Способ диагностики активного воспалительного процесса при урологических заболеваниях

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (50 4 G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3922102/28-14 (22) 26.-07.85 ,(46) 15.12.87. Бюл. Х 46 (71). Научно-исследовательский институт урологии (72) И.И. Дзержинская и А.Ф.,Даренков (53) 616.07(088.8) (56) Лопаткин Н.А., Дзержинская И.И.

Ранние и поздние Е-розеткообразующие нейтрофилы и лимфоциты при остром и хроническом пиелонефрите. Иммунология, 1984, Р 1, с. 68-71.

„.SU 135 4 (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АКТИВНОГО

ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА ПРИ УРОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ путем выявления функциональной активности лейкоцитов, отличающийся тем, что, с целью выявления воспалительного процесса .на доклинической стадии, проводят определение фагоцитарной активности ранних нейтрофилов и при увеличении ее в 2-5 раз в сравнении с нормою определяют активный воспалительный процеСс на доклинической стадии.

13597

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической иммунологии для экспресс-диагностики выявления активного воспалитель5 ного процесса.

Целью изобретения является выявление воспалительного процесса на доклинической стадии за счет определения фагоцитарной активности ранних нейтро-)0 филов.

Способ осуществляется следующим образом.

У больного берут кровь, выделяют субпопуляцию ранних нейтрофилов, при этом разделение клеток крови производят наслаиванием цельной крови на двойной градиент фиколл-уротраста с плотностью 1,072-1,077 г/мл и

1,092-1,099 г/мл, центрифугированием о взвеси клеток при 0-4 С со скоростью

1000-1500 об. /мин в течение 10-) 5 мин.

Получают две чистые популяции клеток: лимфоцитарную и нейтрофильную. Соеди6 няют О, 1 мл (3 ° 10 в 1 мл) нейтрофи- 25 лов с О, 1 мл 1 млрд. взвеси бакч ерий (штамп ер)п золотистого стафилококка).

Смесь инкубируют в холодильнике при о

0-4 С. в течение 15-20 мин, дополнительно перемешивают через 7-10 мин.

Делают мазки на стекле, суш т,, фиксируют метанолом 3-5 мин, красят. азур— эозином 3-5 мип.

В мазках просчитывают 50-100 нейтрофилов, вычисляя из них процент клеток с захваченными микробами (7. фагоцитоза), фагоцитарный индекс (ФИ)— среднее число фагоцитированных бакте1 рий на клетку, абсолютное число фагоцитирующих нейтрофилов в 1 мкл, абсолютный фагоцитарный показатель (АФП) †абсолютное число поглощенных бактерий в 1 мкл.

Определяют содержание лейкоцитов в 1 мкм (1 ), а также подсчитывают процентное содержание нейтрофилов () и ранних E-РОН (a) среди всех лейкоцитов в мазке крови. Зная процентное содержание, вычисляют их абсолютное содержание в 1 мкл крови (N и М) 46 2

Абсолютное содержание фагоцитируюших нейтрофилов (Р) вычисляют по формуле б ° М

Г

У

100 где б — процент фагоцитирующих нейтрофилов в препарате;

М вЂ” абсолютное количество ранних Е-РОН {в 1 мкл периферической крови).

Зная количество поглощенных бактерий (б) всеми клетками (а), вычисляб ют ФИ = ---. АФП = ФИ ° P

Смесь А содержит фиколл 11,2 г; уротраст 60% 20 мл; дистиллированную воду 100 мл. Плотность раствора

1,092-1,099 г/мл.

Смесь В содержит фиколл 7,2 г; уротраст 607. 20 мл; дистиллированную воду 100 мл. Плотность раствора

1,072-1,077 г/мл. Аналоги: урографин, верографин.

Пример 1. Содержание лейкоцитов в 1 мкл крови 5150, процентное содержание нейтрофилов в формуле крови 56. Подставив в формулу цифровые значения, получают

)! = 00 = 2884 в ) мкл.

5150 56

В иммерсионной системе микроскопа в 6-7 разных полях препарата-1 получено 307. ранних (активных) розеткообразующих нейтрофилов, подставив в формулу цифровыа значения, получают

2884 30

М= — — — — -- = 865 2в 1 мкл.

В иммерсионной системе микроскопа: в препарате-2 получено 477 фагоцитирующих нейтрофилов. Подставив в формулу цифровые значения, получают

47 865 2

= 406,6 в 1 мкл.

