Способ стимуляции икры карповых рыб (его варианты)

 

1, Способ стимуляции икры карповых рыб, предусматривающий однократную обработку половых продуктов п-аминобензойной кислотой, отличающийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, п-аминобензойной кислотой обрабатывают икру рыб непосредственно после оплодотворения в течение 60- . 120 мин, при зтом п-аминобензойную кислоту берут Б концентрации 0,01250 ,1%. 2. Способ стимуляции икры карповых рыб, предусматривагадий однократную обработку половых продуктов п-аминобензойной кислотой, отличающийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, п-аминобензойной кислотой обрабатывают зрелые спермии рыб перед осеме (О нением ими икры в течение 30-60 мин, при зтом п-аминобензойную кислоту берут в концентрации 0,00312-0,05%.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК g 4 А 01 К 61/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМЪ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3562265/28-13 (22) 04.03 ° 83 (46) 15.11.86. Бюл. В 42 (71) Казахский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства (72) P.Ì.Öîé, Т. С.Зак и И.В.Пак (53) 639 ° 3.034(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 789065, кл. А 01 К 61/00, 1978.

Авторское свидетельство СССР

У 867874, кл. А 01 К 61/00, 1979.

Авторское свидетельство СССР

9 1076051, кл. А 01 К 61/00, 1982. (54) СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ИКРЫ КАРПОВЫХ

РЫБ (ЕГО ВАРИАНТЫ) (57) 1. Способ стимуляции икры карповых рыб, предусматривающий однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью

„„SU„„1269770 А1 повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, и-аминобензойной кислотой обрабатывают икру рыб непосредственно после оплодотворения в течение 60- .

120 мин, при этом и-аминобенэойную кислоту берут в концентрации 0,01250,17.

2. Способ стимуляции икры карповых рыб, нредусматривакнций однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности и продуктивности рыб в течение первого года жизни, п-аминобензойной кислотой обрабаты- Е вают зрелые спермии рыб перед осеменением ими икры в течение 30-60 мин, при этом и-аминобензойную кислоту ( берут в концентрации 0,00312-0,05Х.

I 269770

Целью изобретения является повышение жизнеспособности и продукт|лвности рыб в течение первого года жизни.

Согласно предлагаемому способу стимуляции икры промысловых рыб, предусматривающему однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислото л, по первому варианту и-амиИзобретение относится к рыбоводству, а именно к способам стимуляции икры рыб для повышения их продуктивности, и может найти применение как

Ф на рыбоводных предприятиях, занимающихся искусственным воспроизводством рыб, так и в некоторых областях животноводства, Известен способ стимуляции икры промысловых рыб, заключающийся в инкубации оплодотворенной икры в воде с биологически активными соединениями, такими как смесь а -картотина, Р-токоферола, убихинона Ч „, пирогаллола и аскорбиновой кислоты.

Действие данного способа ограничивается только эмбриональным и личиночным периодами жизни рыб, так как он регулирует обменные процессы, не затрагивая генный материал„

Известен также способ стимуляции икры рыб, предусматривающий инкубацию оплодотворенной икры рыб до начала гаструляции в биологически активном веществе — фосфорнокислом калии, Этот способ также позволяет повысить жизнеспособность рыб только на ранних стадиях развития. Кроме тего, использование данного способа затруднено в промышленных масштабах:в связи со сложностью поддержания нужной концентрации биологически aKTHBHbKK веществ в течение длительного периода в условиях заводского воспроизводства.

Наиболее близким к предлагаемому является способ стимуляции икры рыб, предусматривающий однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой.

При осуществлении этого способа и-аминобензойной кислотой обрабатывают икру на стадии двух бластомеров до выклева, что активирует жизненно важные процессы, протекающие в момент воздействия и в ближайшее время. после воздействия, но не способствует повышению жизнеспособности и продуктивности рыб в течение всего первого года жизни рыб. нобензойной кислотой обрабатывают икру рыб непосредственно после оплодотворения Е3 течение 60-120 мин, при этом и-аминобензойную кислоту берут в концентрации 0,0125-0, 12.

