Устройство для заполнения партии трубок гелем

 

COOS СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А (19) (И) (я) G 01N 27/26

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABT0PCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВМ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2l ) 3368998/1 8- 25 (22) 16.12.81 (46) 30.04.83. Бюл. № 16 (72) B. Ф.Санталов и А.Т.Бортник (71) Институт биологической физики

АН СССР (53) 543.545 (088.8) (56) 1. Осборн Н.H. Микрохимический анализ нервной ткани. М., 1978, с. с. 209-211.

2. Шербаков В. П. и др. Обнаружение белка, кодируемого геном г 11 фага

Т4 методом електрофореза в градиенте концентрации полиакриламидного геля.—

Молекулярная биология,. 1970, т. 4, вып. 6, с. 841. (54)(56) 1. УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЗАПОЛНЕНИЯ ПАРТИИ ТРУБОК ГЕЛЕМ, содержашее цилиндрический стакан с опорой для трубок в его нижней частй и нижнюю крышку со штуцером, расположенным по ее центру, о т л и ч а ю -* ш е е с я тем, что, с целью однородности заполнения трубок, устройство до» полнительно содержит сплошной цилинд.ричесжий вкладыш, установленный по центру стакана с зазором относительно его стенок.

2. Устройство по и. 1 о т л и ч аю щ е е с я тем, что опора для трубок выполнена. на внутренней поверхности нижней крышки в виде кольцевого бортика с шириной не менее суммы толшин стенки стакана и трубок. „

3. Устройство по и. 1, о т л и ч а - а» ю ш е;.е, с я тем, что, оно дополнительно снабжено верхней крышкой, идентичндй нижней крышке.

1 10152

Изобретение относится к лабораторной технике, в частности к устройствам дпя эпектрофореза в попиакрипамидном геле, и может найти применение в биологии, биохимии и медицине.

При исследованиях связанных с применением эпектрофореза в цилиндрических трубках, заполненных гелем, весьма важно, чтобы вся партия трубок, исполу зуемых в эксперименте, была идентична как по составу геля, так и по высоте столба геля в трубках. Поэтому заполняют гелем сразу всю партию трубок и затем производят отбраковку.

Известно устройство дпя заполнения партии трубок, например капиллярных, гелем, содержащее цилиндрический стакан с отверстием в дне дпя входа раствора геля, сетку> расположенную в нижней части стакана дпя опоры трубок, стержень, расположенный в центральной части стакана по его ocH и конструктивные эпемен ты, соединенные со стержнем и обесиечиваюшие вертикальное положение трубок в стакане (1).

Недостатком известного устройства является недостаточная однородность заполнения трубок гелем, обусловленная неравномерным распределением входяшего потока геля и неоднородностью успо30 вий полимеризации.

Наиболее близким техническим решением к предлагаемому является устройство дпя заполнения партии трубок гелем, содержашее цилиндрический стакан, проницаемую для геля перегородку в нижнейчасти стакана дпя опоры на нее трубок и нижнюю крышку в форме конуса основанием примыкаюшего к стакану, в вершиНе которой штуцер дпя подачи раствора

40 геля (2).

Недостатком устройства является недостаточная однородность заполнения трубок гелем. Этот недостаток обусловлен тем, что вертикальное расположение трубок по всему сечению стакана, коническая крышка и перегородка в нижней части стакана не обеспечивают достаточно однородного распределения входящего потока геля по всем трубкам. Кроме того, при

50 полимеризации геля центральные и крайние по расположению в стакане трубки оказываются в неодинаковых условиях относительно отвода тепла, выдепяюшегося при попимеризации геля, вследствие чего скорость попимеризации геля в различных трубках оказывается неодинакс вой, что также приводит к различиям в

89 2 составе и высоте геля в различных трубках.

Цель изобретения — повышение omoродности заполнения трубок гелем.

Поставленная цвпь достигается тем, что известное устройство для заполнения партии трубок гелем, содержащее цилиндрический стакан с опорой для трубок в его нижней части и нижнюю крышку со штуцером, расположенным по ее центру, дополнительно содержит сплошной цилиндрический вкладыш, установленный по центру стакана с зазором относительно его стенок.

При этом опора дпя трубок выполнена на внутренней поверхности нижней крышки в виде кольцевого бортика с шириной не менее суммы топшин стенки стакана и трубок.

В преимушественном варианте исполнения стакан снабжен верхней крышкой, вы олненной аналогично нижней крышке.

Существо изобретения состоит в том, что благодаря осевой симметрии устройства и однорядовому расположению трубок все трубки оказываются в одинаковых условиях не только во время заполнения устройства гелем,но и во время попимеризации.

Выполнение опоры дпя трубок в виде кольцевого бортика на крышке устройства об. легчает выем заполненных трубок из уст ройства.

Наличие верхней крышки делает сим— метричным поток истекания вытесняе- . мой из устройства воды. Это также оказывается существенным при высоте заполнения трубок близкой к верхнему краю устройства, .так как в этом случае несимметричный поток истекания затрагивает и пограничный верхний спой геля, являясь дополнительным фактором неоднородности заполнения.

