Способ определения хлорорганических пестицидов в продуктах пчеловодства

 

Изобретение относится к ветеринарному надзору и может быть использовано при санитарно-гигиенической оценке меда, воска, прополиса и перги после обработки пчел пестицидами. Цель изобретения - повышение точности и ускорение процесса. К исследуемому продукту - 10 г воска (прополиса , меда или перги) добавляют 30 мл горячей (90°С) смеси диметилсульфоксида и насыщенного водного солевого раствора в объемном соотношении 1:1. Пробу помещают в водяную баню при 80-95°С для равномерного распределения пестицидов по всему объему раствора, выдерживают 25 мин при периодическом перемешивании и охлаждают до комнатной температуры. Экстракт фильтруют. Осадок охлажденного воска смывают двумя порциями по 20 мл смеси петролейного эфира (40-70°С) и ацетона в объемном соотнощении 1:1 и фильтруют. После разделения фаз нижний слой отбрасывают. Оставшийся экстракт промывают тремя порциями по 5 мл воды и концентрируют до 0,5 мл выпариванием. Остаток наносят на пластину «Силуфол полосой не более 8 мм по линии старта в 20 мм от нижнего края пластины. На эту же пластину переносят раствор гексана, полученный после двойного ополаскивания выпарного сосуда. После подсыхания растворителей пластину помещают в хроматографическую камеру, на дно которой предварительно наливают смесь гексана с этилацетатом в соотношении по объему 3:1 слоем 5-7 мм. Хроматографирование проводят при 20°С. Десорбцию пестицидов с хроматографических пластинок осуществляют смесью ацетона и ксилола при объемном соотношении 1:6-1:10. 1 ил.-, 3 табл. о (Л го 00 СП 00 05 05

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (дц 4 G 01 N 30/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А STOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ll0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3741877/28-13 (22) 07.05.84 (46) 23.01.87. Бюл. № 3 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной энтомологии и арахнологии (72) А. В. Жаров (53) 543.544 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 824042, кл. G 01 N 31/08, 1980.

Илларионов А. И. Определение инсектицидов в меде. М.: Пчеловодство, № 8, 1981, с. 30.

Gayger. 1. Dustmann Н. Uber den Nachweis von Chlorkohlenwasserstoff Ruckstanden

in Bienenprodukten wachs, Honig und Pollen — Apidologic,, 1982, Bd 13, ¹ 1, р. 107—

109. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПЧЕЛОВОДСТВА (57) Изобретение относится к ветеринарному надзору и может быть использовано при санитарно-гигиенической оценке меда, воска, прополиса и перги после обработки пчел пестицидами. Цель изобретения — повышение точности и ускорение процесса. К исследуемому продукту — 10 г воска (прополиса, меда или перги) добавляют 30 мл

„„SU„„1285366 горячей (90 С) смеси диметилсульфоксида и насыщенного воднсго солевого раствора в объемном соотношении 1:1. Пробу помещают в водяную баню при 80 — 95 С для равномерного распределения пестицидов по всему объему раствора, выдерживают 25 мин при периодическом перемешивании и охлаждают до комнатной температуры. Экстракт фильтруют. Осадок охлажденного воска смывают двумя порциями по 20 мл смеси петролейного эфира (40 — 70 С) и ацетона в объемном соотношении 1:1 и фильтруют. После разделения фаз нижний слой отбрасывают.