Количество поглощенных бактерий 207, следовательно

207

ФИ = -- †-- = 4 5.

46! 1 N a

N — ---- " M

100 100

Подсчитывают процент фагоцитирующих клеток на 50-100 нейтрофилов в препарате, т.е. относительное содержание фагоцитирующих клеток (6).

АФП = 4,5 406,6 = 1829,7 в ) мкл.

В примере l определяли содержание ранних Е-розеткообразующих нейтрофилов (Е-РОНР) и показатели, характеризующие фагоцитарную активность данной субпопуляции клеток у практически здорового человека.

46 4 з 13597

Пример 2. Больная С. 47 лет.

Поступила с жалобами на наличие свища в левой поясничной области, тупые боли, температура тела 39,8 С с озноб бом.

По данным экскреторной урографии функция почек сохранена. По данным радиоизотопной ренографии снижение очистительной способности почек спра- !ð ва на 42%, слева на 64%.

Иммунологические исследования . содержание ранних Е-РОН 5840 в 1 мкл; фагоцитирующих ранних Е-РОН 5787,4 в 1 мкл (99,1%); ФИ !1,5; АФП 66555,1 в 1 мкл. Произведено иссечение свища и назначена антибактериальная и стимулирующая терапия.

У больной диагностирована атака пиелонефрита справа. 20

Иммунологические исследования: содержание ранних Е-POH 1824,5 в мкл (45%); фагоцитирующих ранних

Е-РОН 939,6 в 1 мкл (51,5%); ФИ 6,3;

АФП 5919,5 в,l мкл. 25

Таким образом, иммунологические показатели свидетельствовали об остром воспалительном процессе, иссечение свища и назначение мощной антибактериальной и стимулирующей терапии Зр сопровождалось положительной динамикой: уменьшением фагоцитирующих ранних F.-POH в 6 раз; ФИ с 11,5 до 6,3;

АФП с 66555,1 в 1 мкл до 5919,5 в 1 мкл.

В последующем показатели все нор35 мализовались и больная в удовлетворительном состоянии выписана домой.

Пример 3. Больная К., 41 год, Поступила с жалобами на тупые боли по 40 ходу левого мочеточника, иррадиация в левый пах. Симптом Пастернадского отрицательный с обеих сторон.

На уретропиелограмме определяется

R-ген негативный камень левой почки.

Болеет с 1980 r. Анализы крови в нор45 ме. Анализ мочи: белок О, 165; лейкоциты 10-15 в поле зрения; соли мочевой кислоты в большом количестве.

Анализ мочи по Нечипоренко: лейкоциты 750; эритроциты отсутствуют.

У больной острый левосторонний пиелонефрит. Произведена экстренная пиелолитотомия, нефростомия, интубация мочеточника. Камень удален пиело- 55 томическим и нефротомическим разрезом.

Кровотечение во время операции умеренное. Операция средней травматичности.

Иммунологические исследования:

Е-POHP 1320 в 1 мкл (50%); содержание фагоцитирующих E-РОН 620,6 в

1 мкл (47%); @И 4,1; АФП 2543,6 в

1 мкл, лейкоциты 4000 в 1 мкл, палочкоядерные нейтрофплы 40 в 1 мкл (1%); сегментоядерные нейтрофилы 2640 в

1 мкл (65%); лимфоциты 1040 в l.мкл (26%); моноциты 320 в 1 мкл (8%)

Состояние больной удовлетворительное. Жалоб нет. Повязка сухая, нефростома функционирует хорошо. Температура тела 36,8-36,7 С.

Иммунологические исследования:

Е-POHP 3916 в 1 мкл (80%); содержание фагоцитирующих ранних Е-POH

1280,5 в 1 мкл (32,7%); ФИ 5,69

АФП 7170,8 в 1 мкл; лейкоциты 6800 в 1 мкл; сегментоядерные нейтрофилы

4895 в 1 мкл (72%); лимфоциты 1020 в

1 мкл (15%); моноциты 884 в 1 мкл (13%).

Иммунологические исследования:

F.-РОНР 2920,3 в 1 мкл (95%); фагоцитирующих ранних Е-РОН 2777,2 в lмкл (95,1%); ФИ 9,6; АФП 26661,1 в 1 мкл; лейкоциты 5300 в мкл, палочкоядерные нейтрофилы 10б в 1 мкл (2%); сегментоядерные нейтрофилы 3074 в l мкл (56%); лимфоциты 1590 в 1 мкл (30%); моноциты 583 в 1 мкл (11%).

