Способ получения элимоклавина

 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения элимоклавина. Цель изобретения - упрощение способа и повышение выхода целевого продукта. Фильтрат культуральной жидкости Claviceps.sp. пропускают через колонку с анионитом ЭДЭ-10П в Cl^- и через колонку с катионитом КРС-2П в H⁺ колонки промывают. Элимоклавин с колонки КРС-2П этанолом с 1,5% концентрированного раствора аммиака. Из элюатов после промывки и высушивания осадка получают кристаллический элимоклавин.

Изобретение относится к медицинской промышленности, а именно к способам получения элимоклавина алкалоида спориньи, действующего на центральную нервную систему, мускулатуру матки, являющегося ингибитором пролактина. Целью изобретения является упрощение способа и повышение выхода целевого продукта за счет проведения хроматографии фильтрата культуральной жидкости штамма-продуцента последовательно через колонки с анионитом и сильнокислым пористым катионитом и элюции с катионита смесью этанола с аммиаком. Способ осуществляется следующим образом. Фильтрат культуральной жидкости штамма-продуцента Claviceps sp. пропускают через колонки с анионитом и сильнокислым пористым катионитом, элимоклавин элюируют с катионита смесью этанола и ам- миака в соотношении 14:1-12.5: 1, затем элюаты охлаждают, выдерживают 4 ч, а осадок отфильтровывают в вакууме, промывают, фильтруют, сушат. Изобретение иллюстрируется следующими примерами. П р и м е р 1. 4,0 л фильтрата культуральной жидкости Claviceps sp; ИБФМ-F-401, содержащего 0,9 г/л смеси клавиновых алкалоидов, пропускают со скоростью 100 мл/ч˙см² через колонку (3,5 х 38 см) с 400 г анионита ЭДЭ-10П в Сl^--форме и через колонку (1,8 х 20 см) с 20 г катионита КРС-2П в li⁺-форме. Затем колонки промывают 500 мл дистиллированной воды. Элимоклавин элюирюут с колонки КРС-2П со скоростью 10 мл/ч˙см² этанолом с 1,5% концентрированного раствора аммиака (т.е. соотношение этанол:аммиак составляет 14: 1). Из элюатов после промывки и высушивания осадка получают 80 мг кристаллического препарата элимоклавина с содержанием основного вещества 97,0% При дополнительном упаривании маточного раствора получают еще 10 мл препарата. Общий выход готового продукта от содержания смеси алкалоидов в фильтрате культуральной жидкости составляет 70,3% (2,6г), готовый препарат содержит не менее 95% основного вещества. Общий выход готового продукта по способу-прототипу лишь 45,2% Кроме того, предлагаемый способ проще способа-прототипа, поскольку не включает стадии экстракции токсичными органическими растворителями. П р и м е р 2. 2,5 л фильтрата культуральной жидкости Claviceps sp. ИБФМ-F-401, содержащего 0,8 г/л суммы клавиновых алкалоидов, пропускают через колонку с 300 г анионита ЭДЭ-10П в Cl^--форме и через колонку с 20 г катионита КРС-2П в Н⁺-форме со скоростью 33 мл/ч˙см². Затем колонки промывают 500 мл дистиллированной воды. Элимоклавин элюируют с колонки КРС-2П этанолом с 2,5% концентрированного раствора аммиака (т.е. соотношение этанол:аммиак 12,5: 1). Из элюатов после промывки и высушивания осадка получают 1,1 г светло-желтого кристаллического порошка с содержанием элимоклавина 97% (по данным тонкослойной хроматографии и ЯМР-спектроскопии). Из маточного раствора дополнительно выделяют после концентрирования и перекристаллизации осадка (аналогично примеру 1) 0,31 г элимоклавина. Общий выход готового продукта 70,5% (от содержания смеси алкалоидов в фильтрате культуральной жидкости), а в способе-прототипе 45,2% Предлагаемый способ не требует применения токсичных органических растворителей, т.е. он проще способа-прототипа.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭЛИМОКЛАВИНА путем выделения целевого продукта из фильтрата культуральной жидкости штамма-продуцента Claviceps sp. кристаллизации, охлаждения и высушивания, отличающийся тем, что с целью упрощения способа и повышения выхода целевого продукта, фильтрат культуральной жидкости пропускают через колонки с анионитом с сильнокислым пористым катионитом, а элюцию с катионита осуществляют смесью этанола с аммиаком в соотношении 14 1 12,5 1.