Оставшийся экстракт промывают тремя порциями по 5 мл воды и концентрируют до

0,5 мл выпариванием. Остаток наносят на пластину «Силуфол» полосой не бо.пее 8 мм по линии старта в 20 мм от нижнего края Ж пластины. На эту же пластину переносят раствор гексана, полученный после двойного Ц ф ополаскивания выпарного сосуда. После под- ф сыхания растворителей пластину помещают в хроматографическую камеру, на дно которой предваритепьно наливают смесь гексана с этилацетатом в соотношении по объему

3:1 слоем 5 — 7 мм. Хроматографирование проводят при 20 C. Десорбцию пестицидов с хроматографических пластинок осущест- 0 вляют смесью ацетона и ксилола при объ- Ql емном соотношении 1:6 — 1:10. 1 ил., 3 табл. () 1285366 шают в хроматографическую камеру, на дно которой предварительно наливают смесь гексана с этилацетатом в соотношении по объему 3:1 слоем 5 — 7 мм. Хроматографирование проводят при 20 С. Когда растворитель поднимется по тонкому слою, не достигая 10 мм верхнего края пластины, последнюю извлекают из камеры. Хлорорганические пестициды (хлорбензилат, дихлорбензофенон, ДДТ, метоксихлор) при этих условиях хроматографирования располагаются на пластине в пределах Rf 0,25 — 0,85. Основываясь на этом, вырезают полоску пластины с указанными значениями Rf. Участок пластины с анализируемыми пестицидами расстригают на кусочки площадью 0,4—

0,5 см, помещают в стеклянный бюкс (объемом 5 мл) и заливают 2 мл смеси ацетона и ксилола в соотношении по объему 1:8. Бюкс закрывают крышкой и, для десорбции пестицидов, выдерживают 25 мин

t

Изобретение относится к определению остаточных количеств пестицидов, в частности, в продуктах ветеринарного надзора, и может быть использовано при санитарно-гигиенической оценке меда, воска, прополиса и перги после обработки пчел пестицидами.

Цель изобретения — повышение точности и ускорение процесса.

На чертеже представлено изменение извлекающей способности системы ацетон-кси- 10 лол в зависимости от соотношения компонентов.

Пример 1. Оптимальное соотношение компонентов. 10 r воска (прополиса, перги или меда) помешают в химический стаканчик и добавляют к нему 30 мл горячей (90 С) смеси диметилсульфоксида и насыщенного водного раствора хлорида натрия в объемном соотношении 1:1. Пробу помещают на водяную баню при 90 С и выдерживают 25 мин при периодическом перемешивании. Затем стаканчик с пробой охлаждают до комнатной температуры. Экстракт фильтруют через два слоя марли в дел ительную воронку.

Стаканчик с осадком охлажденного воска ополаскивают двумя порциями по 20 мл смеси петролейного эфира (40 — 70 С) и ацетона 25 в объемном соотношении 1:1 и фильтруют через ту же марлю в делительную воронку.

Интенсивно встряхивают делительную воронку 3 мин. После разделения фаз (25 мин) нижний слой отбрасывают. Оставшийся экстракт промывают тремя порциями по 5 мл воды, переносят в конусовидный выпаривательный сосуд и концентрируют до 0,5 мл.

Остаток с помощью шприца или пипетки наносят на пластину «Силуфол» полосой (не превышающей по ширине 8 мм) по линии старта (в 20 мм от нижнего края пластины) . Выпаривательный сосуд дважды ополаскивают 2 — 3 порциями по 0,2 мл гексана, который также переносят на пластину. После подсыхания растворителей пластину поме2 при периодическом взбалтывании содержимого. В хроматограф вводят 5 — 10 мкл надосадочного раствора.

Условия хроматографирования.

Используют хроматограф «Цвет-106» или другой аналогичный прибор с детектором постоянной скорости рекомбинации. Скорость протяжки ленты самописца 200 мм/ч; рабочая шкала электрометра 5>(10 9А; температуры: испарителя 240 С, колонки 200 С, детектора 250 С; скорость газа-носителя (азота) через колонку 40 мл/мин, детектор — 120 мл/мин; длина колонки 1 м, внутренний диаметр 3 мм. Колонка заполнена хроматоном W — А W зернением 0,20 — 0,25 мм с 5О силикона ПМС-100. Линейность детектирования соблюдают в пределах 0,3 — 10;

0,01 — 2,0; 0,1 — 5 и 0,2 — 5 нг для хлорбензилата, дихлорбензофенона, метоксихлора и

ДДТ соответственно. Нижняя граница определения хлорбензилата 0,3; дихлорбензофенона 001; метоксихлора 0,1; ДДТ 0,2 нг.

