Питательная среда для выделения бактероидов

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии. Цель изобретения повышение чувствительности среды. Питательная среда включает следуквдие ингредиенты, г/л: питательный бульон 20,9-22,1; глюкоза 0,475-1,275; эритрит 0,0057-0,017; тиаьп1н-бромид 0,0019-0,0085; магний серно-кисльй 0,285-0,765; калий хлористый 0,038- 0,34 аммоний хлористый 0,665-1,275, агар-агар 9,5-11,475; гентамицин 0,0001-0,00015; лизированная кровь 50- 150; вода дистиллированная до 1л. Првьппекие чувствительности среды достигается подбором питательной основы и дополнительным введением в ее состав стимуляторов роста бактероидов и ее селективности. Среда может быть приготовлена в сухом виде. 1 табл. с € (Л

СОЮЗ СОНЕтСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU„„4 93

Г

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСтЕЕННЫЙ КОМИтат CCCP

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTN4 (21) 4258262/28-1 3 (22) 08.06.87 (46} 30.11.88. Бюл. 1» 44 (71) Научно-исследовательский институт по производству питательных сред и Институт хирургии им. Н.В.Вишневского (72) Г.P . Гаджиева, Н.А. Аб асов а и О.К.Борисова (53) 576.8.093.1 (088,8) (56) 3 абораторное дело, 1982, Ф 9, с. 51-54. (54) ПКТАГЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЬЩЕЛЕНИЯ

БАКТЕР ОИДОВ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии. Цель изобретения 511 4 C 12 N I/20 С 12 q 1/04 повышение чувствительности среды.

Питательная среда включает следуюшие ингредиенты, г/л: питательный бульон

20,9-22,1; глюкоза 0,475-1,275, эритрит 0,0057-0,017., тиамин-бромид

0,0019-0,0085; магний серно-кислый

0,285-0,765; калий хлористый 0,0380,34, аммоний хлористый 0,665-1,275; агар-агар 9,5-11,475; гентамицин

0,0001-0,00015; лизированная кровь 50150; вода дистиллированная до 1 л.

Повышение чувствительности среды достигается подбором питательной основы и дополнительным введением в ее состав стимуляторов роста бактероидов и ее селектнвности. Среда может быть приготовлена в сухом виде. 1 табл.

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при бактериологической диагностике заболеваний, вызванных б акт ер оидами.

Цель изобретения — повышение чувствительности среды.

Пример I. Для приготовления среды минимального состава в колбу 10 с 950 мл дистиллированной воды вносят, r: питательный бульон 20,9, глюкозу

0,475, эритрит 0,0057, тиамин-бромид

0,0019, магний серно-кислый 0,285, калий хлористый 0,038, аммоний хло- 15 ристый 0,665, агар-агар 9.5. Все тщательно перемешивают и на огне, не допускания подгорания, доводят до кипения, кипятят 1-2 мин. Среду разливао ют во фчаконы, стерилизуют при 120 С 20 в течение 15 мин. рН готовой среды должен быть в пределах 7,0 -0,2;

Перед употреблением среду регенерируют на кипящей водяной бане 10 мин. Затем в охлажденную до 45-50 С 25 среду добавляют 50 г лизированной крови и 0,0001 r гентамицина, взбалтыьают и разливают в чашки Петри.

После застывания агарового студня производят посев исследуемого мате- 30

1 риала.

Пример 2. Для приготовления среды оптимального состава в колбу с 900 мп дистиллированной воды вносят, r: питательный бульон 21,6, глюкоза 0,9, эритрит 0,011, тиаминбромид 0,0045, магний серно-кислый

0,54, калий хлористый 0,081, аммоний хпористый 1,125, агар-агар 10,8. Все тщательно перемешивают и на огне, не 40 допуская пригорания, доводят до кипения, кипятят 1-2 мин. Среду разливают во флаконы, стерилизуют при

120 С в течение 15 мин. рН готовой среды должен быть в пределах 7,0+0,2. 45

Перед употреблением среду регенерируют на кипящей водяной бане 10 мин.