Состояние больной расценено как атака пиелонефрита в оперированной почке. 20.11 отошли 2 мелких конкремента (0,1 0,2 и 0,2. . 0,2).

Атака пиелонефрита купирована .

Состояние больной удовлетворительное.

Температура тела нормализовалась.

Катетер функционирует хорошо. Симптом Пастернацкого отрицательный с обеих сторон. Анализ крови в пределах нормы.

Иммунологические исследования: содержание Е-РОНР 714 в 1 мкл (25%); фагоцитируюших Е-POH 3!3,4 ь 1 мкл;

43,9 в 1 мкл, ФИ 4,7; АФП 1472,9 в

1 мкл; лейкоциты 4200 в 1 мкл; сегментоядерные нейтрофилы 2856 в

1 мкл (68%); лимфоциты 1050 в 1 мкл (25%); моноциты 210 в 1 мкл (5%) °

Больная выписана на амбулаторное долечивание.

Таким образом, за 10 дней до клинических проявлений атаки пиелонефрита оперированной почки уменьшается процентное содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН, АФП повышается в 3 ра-.: за. На высоте воспаления процент фаБ

13597 гоцитирующих ранних Е-РОН увеличивается с 32,77. до 95%; ФИ с 5,6 до 9,6;

АФП с 7170,8 в !мкл до 26,661 в I мкл.

В результате интенсивной фагоцитарной аКтивности атака пиелонефрита

26.11 купирована. Уменьшение процента фагоцитирующих ранних Е-POH до клинических проявлений, по-видимому, обусловлено блокадой рецепторов или 1О гибелью этого пула клеток.

Пример 4. Больной С,, 53 лет, госпитализирован в урологическую больницу.

Иммунологические показатели:

Е-POHP 2010,6 в 1 мкл (477) количество фагоцитирующих ранних Е-POH

282„4 в i мкл (147); фагоцитарный индекс (ФИ) 3,1; абсолютный фагоцитар- 20 ный показатель 872,3 в 1 мкл.

Лейкоциты 6200 в 1 мкл,, палочкоядерные нейтрофилы 124 в 1 мкл (27); сегментоядерные нейтрофилы 4030 в

1 мкл (65%); эозинофилы 124 в мкл (27.); лимфоциты 1674 в 1 мкл (277.); мопоциты 248 в 1 мкл (4%).

Болен в течение 2 лет. Получал лечение по поводу хронического проста тита с положительным эффектом. Жалобы 30 на боли по ходу правой паховой складки, учащенное почеиспускание вялой струей, жжения, снижение потенции.

Болезненность при пальпации правой подвздошной области. Правый придаток болезненный при палъпации. Простата склерозироваНная, плотная, туго эластичной консистенции. Функция почек своевременная с обеих сторон. Чашечнолоханочная система не расширена. На 40 нисходящей цистограмме контуры мочевого пузыря ровные, дефектов накопления не определяется. Радиоизотопная ренография. Снижение секреторной функции слева на 197. Справа дефицита нет.45

Эвакуация препарата удовлетворительная.

Анализы крови и мочи без особенностей.

Диагноз: у больного аденома простаты I сcтTеeп еe ни, остаточные явления хронического простатита. 50

Таким образом, у больного содержание ранних Е-POH в периферической крови увеличено в 2 раза, однако, относительное и абсолютное содержание фагоцитирующих Е-POH и АФП на 507. ниже, чем в норме. Фи также достоверно ниже. Снижение этих показателей является результатом хронического воспалительного процесса с относительным

46 8 эффектом в лечении. Больному назначено консервативное лечение.

Пример 5. Больной С., 84 года. Поступил в урологическую клинику.

Жалобы на учащенное мочеиспускание, жажду, сухость во рту. Симптом Пастернацкого слева и справа отрицательный. Простата увеличена в 2,5 раза с четкими контурами, безболезненна, бороздка не выражена.

Урограмма. На обзорном снимке теней конкрементов нет. Функция почки удовлетворительная, нарушения пассажа мочи и деформации чашечнолоханочной системы нет. Анализы крови и мочи без особенностей.

Для восстановления нормального пассажа по нижним мочевым путям пока" зано оперативное лечение — аденомэктомия. Диагноз: аденома простаты, хронический пиелонефрит.