Извлечение добавок пестицидов из воска 76, из прополиса 78, из перги 74 и из меда

84Я. Общая продолжительность анализа составляет 1,25 — 1,5 ч.

Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что 10 r воска (прополиса, перги или меда) помещают в химический стаканчик и добавляют к нему 30 мл горячей (80 С) смеси диметилсульфоксида и насыщенного водного раствора хлорида натрия в объемном соотношении 1,3:1.

Пример 3. Отличается от примера тем, что 10 r воска (прополиса, перги или меда) помещают в химический стаканчик и добавляют к нему 30 мл горячей (95 С) смеси диметилсульфоксида и насьпценного водного раствора хлорида натрия в объемном соотношении 1:1,3.

Пример 4. Отличается от примера 1 тем, что 10 г воска (прополиса, перги или меда) помещают в химический стаканчик и добавляют к нему 30 мл горячей (90 С) смеси диметилсульфоксида и насыщенного водного раствора хлорида калия (или другой соли, обладающей растворимостью 20 — 50 г иа 100 г воды) в объемном соотношении 1:1.

Пример 5. Отличается от примера 1 тем, что участок пластины с анализируемыми пестицидами расстригают на кусочки площадью

0,4 — 0,6 см, помещают в стеклянный бюкс объемом 5 мл и заливают 2 мл смеси ацетона и ксилола в соотношении по объему 1:6.

Пример б. Отличается от примера 1 тем, что участок пластины с анализируемыми пестицидами расстригают на кусочки площадью 0,4 — 0,6 см, помещают в стеклянный бюкс объемом 5 мл и заливают 2 мл смеси ацетона и ксилола в соотношении по объему 1:10.

Введение в экстрагирующую систему насыщенного водного раствора соли, во-первых, повышает коэффициенты распределения пестицидов при реэкстракции в 1,5 — 2 раза и, 1285366

Таблица 1

Степень извлеОбъемное соотношечения пестицидов из продуктов пчеловодства (извлечение диметилсульфоксида и насыщенние при соотношении 1:1 ного принято за единицу) водного раствора хлорида натрия

При перераспределении в слабо— полярный растворитель происходит значительная потеря пестицидов, так как образуется трехслойная смесь: нижний слой содержит диметильсульфоксид, основные компоненты продукта пчеловодства и ч асть пестицида; средний — диметилсульфоксид, отдельные фракции жиров, восков и других компонентов продукта пчеловодства, гексан и основное количество пестицида; верхний — гексановый слой (мутный) содержит пестицид (до 40K) и много балластных веществ.

1,5:1

Средний смешанный слой меньшего размера. Верхний слой мутный, в нем содержится до 50K пестицида.

1,3:1

Средний слой очень мал, практически отсутствует. Верхний гексановый слой содержит меньше веществ, мешающих определению.

Два слоя, между которыми четкая граница раздела фаз. Верхний гексановый слой светлый, прозрачный. Практически весь пестицид перераспределен в верхний слой.

3 во-вторых, способствует получению более чистых экстрактов (экстракционная очистка).

Изменение объемного соотношения диметилсульфоксида и водного раствора соли оказывает значительное влияние на извлечение пестицидов из продуктов пчеловодства (табл. 1). В качестве солевого раствора могут быть использованы растворы NaCE, НС1, PbSO4 — РЬ(С2Нд02) и другие, имеющие растворимость от 20 до 50 г на 100 г воды (табл. 2) .

Условия определения

1285366

0,95

1:1,3

От7

1:1,5 достаточна.

