Способ выявления генетического действия микрорадиоволн нетепловой интенсивности

 

СПОСОБ ВУЯВЛЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ МИКРОРАДИОВОЛН НЕТЕПЛОВОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ, включающий воздействие на животных микрорадиоволн непрерывной генерации и последуюдий подсчет количества клеток с аберрациями хромосом, о т л и чающий с я тем, что, с целью обнаружения мутагенного или антимутагенного эффекта, облучению микрорадиоволнами подвергают животных возраста 3-5 месяцев в течение 20 или 45 дней по 6-7 ч ежедневно, при этом в качестве тест-системы используют -хромосомы клеток паренхимы печени , после частичной гепатэктомии, находящихся в ана-тело-фаэе первоS го митоза. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

3(58 А 61 N 1 42

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

94%0 44Ф%.

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21 ) 344 6661/28-1 3 (22) 28.05.82 (46) 23. 01. 84. Бюл. Р 3 (72) E. Н.Антипенко, И.В.Ковешникова и О.И.Тимченко (71) Киевский ордена Трудового Крас ного Знамени научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н.Марзеева (53) 539. 104 (088. 8) (56) 1. Рамайя Л.К., Померанцева M.Ä., Вилкина Г.А., Тихончук В.С. Изучение действия микроволн СВЧ на половые и соматические клетки млекопитающих. — Цитология и генетика, т. 14, 1980, Р 6, с. 3 — 8.

2. Капустин А.А., Руднев И.И., Леонская Г.И,, Конобеева Г.И.

О генетических эффектах действия переменного электромагнитного поля

СВЧ-диапазона. — " Питология и генетика, вып. 5, 1976, с. 400-402 (прототип).

„„SU„„ 1068129 А (54 ) (57 ) СПОСОБ BL HBJIEHHH ГЕНЕТИЧЕ СКОГО ДЕЙСТВИЯ К ИК РОР АДИО ВОЛН НЕТЕПЛОВОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ, включающий воздействие на животных микрорадиоволн непрерывной генерации и после. дукщий подсчет количества клеток с аберрациями хромосом, о т л и чающийся тем,что,сцелью обнаружения мутагенного или антимутагенного эффекта, облучению микрорадиоволнами подвергают животных возраста 3-5 месяцев в течение 20 или 45 дней по 6-7 ч ежедневно, при этом в качестве тест-системы используют хромосомы клеток паренхимы печени, после частичной гепатэктомии, находящихся в ана-тело-фазе первого митоза.

1068129

Изобретение относится к экспери- ментальной биологии и медицине и может быть использовано при оценке генетического действия микрорадиоволн.

Известен способ изучения генети ческого действия микрорадиоволн тепловой интенсивности на млекопитающих. Лабораторных животных (мыши, крысы) облучали микрорадиоволнами частотой 2400-2500 МГц непрерывной 10 генерации с плотностью потока энергии 5 — 800 мВт/см . o генетическом действии радиоволн судили по изменению целостности хромосом клеток костного мозга 11 . 15

Иедостатком способа является то, что никаких изменений целостности хромосом не было обнаружено. Отсутствие эффекта объясняется неудачным выбором тест-системы.

Иаиболее близким к изобретению по технической сущности является способ изучения генетического действия микрорадиоволн нетеплового уров н я на млекопитающих . Исс ледон ания проводили на белых крысах-самцах. Жинотных облучали микрорадиоволнами частотой 2375 МГц непрерывной генерации при плотности потока энергии 0,05 мВт/см . н течение

10 дней по 7 ч ежедневно. О генетическом действии микрорадиоволн судили по изменению .целостности и количества хромосом в клетках костного мозга облученных животных i2l

Иедостатком способа является то, что данный способ не позволяет выявить генетические эффекты микрорадиоволн нетепловой интенсивности, так как н качестве тест-системы выбраны клетки быстрообнонляющей- 40 ся ткани, н которой не может иметь место эффект накопления существенных повреждений хромосом вследствие их элиминации. Жизненный цикл клетки костного мозга крыс не превы- 45 шает 12 ч, а время существования аберрации н клетке составляет около

1,5 клеточных .цикла. Между тем генетические эффекты микрорадиоволн нетеплоной интенсивности, как сла= бого фактора, могут обнаруживаться только в длительном эксперименте и н системах, способных к аккумуля,ции генетических повреждений.

Целью изобретения является обнару>кение мутагенного или антимутагенного эффекта, вызываемого микрорадиоволнами нетепловой интенсинносTH °

Поставленная цель достигается те1л, что согласно способу выявления 60 генетического действия микрорадиоволн нетепловой интенсивности, включающему воздействие на животных микрорадионолн непрерывной генерации ,и последующий подсчет количества 65 клеток с аберрациями хромосом, облучению микрорадиоволнами подвергают животных возраста 3-5 месяцев в течение 20 или 45 дней по 6-7 ч ежедневно, при этом в качестве тестсистемы используют хромосомы клеток паренхимы печени, после частичной гепатэктомии, находящихся н àíà-Tело-фазе первого митоза.

Способ осуществляют следующим образом.

