Способ количественного определения бромсульфалеина в крови
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ БГОМСУШ ФАЛЕШ1А В КГОВИ путем внутривенного введения .водного раствора бромсульфалеина, отбора пробы крови в цитратно-солевой буфер, отделения надосадошюй жвдкости, внесения .в нее нндикатора водного раствора едкого натра - с последующим фотометрнческнм определением концентрации бромсульфалеина, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, используют 10-12%-ный раствор едкого натра, дополнительно измеряют оптическую плотность до введения индикатора и рассчитывают концентрацию бромсульфалеина по разнице оптических плотностей до н после введения нндикатора. (Л
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
РЕСПУБЛИН (19) (11) (Я) 4 G 01 И 33 52
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ. »4»»аэаа «) (21) 3751592/28-13 (22) 13.06.84 (46) 07.11.85. Бюл. Ю 41 (71) Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский институт (72) Е. Г. Доброхотова, П. 1Г. Денисенко, А. Т. Бурбелло, А. 10. Лимаренко, А. Ф. Са.фонова, Т. В. Виноградова и О. Д. Барнаулов (53) 616.073.56 (088.8) (56) Изуайлет Л. И. и др. Модификация бромсульфалеиновой пробы для изучения функционального состояния печени у крыс:—
Гигиена и санитария, 1976, И 3, с. 59.
Лисичкин В. C. Бромсульфалеиновая проба . при хронических гепатитах. — Клиническая ме)гущина, 1963, Р 8, с. 128. (54) (57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕ—
ДЕЛЕНИЯ БРОМСУЛЬФАЛЕИНА В КРОВИ путем внутривенного введения .водного раствора бромсульфалеина, отбора пробы крови в цитратно-солевой буфер, отделения надосадочйой жидкости, внесения в нее индикатора— водного раствора едкого патра — с последующим фотометрическим определением концент. рации бромсульфалеина, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, используют 10 — 12%-ный раствор едкого патра, дополнительно измеряют оптическую плотность до введения индикатора и рассчитывают концентрацию бромсульфалеина по разнице оптических плотностей до и после введения индикатора.
1 11902
Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для диагностики при исследовании антитоксической функции печени.
Цель изобретения — повышение точности способа. S
Пример 1. В хвостовую вену крысе вводят 5%-ный раствор БСФ в количестве 20 мг/кг веса. Через 30 с, 1, 2, 5, 13, 15.
15, 20, 25 мин после введения отбирают по
0,1 мл крови из нижней части хвоста и по- !Q мешают ее в 5 мл цитратного буфера (4 ч.
0,9%-ного NaCl и 1 ч. 3,8%-ного цитрата натрия) . Содержимое центрифугируют, 4 мл надосадочной жидкости помещают в кювету спектрофотомегра 8 = 1 см и снимают опти- !5 ческую плотность раствора относительно дистиллированной воды при A = 582 ннм(Л,).
Затем в кювету вводят каплю 10%- ного раствора и снимают значение оптической плотности относительно воды при 9 = 582 ннм ваю (Д ) . По уравнениюг= if = !!/Qp)7 по градуированному графику находят С при
Д =Д-Д.
Результаты измерения концентрации БСФ в крови приведены в таблице. 25
Пример 2. В ушную вену кролику вводят 10%- ный раствор БСФ в количестве
5 мг/кг веса. Через 30 с, 1, 3, 5, 13., 15, 20. 35 мин после введения отбирают по
0,1 мл крови из вены другого уха и помешают ее в 5 мл цитратного буфера (4 ч.
0,9%-ного NaC1 и 1 ч. 3,8%-ного цитрата натрия) . Содержимое центрифугируют, 4 мл надосадочной жидкости помещают в кювету спектрофотометра f = 1 см и снимают оптическую плотн4сть буфера при h щс „=
= 582 ннм (Д,) ..Затем в кювету вводят
1 каплю 12%-ного раствора NaOH и снимают значение оптической плотности относи тельно воды или цитратного буфера при
%„„,,=582 (Дт). По уравнению D D
E.В О 017 или по градуированному графику находят
С при Д = Д вЂ” Д>.
Результаты измерения приведены в таблице, иэ которой, видно, что в условиях известного способа определяют либо увеличенное, либо уменьшенное значение концентрации БСФ в крови. Так, при больших концентрациях БСФ основная погрешность (более 50% основного значения) вызвана неправильной концентрацией индикатора — раствора NaOH (опыты при t = 30 с, 1 мин) и приводит к уменьшению истинного значения измеряемой величины. При более низких концентрациях в ряде случаев по известному способу наблюдается наличие БСФ в крови до 4 мт%, хотя на самом деле его,уже нет (опыт 15. мин). Эта ошибка вызвана отсутствием учета значения оптической плотности надосадочной жидкости и приводит к неправильным результатам измерения.
1д >
С0 а Я
w х
I х, о
Y и о и
1 ж й!( и о 1
O
Ц
3 о
v о (о х Хх
С»
Г\
D ф» о
Р о и
U о
Г4
О"
О
I»
v о
I» о
1/)
О
1»1
О (О
3.
О"
CV
О
О" (1
О
С»
)х
Ф
Е
CII
1»
О о х
4Ч х о ф о х о
Cl о
l о х
«( и
Cl з х
1 о о
Ю
=" R.
1/Ъ
С»
С»
С Ъ
О
Г4
С»
I/I
С»
О
С»
О" х х
Л
%/Ъ и
О о
5 о рЗ а х о о
l Q
Й1
I» n й." х
v х х
CI х
CO м х х и о
Б
К< в х
ClI х о
Il э а х о о
Г, Х et о х
К<
Ж Й о х
Р х
w x о
R, х о
К
D О а
Фе
D„ м
Г4
° °
° fI
ГФ
Ж
3„
3 о вх
Ю
5
v. ) и .
° (1
CI )3 ы 3 аь- е
Ц ха о у х
IC
2$ х х а
ЖВР и е.х х о р 34
g o ж43
1190264
3 8
»
1Х о
-о (д о
Я" х
v ь2
Cl
М о о
Й» м и о о о и в
Ю
C е
В о ю ф в