0,5

1:2

Таблица 2

Степень изРастворимость в

Исследуемая соль влечения пестицидов, X

Pb (Снэ COO)? 44, 2

80 воде при

20 С, г/100 г воды

45,0

A1Cl>

ИаСНэ.СОО

А1 (NO )

46,5

62,6

О, 206

70,1

3О Nak Sz 03

3,1 (NHq)z SOy

Na@CrO

75,4

6,36

54

NaNO

FeC1>

4О к,со, 87,6

12,5

20,5

111,0

128,8

21,8

Ca(NOg)z

МН„СН,СОО

76

24,2

148

76

31,6

KNO3

NH„ЮЗ

180

80

33,3 кнсо

180

NazCrz g q

34,4

КС1

217

KSCN

79

35,1

ISO<

255,6

КСН зСОО

35,9

NaC1

37,2

NHqC1

А1 (SOq ) з

38,2

CaSOq

М8(ИОз)д

КМпо

KzSOq

К. г С т О

CuSOe

Naz CO

NH<НСОз б

Продолжение табл. 1

Слои четко отделены друг от друга. Верхний слой чистый, прозрач— ный.

Слои четко отделены, однако степень извлечения пестицидов не

Степень извлечения пестицидов не достаточна

Продолжение табл. 2

) 1 ) 3

Повышенная температура растворителя, поддерживаемая во время экстракции, приводит к ускорению анализа, так как способствует равномерному распределению пестицидов по всему объему раствора, что обес1285366

Таблица 3

Достигае-15 мый проНеобходимая про должительность экстракции для достижения высшего процента извлечения, ч

Температура экстракции, С цент извлечения пестицидов, Х 20

Формула изобретения

80-85

0,5

95

0,4

Зо

0,3

95

0,25

80-85

0,15

100

/ ксилела е эю юрующей еиеси

Составитель И. Осипова

Редактор А. Сабо Техред И. Верес Корректор С. Черни

Заказ 7589/45 Тираж 776 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4!5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

7 печивает более полное их извлечение за короткий промежуток времени (табл. 3). Экстракция пестицидов из продуктов пчеловодства согласно предлагаемому способу проводится в течение 30 мин.

С хроматографических пластинок хлорорганические пестициды десорбируются лучше слабополярными растворителями, чем полярными. Однако ни те, ни другие не позволяют полностью извлечь ядохимикаты за короткий промежуток времени (20 — 30 мин) (табл. 3) .

Использование смеси ацетона и ксилола позволяет полностью проэллюировать пестициды, так как при объемном соотношении

1:6 — 1:10 наблюдается синергитический эф8 фект, обеспечивающий полную (100о) десорбцию соединений (см. чертеж). В смесях других растворителей подобного явления не наблюдается. С изменением соотношения ацетона и ксилола волнообразно изменяется способность смеси десорбировать ядохимикаты из тонкого слоя (явление волнообразного синергизма). При достижении объемного соотношения ацетона и ксилола 1:6 смесь извлекает 100@> пестицидов. При увеличении количества в смеси ксилола свыше отнон1ения 1:10 извлекающая способность системы растворителей начинает уменьшаться и при

100о-м содержании ксилола происходит десорбция лишь 92Я ядохимикатов.

Таким образом, предлагаемый способ, применяемый в пределах граничных соотношений компонентов, позволяет сократить время анализа, повысить надежность и точность определения хлороргапическнх пестицидов.

Способ определения хлорорганических пестицидов в продуктах пчеловодства, предусматривающий экстракцию продукта органическим растворителем, тонкослойную хроматографическую очистку экстракта с десорбцией пестицидов смесью органических растворителей, газогроматографическое разделение и детектирование анализируемых компонентов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения процесса, экстракцию осуществляют при 80 — 95 С, при этом в качестве органических растворителей при экстракции используют смесь диметилсульфоксида и насыщенного водного раствора соли с растворимостью 20 — 50 на

100 r воды в соотношении 1,3:1 — 1:1,3, а при десорбции пестицидов — смесь ацетона и ксилола в соотношении 1:6 — 1:10.