Иммунологические исследования: лейкоциты 5700 в 1. мкл, палочкоядерные нейтрофилы 171 в 1 мкл (37.); сегментоядерные нейтрофилы 3135 в I мкл (557.); эозинофилы 285 в 1 мкл (57.); лимфоциты 1083 в 1 мкл (19%); монопиты 456 в I мкл (BX); Е-POHP 969 в 1 мкл (17X); содержание фагоцитирующих Е-РОН. 416,6 в I мкл (437o);ó

ФИ 4,1; АФП !708,0 в l мкл.

Одноэтапная аденомэктомия . Состояние больного соответствует тяжести перенесенной операции.

9.07.84. Иммунологические исследования. Е-POHP 4857,1 в 1 мкл (83X); количество фагоцитирующих ранних

Е-POH 1262,8 в 1 мкл (26%); ФИ 2,0;

АФП 2525,6 в 1 мкл.

По клиническим данным у больного острый правосторонний эпидидимит, о температура тела 38 C.

Иммунологические исследования:

E-POHP 5179 в 1 мкл (547.); количество фагоцитируюгп х Е-POHP — 517,9 в

1 мкл (10X); ФИ 2,8; АФП 1450,8 в

1 мкл.

Лейкоциты 10900 в 1 мкл, палочкоядерные нейтрофилы 6546 в 1 мкл (6X) сегментоядерные нейтрофилы 8829 в

1 мкл (81X) эозинофилы 109 в 1 мкл (1X); лимфоциты 1199 в 1 мкл (117); моноциты 109 в 1 мкл (IX).

Рекомендована стимулирующая тера-. пия. У больного состояние по клиническим и лабораторным данным с тенденцией к улучшению. Однако, рана

4 3 2 в области машонки с некроти9746

Составитель Н. Хрусталева

Редактор Т. Парфенова Техред JI.Cåðäþêîâà Корректор А.Обручар

Заказ 6!51/48

Тираж 776 Подписное

BHHKIH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полит рафическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4

7 135 ческим дном. Рана 4 3 2 вяло гранулирует. Проведен курс стимулирующей

1 терапии декарисом.

Иммунологические исследования:

К-РОНР 4783,2 в 1 мкл (732); содержание фагоцитирующих ранних Е-POH

2965,5 в 1 мкл (62 ); ФИ 4,3; АФП

12757,6 в 1 мкл.

Лейкоциты 9100 в 1 мкл, палочкоядерные нейтрофилы 546 в 1 мкл (б ); сегментоядерные нейтрофилы 6006 в

1 мкл (66 ); эозинофилы 819 в 1 мкл (9 .); лимфоциты 1274 в 1 мкл (14 ); моноциты 546 в 1 мкл б .

Состояние удовлетворительное, свищ закрывается, рана активно гранулирует 2 0,8 1,5.

Иммунологические исследования:

Е-POHP 1560 в 1 мкл (13 ) содержа-. ние фагоцитирующих ранних Е-РОН

639,6 в 1 мкл (41 ); ФИ 4,3; АФП

2750,2 в 1 мкл.

Лейкоциты 12000 в 1 мкл; палочкоядерные нейтрофилы 120 в l мкл (l ); сегментоядерные нейтрофилы 6600 в

1 мкл (55 ); эозинофилы 360 в 1 мкл (З ); лимфоциты 3600 в 1 мкл (30 ); моноциты 1320 в 1 мкл (11 ).

Свищ над лоном закрылся, рана в маионке зажила. Больной выписан домой.

Таким образом у больного в результате осложнения — острого правостороннего эпидидимита потребовавп*его гемикострации и длительно незаживающей раны (несмотря на высокое содержание ранних Е-РОН) имело место подавление их абсолютного и относительного числа фагоцитирующих клеток и

10 ФИ, что потребовало проведения курса стимулирующей терапии. В результате лечения увеличилось абсолютное и относительное содержание фагоцитирующих ранних Е-РОН в 5,5 раза и ФИ

15 2 раза, АФП увеличилось в 8 раз.

В результате активного фагоцитоза рана стала интенсивно гранулировать, нормализовались клинические и иммунологические показатели и больной в

20 удовлетворительном состоянии выписан домой.

Нормализация формулы крови, данные бактериологических исследований и положительная клиническая динамика не всегда являются абсолютными критериями излечения. Содержание показателей, характеризующих функцию ранних Е-РОН в периферической крови

3Q больного, указывает на неполное излечение, что подтверждалось обострением воспалительного процесса.