Способ определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители

 

Изобретение относится к медицине , точнее к аллергологии, предназначено для определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители. Цель изобретения - повьппение точности определения путем измерения интенсивности люминесценции лимфоцитов под влиянием мембранного зонда 3-метоксибензантрона после инкубации лимфоцитов с растворами ацетилхолина (АХ), гистаьшна (ГА) и физраствора (ФР). Сопоставляют число лимфоцитов , имеющих интенсивность люминесценции 0,50-1,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов в ФР, в пробах, «нкубированных с АХ, ГА и ФР, и при увеличении числа лимфо1Ц1тов в пробах с АХ и ГА по сравнению с ФР на 10% и более диагностируют повышенную чувствительность больного к АХ или ГА. 1 табл. с « (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (191 S U (11I

80732 А1 (51) 4 А 61 В 10/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4056723/28-14 (22) 15,04.86 (46) 15.03.88. Бюл. !(!1 10 (71) Детская городская больница 11 1 г. Ленинграда (72) И.М. Воронцов, М.А. Кириллов, Е.С. Нишева и Ю.М. Розанов (53) 6 16-07:6 16-056.3(088.8) (56) Weigens Н.Д. et al Clinical

allergy, 1982, 12, 6, р. 577-586, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕАКЦИИ

БОЛЬНОГО АЛЛЕРГИЧЕСКИМ ЗАБОЛЕВАНИЕМ

НА НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ РАЗДРАЖИТЕЛИ (») Изобретение относится к медицине, точнее к аллергологии, предназначено для определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители.

Цель изобретения — повьппение точности определения путем измерения интенсивности люминесценции лимфоцитов под влиянием мембранного зонда

3-метоксибензантрона после инкубации лимфоцитов с растворами ацетилхолина (АХ), гистамина (ГА) и физраствора (ФР). Сопоставляют число лимфоцитов, имеющих интенсивность люминесценции 0 50-1,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов в ФР, в пробах, инкубированных с АХ, ГА и ФР, и при увеличении числа лимфоцитов в пробах с АХ и ГА по сравнению с ФР на 1ОХ и более диагностиру® ют повьппенную чувствительность больного к АХ или ГА. 1 табл.

1380732 телям.

Количество обследованных

Подтверждение реакции на неспецифический раздражитель

Больные аллергиБольные аллергическими задоровые ети болеваниями,в анамнезе коточескими заболеварых есть указания на обострение при заболеваниях при действии неспецифических раздражителей ниями, от рицающие реакции н неспецифи ческие раздражители

48

Известный способ

32 (66,7Z)

23 (47,9/) 0

6 (237) 0

Способ-прототип

Предлагаемый способ

46 (95,87) 0

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии.

Цель изобретения — повышение точности определения.

Способ осуществляют следующим образом.

Утром натощак у больного из вены отбирают 3 мл крови в гепаринизиронанную пробирку. Из крови вьделя- 1р ют пимфоциты на градиенте плотности фиколл-верографин 1,077. Лимфоциты промывают 2 раза физраствором и

2 раза раствором Хенкса путем центрифугирования при 1500 об/мип в те- 15 чение 15 мин. После последнего центрифугирования лимфоциты разбавляют средой 199 до концентрации 1 10 кле6 ток в 1 мл. По 0,2 мл взвеси лимфоцитов разносят в три центрифужные 20 пробирки. В первую пробирку добавляют 0,05 мл физраствора (ФР), во вторую пробирку — 0,05 мл 0,0017.-ного раствора ацетилхолина (АХ) на физрастворе, в третью пробирку 25

0,05 мл 0,00017-ного раствора гистамина (ГА) на физрастворе. Инкубируют все три пробирки в термостате при 37 С в течение 30 мин. После окончания срока инкубации добавляют 30 во все пробирки по 2 мкл 1 М раствора -метоксибензантрона и измеряют интенсивность свечения лимфоцитов во все.х пробах с помощью проточного цитофлуориметра. Возбуждение люминесценции проводят лучами с Р = 400460 нм, регистрируют люминесценцию

»е менее 10000 клеток в области спектра 490-650 нм. Подсчитывают среднеарифметическую интенсивность люминесценции лимфоцитов в пробе, инкубированной с ФР. В пробах, инкубированных с ФР, АХ и ГА, считают количество лимфоцитов, имеющих интенсивность люминесценции 0,501,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов, инкубированных с ФР„, При увеличении числа лимфоцитов с такой интенсивностью свечения в пробах с АХ и(или ГА по сравнению с пробой с ФР на 10Х и более диагностируют повышенную чувствительность больного к неспецифическим раздражиСравнительная точность определения реакции больных аллергическими заболеваниями на неспецифические раздражители с помощью известных и предлагаемого способов представлена в таблице.

1380732

Составитель М.Позняк

Техред И.Попович

Корректор М Демчик

Редактор А.Огар

Заказ 1133/Ь

Тираж 655 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Из таблицы видно, что точность определения реакции больных аллергическими заболеваниями на неспецифические раздражители предлагаемым способом повышается в 1,5-2 раза по сравнению с известными способами.

Формула изобретения

1О

Способ определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифическне раздражители путем выделения из крови форменного элемента, инкубации его в отдельных пробах физиологическим раствором и веществами, влияющими на функции форменного элемента., с последующим введением в пробы люминесцентного красителя и определения интенсивности люминесценции, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повыщения точности определения, в качестве форменного элемента используют лимфоциты, инкубируют их в пробах с ацетилхолином (АХ) и гистамином (ГЛ), в качестве люминесцентного красителя используют З-метоксибензантрон, определяют число лимфоцнтов с интенсивностью люминесценции 0,5-1,9 от средней интенсивности люминесценции в пробе с физраствором и при увеличении числа лимфоцитов в пробах с

AX или ГА по сравнению с контролем на 107 и более диагностируют реакцию больного на неспецифические раздражители,