Способ определения грибов при грибковом поражении древесины растений

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРИБОВ ПРИ ГРИБКОВОМ ПОРАЖЕНИИ ДРЕВЕСИНЫ РАСТЕНИЙ, включающий выделение мицелия грибов из мест поражений с получением чистых культур моноспоровых изолятов и их идентификацию , отличающийся тем, что, с целью повышения точности, идентификацию осуществляют путем сравнения культуральных и морфологических признаков моноспоровых изолятов с эталонами для гомоталличных грибов или скрещиваний моноспоровых изолятов с моноспоровыми изолятами-эталонами для гетероталличных грибов.Q

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11)

3(61) С 12 N 1 00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21 ) 3320716/30-15 (22) 17.06.81 (46) 07.01.84. Бюл. Р 1 (72) С.М. Майданик (71) украинский научно-исследова,тельский институт садоводства (53) 634.0.844.4 (088.8) (56) 1. Наумов Н .А. Методы микологи ческих и фитопатологических исследований. Л;, 1937, с. 166-168.

2. Ванин С.И. Методы исследований грибных болезней леса и древесины. Институт защиты растений, 1930. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРИБОВ

ПРИ ГРИБКОВОМ ПОРАЖЕНИИ ДРЕВЕСИНЫ

РАСТЕНИЙ, включающий выделение мицелия грибов из мест поражений с получением чистых культур моноспоровых изолятов и их идентификацию, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, идентификацию осуществляют путем сравнения культуральных и морфологических признаков моноспоровых изолятов с эталонами для гомоталличных грибов или скрещиваний моноспороэых изолятов с моноспоровыми изолятами-эталонами для гетероталличных грибов.

1065474 (2

60

Изобретение относится к микологии и фитопатологии и, в частности, к способам обнаружения, выделения в чистые культуры и идентификации грибов -патогенов живой древесины.

Известен способ микологического анализа пораженной древесины произрастающих деревьев, включающий проращивание внутридревесного мицелия во влажных камерах и проведение последующей его идентификации по культуГально-морфологическим признакам (1) .

Недостатком способа является его низкая точность.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности является способ микологического анализа, включающий отбор проб (небольших кусочков древесины) из центральной части поражения, размещение проб на твердых питательных средах в чашках Петри, переведение проросшего из проб мицелия грибов в чистые культуры, проведение идентификации выделенного из пораженной .древесины мицелия (чистых культур) грибов путем сравнения по культурально-морфологическим признакам с мипелием имеющихся чистых культур-грибов разрушителей древесины (или их .описаниями), выделенных непосредственно из траммы их плодовых тел j2) .

Недостатками известного способа ,являются низкая точность и достовер", ность. Так, можно обнаружить, выделить и идентифицировать патоген только в том случае, когда весь процесс поражения древесины от момента ее заражения и до полного разложения осуществляется одним грибом, когда внутридревесный мицелий этого гриба не претерпевает никаких морфологических изменений (остается идентичным по культурально-морфологическим признакам с ми целием, проиэрастаемым непосред.ственно из траммы его плодового тела) и в культуральных условиях хорошо отличается от мицелия других дереворазрушающих грибов. Однако поражение живой древесины, как правило, осуществляется несколькими следующими в определенном по рядке друг за другом грибами — разрушителями древесины; гриб-патоген, проникнув в живую древесину и продвигаясь в продольном, поперечном и тангенциальном направлениях, использует в основном простые, растворенйые в клеточном соке и сосудах питательные вещества и затем уступает место. грибам-сапрофитам, использующим в уже мертвой древесине ее сложные компоненты: лигнин, целлю5

40 лозу. Поэтому при отборе проб только из центра поражения не исключена воэможнос ь упустить патоген и принять за паразита следующий за ним гриб-сапрофит. Гетероталличные виды деревораэрушающих грибов, которые в данной группе грибов составляют большинство в стадии мицелия полиморфны, отдельный вид может иметь до 4-х хорошо различающихся по культурально-морфологических признакам форм мицелия. Все эти возможные формы мицелия деревораэрушающих грибов широко распространены в природе и большинство из них идентифицировать по культуральноморфологическим признакам практически невозможно.

Еще одно обстоятельство, затрудняющее проведение идентификации мицелия деревораэрушающих грибов по культурально-морфологическим признакам, состоит в том, что многие виды этих грибов даже в стадии нор.— мального диплоидного мицелия, особенно близкородственные виды, мало различимы в культуральных условиях.

Целью изобретения является повышение точности и достоверности микологических анализов пораженной древесины.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу микологического анализа поражений древесины произрастающих растений, включающему выделение мицелия грибов иэ мест поражений с получением чистых культур (моноспоровых изолятов) и их идентификацию, идентификациЮ осу; ществляют путем сравнивания культуральных и морфологических признаков моноспоровых иэолятов с эталонами для гомоталличных грибов или скрещиваний моноспоровых изолятов с моноспоровыми изолятами-эталонами для гетероталличных грибов °

Пример. С больного дерева, например с его пораженной многолетней ветви, берут образцы длиной

20-30 см. В лаборатории образцы протирают спиртом и освобождают от коры. Затем на отдельно взятом образце в 10-15 см от одного иэ концов делают. поперечный срез и из открывшейся в его плоскости пораженной зоны, начиная со здоровой древесины и последовательно до оси продольного (центрального) распространения поражения при помощи стерильного ножа вырезают дифференцированно до

10 .кусочков (проб), которые помещают на твердые питательные среды в чашки Петри. Проросший из проб мицелий переводят в чистые культуры. Перед этим предварительно подготавливают монаспоровые изоляты-эталоны из плодовых тел грибов, обнаруженных

1065474

Составитель A. Макаров

Техред С. Легеза Корректор O. Билак

Редактор Т. Кугрышева

Заказ 11008/30 Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,4 на деревьях исследуемой породы.Выделенные из древесины чистые культуры грибов разделяют на репродуктивные и стерильные. Репродуктивные культуры в свою очередь разделяют по культурально-морфологическим особенностям их моноспоровых изолятов на гетероталличные и гомоталличные. Гомоталличные грибы идентифицируют путем сравнения их моноспоровых изолятов по культурально-Mop@oлогическим признакам с моноспоровыми изолятами гомоталличных грибовэталонов. Гетероталличные грибы идентифицируют путем скрещивания их моноспоровых изолятов с моноспоровыми изолятами-эталонами гетероталличных грибов: образование моноспороЬьЫ изолятом исследуемого гриба с одним из моноспоровых изолятов-эталонов репродуктивной культуры дает полное право отнести исследуемый гриб к виду, характеризующему этот эталон, стерильный мицелий идентифицируют путем скрещивания его с мицелием моноспоровых изо лятов-эталонов гетероталличных грибов: образование стерильным мицелием с одним из эталонов репродуктивной культуры дает право отнести

его к характеризующему этот эталон виду гриба. Анализ должен иметь десятикратную повторность.

Для анализа были взяты 9 образ10 цов древесины яблони;, пораженной

"млечным блеском" (Stereum purpureum

Регв). Микологическим анализом по предложенному способу патоген Stereum purpureum был выявлен во всех

15 9 образцах, в то же время известным способом патоген удалось выявить только в одном образце.

Как показано в примере осуществления, способ микологического анар0 лиза поражений древесины произрастающих растений обеспечивает повышение точности и достоверности анализа.