На фиг. 1 показан частичный разрез устройства дпя заполнения партии трубок гелем с вкладышем и его поперечное сечение без вкладыша; на фиг. 2 — часть разреза устройства, показывающая в большем масштабе заполняемую, трубку, опирающуюся частью нижнего торца на бортики нижней крышки.

Устройство дпя заполнения партии трубок гелем состоит из цилиндрического стакана 1, нижней и верхней крышек 2 со штуцерами 3 и кольцевыми бортиками

4, сплошного цилиндрического вкладыша

5. На фиг. 1 и 2 показаны цпя ясности трубки 6, установленные в зазоре между вкладышем 5 и стенками стакана .1, с. в разрезе А-А на фиг. 1 показан также

289 4 цо уровня верхнего штуцдра 3 и оставляют открытым во избежание возникновения перепадов цавления вслецствие усацки геля при полимеризации.

По окончании полимеризации геля в устройстве крышки 2 свинчивают, иэ стакана 1 выталкивают сначала вкладыш 5, а затем извлекают заполненные гелем трубки 6, которые, как правило, извлекаются все сразу в виде цилиндрического блока.

Работа устройства проверялась на лабораторном макете, предназначенном для заполнения трубок с внутренним циаметром 2,5 мм цлиной 120 мм в количестве 30 шт. Трубки заполнялись гелем с линейно возрастающей сверху вниз вцоль трубки концентрацией акриламицового геля с градиентом плотности от 4 цо 20%, высота столбика геля 95-100 мм. Разброс по высоте столбиков полимеризованного в трубках геля в пределах 3 мм, что значительно лучше результатов, получаеMbfx другими устройствами, дающими разброс цо 15 мм при той же высоте гелей.

Процент отбракованных трубок (гели с пристеночными пузырями и разрывами геля в трубках) обычно незначителен и составляет 3-5 трубок на партию, в то

Время как известные устройства дают половину или одну треть бракованных трубок. Дальнейшая проверка проводилась с помощью электрофореза на гомогенате белков, например, мозга крысы, ганглиях большого пруцовика. Белки подвергались электрофоретичевкому раэцелению в приготовленных с помощью предлагаемого устройства гелях с градиентом плотности

4«20%, окрашивались кумаси-голубым и подвергались ценситометрированию на цвухволновом микроценситометре Шимацзу

CS -910. Результаты измерений показали, что повторяемость ценситограмм цля одинаковых проб белков по значению оптической плотности и электрофоретической поцвижности в фракциях белков укладывается в 5%, в то время как известные устройства цля приготовления партии трубок с гелем не позволяют получать воопроиэвоцимость лучше 15%.

3 - -1015 один из возможных вариантов выполнения ограничителя для вкладыша 5, которым в данном случае является торец,7 штуцера 3.

Устройство- работает следующим обра5 эом.

На стакан 1 навинчивают нижнюю крышку 2, располагают устройство наклонно или горизонтально и укладывают в него вдоль стенки около 1/3 всей партии заполняемых трубок 6. Затем по уложенным трубкам 6 вцвигают вкладыш 5 цо упора в торец 7 штуцера 3 или любой другой каким-либо образом устроенный ограничитель. После чего укладывают 1S остальную часть партии трубок так, что они заполняют все пространство по коль цу между вкладышем 5 и стенкой стакана 1. Устройство устанавливают вертикально, -навинчивают верхнюю крышку 2.

Далее, как обычно, устройство заполняется водой, пузырьки воздуха,задерживающиеся на стенках стакана 1 и трубок 6 ..тем или иным способом изгоняются, после чего к штуцеру 3 в нижней крышке 2 подключают источник гепевого раствора.

Раствор геля подают, например, с помощью насоса или из сосуда с раствором, расположенного выше устройства, через гибкую трубку (не показаны), подключенную к штуцеру 3.

Поступающий в нижнюю часть устройства более тяжелый, чем вода, раствор геля вытесняет воду, заполняя нахоцяшиеся в устройстве трубки 6 и пространство между ними. В заявляемом устройстве цля изгнания пузырей воздуха удобно вос- пользоваться вакуумной откачкой через . штуцер 3 в верхней крышке 2. Благодаря осевой симметрии в предлагаемом устройстве входящий поток геля равномерно распределяется по всему заполняемому пространству, чем обеспечивается однородность условий заполнения.

В конце процедуры заполнения часть раствора геля, содержащуюся в соединительных трубках и нижней части устройства цо уровня нижних торцов трубок.6, вытесняют: раствором сахарозы, по плотности превосхоцящим плотность раствора геля; эту операцию осуществляют путем замены раствора геля в источнике на раствор сахарозы. После этого устройство для заполнения трубок отключают от источника, причем часть соецинительной трубки оставляют подключенной к устройству, а свободный ее конец поднимают

Применение предлагаемого устройства позволяет экономить в 2-3 раза дефицитные реактивы и рабочее время за счет почти стопроцентного выхоца пригодных для работы гелей и высокой воспроизводимости получаемых результатов.

1015289

Фиг.1

1О15289

Составитель И. Клешнина

Редактор Е. Папп Техред М.Гергель Корректор Ю. Макаренко

Заказ 3199/41 Тираж 873 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий.113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент», г. Ужгород, -ул. Проектная, 4