Способ определения нарушения концентрирующей функции почек

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЯ КОНЦЕНТРИРУЮЩЕЙ ФУНКЦИИ ПОЧЕК путем фотометрического исследования мочи, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа , к пробе мочи добавляют взвесь культуры Micrococcus lisodecticus и лизоцим, определяют оптическую плотность пробы до и после введения раствора лизоцима, и по степени просветления пробы после добавления лизоцима по сравнению с контролем определяют нарушение концентрирующей .функции почек. г сд 00 vj

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

3 МИЛЮ

РЕСПУБЛИК

„Я0„„1105187 А

ЗЮ A И В 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР .

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ а

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

М ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3365462/28-13 (22) 11.09.81 (46) 30.07.84,. Бюл. к 28 (72) А.А.Ильин, К.П,Ни и Ф.М.Григорьева (71) Киргизский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии (53) 6 16.07 (088.8) (56) 1. Биохимические методы исследования в клинике, М., 1969, с. 409-413 (прототип) . (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЯ

КОНЦЕНТРИРУЮЩЕЙ ФУНКЦИИ ПОЧЕК путем фотометрического исследования мочи, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, к пробе мочи добавляют взвесь культуры Hicrococcus lisodecticus и лизоцим, определяют оптическуюплотность пробы до и после введения раствора лизоцима, и по степени просветления пробы после добавления лизоцима по сравнению с контролем определяют нарушение концентрирующей .функции почек.

105187 2

Для одной порции мочи берут три чистые пробирки. Во все пробирки наливают по 4 мп микробной взвеси с оптической плотностью О, 75 по шкале

5 экстинкции ЭФК-56. Первая пробирка контроль, в нее добавляют только

О, 1 мл мочи (моча исследуется не позднее 30 мин от момента взятия) .

Вторая — опыт Р 1 в нее добавляют

О, 1 мл мочи и 0,05 мл раствора лиэоцима концентрацией 8 мкг/мл. Третья опыт Ф 2, в нее добавляют О, 1 мп мочи и О, 1 мп раствора лиэоцима (8 мкг/мл) . Взятие разного количества раствора лизоцима (0,05 и О, 1 мп) предотвращает повторную постановку опыта в случае если активность лизоцима изменилась (установлено, что при хранении раствора лиэоцима в морозильной камере его активность меняется). Все три пробирки ставят в термостат на 1 ч при 1 = 37 С.

Результаты опытов приведены в

25 табл .

Таблица 1

Количество мочи, мп

Количество

Оптическая Степень

Количество микробной взвеси, мп лиэоцима, мл

4,0

0,1 контроль

0,73

4,0

0,45

0,1

0,28

0 05

4,0

0,1

0,48

0,1

0,25

Из показаний оптической плотности контроля вычитают показания оптической плотности опытов @11- 1 и 2 — зто и есть степень просветления, выра- 4> женная в единицах оптической плотности по шкале зкстинкции.

Для приготовления стандартной шкалы и построения графика готовят стандартный раствор (головной) из 50 хлористого магния и хлористого кальция с ионной силой 0,6 на бидистилли рованной воде. Опытным путем уста- новлено, что в качестве стандартного вещества берется СаС1, М8С12, так И как скорость лизиса данных растворов равна скорости лизиса мочи и сыворот,ки крови, Растворы с низкой ионной

4 1

Изобретение относится к медицине, а именно к нефрологии.

Известен способ определения нарушения функции почек путем измерения содержания ионов в моче (1J, Однако этот способ достаточно сложен, требует сложного оборудования, длителен при осуществлении.

Целью изобретения является ускорение и упрощение способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения нарушения концентрирующей функции почек путем фотометрического исследования мочи, к пробе мочи добавляют взвесь культуры Micrococcus 1isodecticus и лизоцим, опреде-ляют оптическую плотность пробы до и после добавления лизоцима, и по степени просветления пробы после добавления.лиэоцима по сравнению с контролем определяют нарушение концентрирующей функции почек.

