Среда для культивирования бактерий некробактериоза

 

1. СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ НЕКРОБАКТРИОЗА, содёркащля иативный желток куриного яйца, дефибринированную кровь лошади, мясопептонный бульйон и мясопептонный arapо т л и ч a ю ц a с я тем что, с целыа повьшения селективности и ее ростовых свойств, в среду вводят аминокрйвин , a компоненты берут в следуюQteM соотношении, %. Аминокровин7 т 9 Нативный желток куриного яйцаб ,- 10 Дёфибринированная кровь Ь5 - 10 лошади 21-32 Мясопептонный бульон ОбтальМясопептонный агар ное 2. Среда по п. 1, отличающ a я с я тем, что для вьщеления бактерий нек бактериоза в ;нее дополнительно Лодят антибиотик неомицин в количестве 300-500 ЕД/мл среды (Л F

СОЮЗ СООЕТСНИХ с съем

РЕСПУБЛИК

0Ю О1) ЗСЮ С 12@ 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ в с в тсссновт ссидстсввствт т 5 — 10 н 21 - 32

Оотальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ, (21) 3499703/30-15 (22) 14 . 10. 82 (46) 23.12.83. Вюл. В 47 (72) A.A.Самоловов (71) Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока (53) 576.8.094(088.8) (56) 1. Лабинская Л.С.. Микробиология с техникой микробиологических иссле дованнйв М., Медицина, 1978, с. 377 (прототип). (54)(57) 1. СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВА-

НИЯ SAKTEPHN НЕКРОВАКТРИОЗА, содержащая нативный иелток куриного яйца, дефибринированную кровь лошади, мясо« пептонный бульйони мясопептонный агар. о т л и ч а ю щ а с я тем, что, с целью повыаения селективности и ее ростовых свойств, в среду вводят ами" нокрОвин, а компоненты берут в следующем соотнсхаении, Ъ.

Аминокровин 7-. 9

Нативный желток куриного яйца б - 10

Дефибринированная кровь лощади

Мясойейтонный бульо

Мясопептонный агар

2. Среда по п. 1, о т л и ч а ющ а я с я тем, что для выделения бактерий некробактериоза в;нее дополнительйо йводят антибиотик неоми- Е цин в количестве 300-500 ЕД/мл среды

1062260

Аминок рови н

Желток куриного яйца

10 дефибринирова н. ная кровь лошади МПБ 32

7 10

27 21

50 50

6 - 10

ВНИИПИ Заказ 10159/28 Тираж 523 ПодПисное

Филиал ППП "Патент", r.Óæãîðoä, ë,Ïðoåêríàÿ,4

Изобретение относится к сельскому хозяйдтву, в частности к ветеринарной микробиологии, и может найти применение в лабораторной практике для выделения бактерий некроза при диагностике некробактериоза, опредее ленни чувотвителЬности к антибиотикам дисковым методом и селекции штам,мов ° j

Известна питательная среда для выделения бактерий iнекробактериэа i I

10 которая содержит следунщие ингредиен. ты, вес. %:дефибринированная кровь. лошади1. 10-15, глюкоза 1-2 и мясопептояный агар (NIIA) остальное Г13.

НеДостатком этой среды является 15 слабая ее избирательность. При высеве на эту среду чистых культур бак терий некроза вырастают мелкие, росинчатые, бесцветные колонии с .преобладанйем коротких форм бактерий,20 что затрудняет культивирование и дифферэнцию возбудителя. Рри высеве на сруду патологического материала выделение колоний возбудителя.некробак триоэа крайне затруднительно вследств)е25 неспецифичности культурных и морфологических свойств.При использовании добавок антибиотиков можно подавить рост сопутствующей микрофлоры, однако форма колоний палочки некроза не позволяет строго отличить их от колоний бактерий других видов.

Цель изобретения - повышение селективности среды, ее ростовых свойств и улучшение культуральных свойств микроба.

Роставленная цель достигается использованием среды для культивирования бактерий некрсбактериоэа, содер жащей нативный желток куриного яйца, дефибринированную кровь .лошади, мясопептонный бульон и мясойейтонный агар с дополнительным введением аминокровина, причем компоненты берут в следукщем соотношении, вес.в:- 45

Аминок ровни 7 — 9

Нативный желток куриного яйца

Дефибринированная кровь лошади 5 — 10

Мясопептонный бульон (МПБ ) 21 — 32

Мясопептонный агар Остальное

Кроме того, дополнительно вводят в среду антибиотик неомицина в количестве 300-500 ЕД/мл среды.

1 . р и м е р. Вз яты необходимые стерильные компоненты в количествах, указанных в таблице. 60

Приготовление среды проводилось следующим образом.

К МПБ рН 7,6-7,8 добавлены дефибринированная кровь лошадки, аминокровин и яичный желток. Смесь нагревали до 45-50 С на водяной бане и смешивали с предварительно расплавленным и охлажденным до 50 С NfIA. Полученную|. смесь разливали в чашке Петри и после застывания использовали для высева;

Посев проводили .шпателем дробно по всей поверхности среды. Инкубировали при 37ОС в атмосфере углекислого газа при давлении 0,8 кг/см 2 в течение 48 ч °

Ррн высеве йа эти среды 18 культур бактерий некроза, а также суспензии патологического материала, взятого от коров с некротическим поражением конечностей, получены белые, сухие, выпуклые колонии диаметром 2-3 мм и с зоной гемолиэа эритроцнтов. Внешний вид колоний бактерий некроза легко отличим от колоний других видов микроорганизмов. Морфологически палочки некроза преимущественно в виде нитевидных форм с утолщениями по их длине.

Рри высеве на среды предлагаемого состава, дополнительно содержащие

300-500 ЕД неомицина на 1 мл среды, получены такие же колонии некроза при практическом отсутствии роста сопутствукщей микрофлоры, Изменение состава среды ведет к снижению ее селективности, а именно снижение содержания нативного яичного желтка, аминокровина, соотношения жидких компонентов и МПА ведет к уменьшению размера колоний и изменению их формы.

Следовательно, указанные соотношения являются оптимальными. РредлагаемыЕ среды обладают более высокой селективностью к бактериям некроза, чем известные и исключают использование дорогих синтетических аминокислот, более просты в изготовлении за счет снижения числа входящих в них компонентов и.могут быть применены при лабораторной микробиологической диагностике некробактериоза.