Способ пристеночного замораживания эритроцитов

 

СООЭ СОВЕТСНИХ

СОИ

PEGAYSËИН

6Э (ll) 3@р А 61 М 1l03

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

Н ABTOPCNOMY C V (21) 2654508/28-13 (22) 10.08.78 . (46) 23.06.83. Бюп . 34 23, (72) Л.С. Малков, Э.И. Гуйго, Г.Т. Недепьский, B.Н. Мепьннкова и

В,А. Кузьмин (7 1) Ленинградский технопогический институт хоподипьной ромышпенности ц

Ленинградский ордена Трудового Красжа о

Знамени научно.- исспедовательский ннСтцтут гематологии и переиивания крови (53) 612.113. (088.8) (S6) 1. Недельскнй ГТ. s др. Быстрое за- . мораживание эритроцитов щж испопьзбваннн низких концентраци» гпнцерина, - "Про бпемы гематопогии и пережюания крови ..

1973, 9, с. 19. . 2. Харрис Р. «Применение ззморажива-: ння - высушивания в быопог е М.;И.Л.

1956, с., 138-139.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПС ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТКОЙ (54) (57) СПОСОБ ПРИСТЕНОЧНОГО ЗАМОРАЖИВАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ, включакиай вращение контейнера с по я ней эритрощитов в криогенной жидкостн, о тл и ч а ю щ и и с s тем, что, с целью, упрсицения процесса и уменьшения расхода криопротектора, эритроциты с контейне»ром. врацают со скоростью 0,35 - 0,45 мlс. I 10240

Изобретение относится к способам консервации эритроцитов и может быть при менено в медицине и биологии.

Известен способ пристеночного заморажйвания жидких биологических материалов 5 путем помещения их в контейнер и жидкий азот $1) .

Известен также способ пристеночного замораживания эритроцитов, включающий вращение сонтейнера с порцией эритроци10 тов в криогенной жидкости. Вращение контейнера при этом способе замораживания производяэмедленно, с числом оборотов до 3 об/мин (0,01 м/с } (2) .

Однако известные способы не обеспечивают высокой скорости замораживания материала, даже при вращении металличес- кого контейнера с таким числом оборотов в криогенной жидкости. достигается скорость замораживания лишь 0,2-0,3 о С/с. 20

При замораживании эритроцитов таким способом необходима большая концентрация криопроектора (30% глицерина) в криоконсерванте, что усложняет и удорожает процесс криоконсервации в целом и увеличивает расход криопротектора.

)Лель изобретения - упрощение процесса и уменьшение расхода криопротектора.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу пристеночного замо-30 раживания эритроцитов, включающему вращение контейнера с порцией эритроцитов в криогенной жидкости, эритроциты с. контейнером вращают со скоростью 0,350,45 м/с.

Способ осуществляют: следукиним образом.

Пример. Суспенэию эритроцитов с криоконсервантом в количестве 200 мл аагевают в цилиндрический металлический: 4О контейнер емкостью 350 мл, имеющий снаружи очехление интенсификации процесса кипения жидкого азота на его наруж91

2 ной поверхности. Контейнер герметично закрывают пробкой и закрепляют в зажимах устройства, смонтированного на крыше. Включают электродвигатель устройства и крышку с устройством устанавливают на емкость с криогенной жидкостью. При. этом вращаккцийся контейнер погружают в криогенную жидкость (жидкий азот, воздух) и начинается намораживание эритроцнтов, залитых в контейнер, на внутренней стенке контейнера. Процесс заканчивают, когда прекращается кипение криогенной жидкости в емкости, что свидетельствует о полном замерзании всей дозы эритроци- тов.

При замораживании 200 мл суспенэии эритроцитов с криоконсервантом, содержащим лишь 20% глицерина, в цилиндричесаком алюминиевом контейнере диаметром

55 мм и длиной 180 мм при числе оборотов контейнера вдиапазоне 120-150 об/мин, процент неповрежденных клеток составля ет 96-97%, что соответствует установленным нормам

При вращении контейнера с.указанной скоростью получаются хорошие результаты, поскольку достигаемая при этом средняя скорость замораживания отдельных слоев находится в пределах 7-12 С, т.е.. оптио мального диапазона скоростей, в котором получаются наилучшие качественные ре- зультаты при использовании в качестве криопротекторов глицерина и ПАП.

Предлагаемый способ позволяет за счет значительного увеличения скорости прохождения критической эрны температур при замораживании эритроцитов снизить в 1,5 раза, сравнительно с ойпепринятой, кон-»центрацию криопротектора в криоконсер ванте прй одновременном уменьшении количества разрушенных клеток что способствует повышению качества криоконсервирования в целом.

Составитель В. Бруслик

Ре акт Т с е ех д С Мн рва Ко екто А.Дзятко

Заказ 4272/4 Ч ираж 713 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5 филиал ППП " Патент r. Ужгород, ул. Проектная, 4