Способ осуществляют следующим образом. плотность просветления силой (0,4; О;2; 0,1) готовят из головного раствора путем разбавления его бидистиллированной водой. Для стандартного раствора также берут по три пробирки для каждого значения ионной силы, например для ионной силы

О,б. Во все три пробирки наливают по 4,0 мп микробной взвеси с оптической плотностью 0,75. В первую про" бирку (контроль) добавляют О, 1 мп стандартного раствора с ионной силой 0,6. Во вторую (опыт Ф 1)

О, 1 мл стандартного раствора и 0,05 мп раствора лизоцима (8 мкг!мп). В

;третью (опыт В 2) — О, 1 мл стандартного раствора и 0,1мл раствора лизоцима (8 мкг/мп). Точно так же посту-, 1105!87

Шкала стандартов представлена в табл. 2. пают и со стандартными растворами с ионной силой 0,4, 0,2, О, 1.

Таблица 2

Коли- Количест- честОптическая плотность

Опыт, Nt

КоличестИон .. СтеИон, сила

0,2

Ион. СтеСтепень просветления

Ион. сила

0,4

Степень просветления во во мочи, МЛ пень просветления пень просветления сила

0,1 лизосила

0,6 микроб. взвецима, мл си, мп

Контроль 4 О 0 1

0,72

0,71 — 0,73

0,71

1 4юО Оэ!

0,05 0,15 0,57 0,25 0,46 0,42 0,29 0,5 0,08

24001005008064015056631041040033

ВНИКПИ

График строят в соответствии с опытом, где имеется хорошее просветление при наименьшем количестве лизо цима. Таким образом, в данном случае берут 0,05 мп раствора лизоцима. График строят в координатах

tt ионная сила — степень просветления" (в единицах оптической плотности) (см. чертеж) .

При сравнении со шкалой стандартов берут также опыт N 1,где добавлялось 0,05 мп раствора лизоцима, оптическая плотность его равна

0,28, что соответствует ионной силе О, 2 (по графику) .

Hp и м е р 1. Ребенок К.Е., 5 лет. Диагноз: острый гломерулонефрит с нефротическим синдромом, .хронический тонзиллит.

Под глазами видимые отеки. Симптом Пастернацкого положительный с обеих сторон. Белок в моче до

13,2 г/л, лейкоциты 2-3-3 в поле зрения (п,з.), эритроциты 10-11-13 в п.з., ионная сила мочи 0,29.

Выписан после лечения в удовлетворительном состоянии . Отеков нет, белок в моче 0,195 г/л, лейкоциты единичные, эритроциты 2-3-2 в п .з.1ионную силу мочи определяли до и после введения лизоцима, получили значение 0,45.

Hp и м е р 2. Ребенок Ю.В.

9 лет ° Диагноз: капилляротоксический нефрит с нефротическим синдромом, 25 хронический тонзиллит. Белок в моче

2, 93 г/л, лейкоциты 4-4-5 в п. з ., эритроциты 10-16-20 в п.з., ионная сила мочи О, 35, э тот показатель говорит о нарушении концентрирующей функции почек.

После проведенного лечения состояние улучшилось. Белок в моче 0,3 г/л, лейкоциты единичные, эритроциты

1-3-6 в п.з., ионная сила мочи 0,42.

Пример 3. Ребенок Д.Г. 7 лет, 35 Диагноз: острый гломерулонефрит с нефротическим синдромом. Общее состояние тяжелое. Отеки на лице, конечностях и крестце. Симптом Пастернацкого положительный с обеих сто40 рон. Белок в моче 5,0 г/л, лейкоциты 10-16-10 в п.э., эритроциты в большом количестве. Ионная сила мочи

0,17.

Через месяц лечения. Отеки на лице

45 уменьшились, на крестце исчезли.

Белок в моче 0,825 г/л, лейкоциты

1-2-2 в п.з., эритроциты 0-2-12 в п.з., ионная сила мочи 0,37.

Предлагаемый способ в 2-3 раза

50 быстрее, чем известные фотометрические методы исследования мочи при диагностике почечной патологии. Кроме того, повторное определение показа» теля ионной силы может служить

55 контролем эффективности лечения почечной патологии.

Тираж 688 Подписное г.Ужгород, ул.Проектная, 4