Затем в охлажденную до 45-50 С среду добавляют 100 г лизированной крови и

0,0001 r гентамицина, взбалтывают 50 и разливают в чашки Петри. После застывания агарового студня производят посев исследуемого материала.

Пример 3. Для приготовления среды максимального состава в колбу с 850 мл дистиллированной воды вносят, г: питательный бульон 22,1, глюкоза 1.275, эритрит 0,017, тиаминбромид 0,0085, магний серно-кислый

0,765, калий хлористый 0,34, аммоний хлористый 1,275, агар -агар 11,475.

Все тщательно перемешивают и на огне, не допуская пригорания, доводят до кипения, кипятят 1-2 мин. Среду разливают во флаконы, стерилизуют при о

120 С в течение 15 мин. рН готовой среды должен быть в пределах 7,0 ;0,2.

Перед употреблением среду регенерируют на кипящей водяной бане 10 мин.

Затем в охлажденную до 45-50 С среду добавляют 150 г лизированной крови и

0,00015 г гентамицина, взбалтывают и разливают в чашки Петри. После застывания агарового студня производят посев исследуемого материала.

Посев исследуемого материала на среду в чашки Петри производят петлей или шпателем, равномерно раслреде ляя его по всей поверхности среды. о

Посевы инкубируют при 37 С в течение

48-72 ч в условиях анаэростата, заполненного трехкомпонентной газовой смесью путем трехкратного вакуум— заместительного промывания.

Результаты испытаний питательной среды в экспериментах с чистыми куЛьтур ами р аз личных видов б актер оидов показывают высокую чувствительность среды по сравнению с контрльными (см. таблицу)

Скорость роста на опытной и контрольной средах варьирует от 48 ч инкубации — для быстрорастущих культур, до 72 ч — для культур наиболее требовательных по своим питательным потребностям.

Из данных таблицы видно, что чувствительность предлагаемой среды находится на уровне среды Шедлера фирма

"Libco" но значительно выше среды

Петракова..

Формула изобретения

Питательная среда для выделения б актера идо в, содержащая пит ат ел ьную основу, источник углерода, стимулятор роста, агар-агар, лизированную кровь и дистиллированную воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения чувствительности среды, она дополнительно содержит маг" ний серно-кислый, калий хлористый, аммоний zëoðèñòûé, гентамицин, в качестве питательной основы она содер1440918

0,285-0,765

10,038-0,34

0,665-1,275

0,0001-0,00015

50,0-150,0

9,5-11,475

20,9-?2,1

0,0057-1,275

0,0057-0,017

0,0019-0,0085

Индиви- Питатель Скорость

Разведение культур

Штамм ные среды дуальное обозна10 10 10 ч чение

В. fragilis

139 16 2 48

89 7 48

202 43 3 48

323

В. очаЪпа

84&3

Fusobacterium necroyhorum 2523

204

173

9337

332

В. mo1aninogenicns

340

40/74

Propionibacfercumacnes

1О

Pepfîастерtococcus

19/74

В. thetaiofamicron

10582

150

155

48

П р и и е ч а н и. е. Э вЂ” экспериментальная (предлагаемая)среда; К вЂ” контроль" ная (Шедлер агар фирмы Libco).

Составитель A,Çàâàäñêaÿ

Редактор M. Недолуженко Техред М.Дидык

Корректор И.Муска

Заказ 6141/28

Тираж 520

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул.- Проектная, 4 жит питательный бульон, в качестве источника углерода — глюкозу,,в качестве стимулятора роста — эритрит и тиомин-бромид при следуюшем коли- . чественном соотношении компонентов, г/л:

Пит ат ельный бульон

Глюкоз а

Зритрит

Тиамин-бромид

Магний сернокислый

Калий хлорнстый

Аммоний хлористый

Гент амицин

Лизиро в анн ая кровь

Агар-агар

Вода дистиллированная

5 48

1 48

48

7 72 б 72

48

48

48

48

1 48