Согласно предлагаемому способу стимуляции икры промысловых рыб, предусматривающему однократную обработку половых продуктов и-аминобензойной кислотой,.по второму варианту и-аминобензойной кислотой обрабатывают зрелые спермии перед осеменением ими икры в течение 30-60 мин, при этом и-аминобензойную кислоту берут в концентрации 0,00312-0,057.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Первый вариант. С помощью гипофизарных инъекций получают зрелые половые продукты рыб. Икру оплодотворяют обычным образом и обесклеивают в аппаратах Вейса, добавляя в обесклеивающий раствор и-аминобензойную кислоту и создавая ее концентрацию

0,00125-0, 1/, Время обработки икры и-аминобензойной кислотой составляет 60-120 мин, затем икру инкубируют обычным способом, например в кристаллизаторах.

Второй вариант. Также получают с помощью гипофизарных инъекций половые продукты рыб. Свежеотцеженную сперму обрабатывают в течение 3060 мин и-аминобензойной кислотой в концентрации: 0,00312-0,057. Затем этой спермой осеменяют икру рыб, которую затем обесклеивают и инкубируют обычным способом.

Способ по первому варианту выполнения проще, так как в этом случае совмещаются процессы обработки икры и-аминобензойной кислотой и ее обесклеивание, Выбор концентраций п-аминобензойной кислоты (ПАБК) при обработке икры рыб в пределах 0,0125-0, 17. связан с тем, что при использовании концентраций ПАБК вьш е О,IX препарат действует на икру угнетающе, а с применением концентраций ПАБК ниже 0,0125Х способ не может быть осуществлен в связи с тем, что стимуляция устойчиво проявляется лишь в повышении жизнеспособности рыб на ранних стадиях, но угнетающе влияет на показатели роста рыб в течение первого года выращивания (см.табл.1).

1269770

Концентрация п-аминобенэойной кислоты (ПАБК) при обработке спермиев рыб выбрана в пределах 0,00312-0,05Х в связи с,экспериментом, при котором был установлен пик стимулирующего действия ПАБК при использовании концентрации 0,003Х (30 мг в 1 л).

При использовании концентрации и-аминобензойной кислоты ПАБК вьппе

0,05Х стимуляционный эффект ПАБК Не проявляется и наблюдается подавление роста рыб, что связано с токсичностью дозы (по известному фармакологическому принципу действия биологически активных препаратов: высокие дозы— яд, малые дозы — стимулятор).

Выявлено также, что стимуляционный . эффект снижается при снижении концентрации ПАБК ниже 0,00312Х (см. табл.2). 20

Временной режим обработки икры рыб, равный 60-120 мин, связан с тем, что этот процесс совмещается с процессом обесклеивания икры.

Известно, что в период обесклеивания происходит набухание икры, котороЕ связано-с интенсивным всасыванием водных растворов и длится около 60 мин, . с прекращением набухания проникновение раствора ПАБК к зародышу сквозь оболочку икры затрудняется. Период же обесклеивания продолжается 60120 мин. Чувствительность зародьппей к воздействию генетических и физиологических факторов по мере развития З5 снижается, поэтому воздействие биологически активными веществами в период образования зиготы является наиболее эффективным. Таким образом, выбранная экспозиция 60-120 мин необходима и 40 достаточна для осуществления поставленной цели.

Временной режим, установленный для обработки спермиев рыб и-аминобензойной кислотой,.связан с тем, что обработка спермиев промысловых рыб генетически активными соединениями обычно проявляется после 30 мин экспозиции. С другой стороны выдерживание спермы рыб in vitro при комнатной температуре более 1 ч отрицательно сказывается на оплодотворяющей способности спермиев. Таким образом, экспозиция в пределах 30-60 мин является наиболее благоприятной, так . как позволяет избежать влияния побочных факторов и получить максимальный стимуляционный эффект.