Белых беспородных крыс-самцов

3-5 месячного возраста облучают в течение 20 или 45 дней по 6-7 часов ежедневно. О генетическом действии электромагнитных волн судят по изменению количества клеток с поврежденными хромосомами (фрагменты, мосты, фрагменты и мосты) в клетках паренхимы печени после частичной гептатэктомии, находящихся в ана-тело-фазе первого митоза.

Облучение микроволнами в предлагаемом режиме приводит к физиологическим изменениям н организме крыс, которые, в свою очередь, могут вызывать генетические эффекты.

Применение в качестве тест-системы клеток паренхимы печени создает возможность уловить и выявить генетические эффекты нетепловых уровней микрорадиоволн. Это обусловлено тем, что паренхима печени у взрослых животных н обычных условиях является тканью практически не обновляющейся. Жизненный цикл гепатоцита у животных 3-5 месячного возраста составляет, в среднем, 150-200 дней.

Указанное свойство обуславливает способность клеток печени накапливать генетические эффекты длительно воздействующих зкзогенных и эндогенных факторов. Это проявляется, в частности, в возрастании содержания. клеток с аберрациями хромосом по мере старения, что, в свою очередь, создает реальную возмо>кность выявления не только мутагенного, но и антимутагенного эфФекта изучаемого фактора.

Таким образом, предлагаемый режкм облучения, использова.ние в качестве тест-системы клеток паренхимы печени животных 3-5 месячного возраста в совокупности позволяют достичь поставленной цели, т.е. выявить генетическое действие микрорадиоволн как мутагенное, так и антимутагенное.

Пример 1. Облучению микрорадионолнами частотой 2375 50 МГц непрерынной генерации подвергают белых беспородных крыс-самцов 3-х месячного возраста. Облучение проводят в камере, ограждения которой выполнены из поглощающего материала.

1068129

Коли- Количест- честГруппа

1 беррантные р

t во крыс во анаклетки,Ъ телофаз

Контроль 7

700 30,3 1,4

Облученные микроволнаМи

0,001

9 900 19,б+1,8

В.Кузьмичев

Редактор A.×åðíû>< Техред N.Ãåðãeëü Коррек тор В. Гир ня 1<

Заказ 11352/4 Тираж 688 Подписное

В IHHIIH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, 14осква, )»-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 с коэффициентом отражения не более

3% от величины падающей энергии.

Животные находятся в пластмассовых кле ках. Условия содержания (свето вой режим, микроклимат, питание) облучающихся и контрольных животных одинаковые. Плотность потока энергии в месте расположения клеток с подопытными животными составляла О, 01+0, 003 мВт/см . Продолжительность облучения — 45 дней по б ч ежедневно. Через 7 дней после прекращения облучения животным удаляли

2/Зчасти печени. Это стимулирует клетки оставшейся части к размнох<ению. Через 29 ч после операции, когда наступает максимум первых митозов в гепатоцитах, крыс забив ают путем растяжения. Каудальную долю печени удаляют и фиксируют в Формалине. IIa гистологических срезах, окрашенных по. Фельгену учитывают число клеток с поврежденными ><ромосомами (фрагменты, мосты, фрагменты и мосты) среди 100 .клеток н ана-тело-Фазе митоза. Результаты представлены в таблице. В результате облучения обнаружено снижение количества клеток с аберрациями хромосом, т.е. Облучение вызывало антимутагенный эффект.

Пример 2 . Облучению микрорадиов олнами частотой 237 5 - 50 !4Гц, непрерывной генерации подвергают белых беспородных крыс- самцов 4-х месячного возраста. Облучение проводят в камерах, описанных в приме1>е

ПлОтнОсть потОка эне1>гии в месте ,расположения кllеток с животными составляет 0,05 0,015 мВт/см . Продолжительность облучения 20 дней до 7 ч ежед:!сн!!о, атем животных оперируют пo укаэанному способу.

Через 30 ч крыс забивают, Каудальную долю печени берут для анализа.

Приготовление и анализ препаратов !5 проводят так, как н примере 1. у

Heоб jj!Уче !И!ах крь!с наблюдалось повышение содержа7р ния аберрантных клеток -:О 8. б =!0,9. (б крыс), а у части оно le >тличаОТ II I! COCT2 lIJlHJIO 1 О, 8

=0 р 8 с (7 крьlс) Таким Обра=;o; l, llpH да:!Иых услон;!ях э

25 эне!эгетическая 1!агруэка бы !а почти н два раза бо>:-ше, чем н примере 1, част!1 х<ивот !lых Отl leча>!ся ужe мута— генный эффект.

Предлагаемыи способ !!моет следующие преимущества.

Позволяет уловить и выявить генетическое действие (как антнмутагенное, так и мутагенное) микрорадиоволн .нетеплоной интенс11вности.

OH IIpocT H нl!пОлнении 11 Ilс тр бует переподготовки специал!!стон .

Предлагаемый способ целесообраэНо применять в медик0-био 1огпчески>: исследованиях, св яэанных с Оценкой генетической эeа:.;.;Оc;H раэлич ых уровней микрорадиоголн с целью их генетической регламентации, llpH изучении нейрого;. loHH!ll= н - ..: Фак торов регуляции генетического гомеостаза и генетических ocнон процесса старения.