было выявлено, Как взрослые животные, так и молодняк свиней, исследованные на стресс-. устойчивость с помощью иммунологичес" кого шока легкой степени, после проведения испытаний оставались совершенно здоровыми на протяжении последующего роста и развития. Таким образом, использование предлагаемого способа разделения свиней по устойчивости к стресс-синдрому дает ряд преимуществ по сравнению с известным, так как новый способ обладает большей достоверностью при разделении (более чуствителен, безопасен для здоровья животных H его можно использовать для разделения вэрослых свиней. Кроме того, исключение из селекции стресс-неустойчивых животных позволит избежать потерь в Формула изобретения Составитель А.Макаров Техред A. Бабинец Корректор Г.Решетник Редактор И.Тыкей Заказ 264)/6 Тираж 699 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР . по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 мясной продукции, некоторые составляют 103 при убое на мясокомбинатах, за счет снижения мяса бледного мягкого экссудативного (РБЕ) и сухого темного плотного (DFD), получаемого от стресс-неустойчивых свиней. Дополнительная прибыль на 1000 голов убиваемых на мясокомбинате свиней составляет 17400 руб (при стоимости 1 кг мяса мясной свинины 1,74 руб). Предлагаемый способ разделения свиней по устойчивости к стресс -синд рому .может быть применен немедленно при разведении животных на племенных фермах колхозов и совхозов племфермах крупных промышленных комплексов по производству свинины. 1. Способ отбора свиней по устойчивости к стресс-синдрому, включающий воздействие неблагоприятным фактором с последующим биологическим исследованием, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения надежности способа, в качестве неблагоприятного фактора используют 923485 8 инъекцию эритроцитов, имекщих на поверхности антиген Ас системы A групп крови и по отсутствии или наличии у свиней феномена иммунологического шока судят об устойчивости к стресс-синдрому. 2. Способ по п.1, о т л и ч а юшийся тем, что инъекцию эритроцитов проводят путем внутривенного 10 введения суспензии свиньям, имеющим "естественные" неполные антитела анти-Ас. 3. Способ по пп. 1 и 2, о т л ич а ю шийся тем, что инъекцию 5 эритроцитов проводят однократно животным в возрасте от 3 недель до 3 мес. в количестве 13- 14 млн . эритроцитов на голову, в возрасте 3-6 мес. 32,5-35,0 мпн. эритроцитов на голо2о ву, в возрасте 6 мес. и старше 65-70 млн. эритроцитов на голову. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. WoIf Иейа1 But med 3 3, 1970, 25 386. 2. Авторское свидетельство СССР У 782781, А 01 К 67/00, приоритет 30.03.79 ° 3. Авторское свидетельство СССР зо 377138, кл. А 01 К 67/00, 1973;