Пример 1. Икру рыб, например карпа, осемененную обычным способом, обрабатывают рабочим раствором и-аминобензойной кислоты из такого расчета, чтобы после смешивания раствора и икры концентрация п-аминобензойной кислоты составила 0,1Х. Рабочий раствор витамина готовят на обесклеивающем растворе. Для обработки 0,5 кг икры данной дозой витамина в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют

5 г ПАБК. Осемененную икру и рабочий раствор витамина помещают в аппарат

Вейса. Обработку икры и-аминобензой ной кислотой совмещают с процессом обесклеивания икры. Экспозиция 2 ч.

Перемешивание икры воздушное.

Пример 2. Икру рыб, например карпа, осемененную обычным способом, обрабатывают п-аминобензойной кислотой в концентрации 0,05Х. Для этого в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют 2,5 г и аминобензойной кислоты и добавляют 0,5 кг икры.

Обработку икры стимулятором совмещают с ее обесклеиванием. Перемешивание икры в рабочем растворе витамина осуществляется сжатым воздухом. Экспозиция обработки икры 1 ч.

Пример 3. Икру карпа, осемененную обычным образом, обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концент рации 0,025Х. Для этого в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют 1,25r п-аминобенэойной кислоты и добавляют

0,5 кг икры. Далее, как в примере I.

Время обработки 2 ч.

Пример 4. Икру рыб, например карпа, осемененную обычным способом,. обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концентрации 0,0125Х. Для этого в 4,5 л обесклеивающего раствора растворяют 0,625 г ПАБК и добавляют 0,5кг икры.

Обработку икры стимулятором сонмещают с ее обесклеиванием. Перемешивание икры в рабочем растворе витамина осуществляется сжатым воздухом.

Экспозиция обработки икры 2 ч.

Пример 5. То же, что и в примере 1, но концентрация и-аминобензойной кислоты составляет 0,0060Х, время обработки 60 мин (1 ч).

Приме р 6. Тоже, что и в примере 1, но концентрация и-аминобензойной,кислоты составляет 0,0015Х.

Пример 7. То же, что и в примере 1, но концентрация и-аминобен5 1269 зойной кислоты составляет 0,001257. время обработки 60 мин.

Пример 8, Оплодотворенную икру карпа, осемененную обычным образом, помещают в культиваторы са стадии 2-х бластомеров до момента выклева, инкубируют в растворе и-аминобензойной кислоты концентрацией

0,00157. (по известному способу), Пример 9. То же, что и в при- 10 мере 8, но концентрация и-аминобензойной кислоты составляет 0,00127..

Данные по получению сеголеток и их продуктивности приведены в табл.3.

Из табл, видно, что обработка ик- 15 ры Tl-àìèíoáåíçîéíoé кислотой кс>нцентрацией 0,00125-0,17. оказывает в течение первого года жизни рыб стимулирующее действие, выражаюшееся в повышении выхода сеголеток„ по сравнению с известным способом.

Пример 10. Свежеотцеженную сперму рыб, например карпа, обрабатывают п-аминобензойной кислотой в концентрации 0,057. Для этого сначала готовят О, 1Х-ный маточный раствор витамина, растворяя 0,1 г и-аминобен,эойной кислоты в 100 мл физиологического раствора Рингер-Локка. Рабочий раствор витамина готовят:из маточного З0 и физиологического растворов с таким расчетом, чтобы после разбавления

1 ч. спермы 3-мя ч. рабочего раствора получить заданную концентрацию. Концентрация и-аминобензойной кислоты, равная 0,05Х, соответствует разведению -1 ч. витамина в 2000 ч. разбавленной физиологическим раствором спермы.

Для этого к 1О мл маточного раствора

ПАБК добавляют 5 мл физиологического 4О раствора и 3 ч. полученного раствора с 1 ч, спермы.

Экспозиция обработки 30 мин. Затем, этой спермой осеменяют нормальную икру. Обесклеивание и инкубацию икры проводят обычным способом. Оплодотворение составило 74Х.

При выращивании рыб, полученных из икры, оплодотворенной этой спермой, выживаемость составила, Х от икры:

770 ь личинки 39,3; мальки 32,7; сеголетки

25,7.

Пример 11. Свежеотцеженную сперму рыб, например карпа, обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концентрации 0,0062Х. Для этого 1 мл маточного 0,1 7-ного раствора ПАБК соединяют с 11 мл физиологического раствора и 3 ч. полученного рабочего раствора смешивают с 1 ч. спермы.

Экспозиция обработки 60 мин. Оплодотворение, обесклеивание и инкубацию икры проводят обычным способом. г Выживаемость икры составила 91Х.

Выживаемость составила, от икры; личинки 59,3; мальки 49,8; сеголетки

32,8.

Пример 12. Свежеотцеженную сперму рыб, например карпа, обрабатывают и-аминобензойной кислотой в концентрации 0,00312 . Для этого

0 5 мл 0,1 7-ного маточного раствора и-аминобензойной кислоты смешивают с 11,5 мл физиологического раствора

Рингер-Локка. 3 ч. полученного рабочего раствора соединяют с 1 ч. спермы, Экспозиция обработки 60 мин. Оплодотворение, обесклеивание и инкубацию икры проводят обычным способом. Оплодотворение икры составило 87,2Х. Выживаемость составила, X от икры: личинки 69,0; мальки 60,2; сеголетки

49,6.

Предлагаемый способ (его варианты) позволяет повысить продуктивность рыб при более простом его осуществлении.

П-аминобензойная кислота, активи руя жизненно важные биохимические процессы (в том числе и репарационные), в конечном итоге приводит к подъему жизненности организма и максимальному проявлению его продуктивных свойств.

Способ дает возможность в короткие сроки увеличить получение рыбной продукции с единицы прудовой площади и снизить ее себестоимость и может быть использован во всех прудовых хозяйствах, в которых организован заводской метод воспроизводства карповых рыб.

1269770

Выживаемость> I

Концентрация

ПАБК, I редняя масса сеголеток, r личинок мальков сегалетак ат мальков от икры от личинок

7!,7

144,7

187,0

137,4

47,8 144,9+5,12

61,5 150>3+5,24

80> О

82,0

0,0067

0>0017

0,0008

0 0006

Контроль

81,5

77,8

95,7

146, 4+5, 18!

01, 1

75,0

66,7

103>6

72,3

48>5 144> 1i5>09

84,0

55>4

184+6>50

100, О

69,0

52,5

46,1

Оплодотворение икРы>

Продуктивность> I к контролю (с учетом выживаемости

ll8 всех стадиях) Выживаемость, I

Средняя масса се

Концентрация ПАБК, I родуктивость, I к онтролю голеток сеголеток от мальков ин ов ик

200, 7 !

53,8

209,0

115, О

108,7

112,9

104,9

89,6

42,4

93,5

100

0,0025

О, 00125

0,00062$

91>1

37,2

86 ° 5

100

103,6

108, t

84,3

79,0

58,0

98,4

100

100

114,5

76,8

25,5

89,0

Контроль 98, 2 Продуктивность сеголеток, Х х прототипу

Получено сеголеток

Вариант аныта радуктнвност еголеток, I онтролю

Концентрация 1Экспознция

ПАБК, I обработки от личинок,I средняя масса, г

131,6

116 ° 1

133,3

117,6

65,3

120

68,0

120,1

121,6

71>3

120

129,7

128 1

80,0

120

84,!

85,1

67,8

111,4

108,5

112,8

109,9

101,3

8Ü,8

120

86,6

7 0,00125

100

76,9

8 О, 0015

9 0,012

98,2

75,2

99,5

98,7

Контроль (чистая вада) 100

62>7

1 0,100

2 О> 050

3 . 0,0250

4 0,0125

5 0,0060

6 О, 0015

Со стадии 2-х бластомеров

До вылупления (по прототипу) 106,5+4,56

90,2+3,08

89,0+2,72

84,6+3,98

65,5+3, 14

67,8+4,03

66,2+3,76

68,7+4,11

69,0+3,96

83,2+2.,98

Таблица!

Продуктивность1Продуктивсегалеток, в ость с

Х к контролю четам выживаемости а всех стаиях, в I к онтролю

Та блиц а 2 >

ТаблицаЭ