Штамм бактерий viвriо nag 67 серовара, используемый для приготовления моноварной диагностической сыворотки

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для серологической идентификации патогенных вибрионов. Штамм Vibrio Nag 67 серовара депонирован под номером КМ-16 (316/771). Агглютинируется диагностическими холерными сьшоротками О, НО, Огава и Инаба, не лизируется фагами Эльтор, ХДФ 3,4,5, ТЭПВ 2-7fC. При иммунизации кроликов по схеме получают сыворотку с титром 1:25600. Использование сьторотки расширяет число дифференцируемых патогенных вибрионов.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (I9I (III

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А STOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ(1 (46) 07.06.90. Бюл. М 21 (21) 4185229/28-13 (22) 20.01.87 (71) Всесоюзный научно-исследовательский противочумный институт

"Микроб" (72) Е.С.Казакова, И.И. Щуркина и А.К,Адамов (53) 576.8.097 (08e.e) (51)5 лС 12 N 1/20, А 61 К 39/40// (С 12 N 1/20, С 12 R I:63) (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ VIBRIO NAG 67

СЕРОВАРА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ NOHOBAPHOA ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ

СЫВОРОТКИ (57) Изобретение относится к меди" цинской микробиологии и может быть использовано для серологической идентификации патогенных вибрионов. Штамм

Vibrio Nag 67 серовара депонирован под номером КМ-16 (316/771) . Агглютинируется диагностическими холерными сыворотками О, RO, Огава и Инаба, не лизируется фагами Эльтор, ХДФ 3,4,5,"

ТЗПВ 2-7 С. При иммунизации кроликов по схеме получают сыворотку с титром 1:25600, Использование сыворот- I ки расширяет число дифференцируемых патогенных вибрионов.

1419151

Тираж 503

ВНИИПИ Заказ 2029

Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицинс" кой микробиологии, а именно к серологической идентификации патогенных вибрионов. 5

Штамм Vibrio Nag 67 серовара депонирован в коллекции микроорганизмов Института "Микроб" под номером

НМ-1 6 (31 6/771j и характеризуется следующими свойствами. 1Р

Морфологические признаки, Подвижные, слегка изогнутые палочки„ спор и капсул не образуют, грам-1; отрицательные.

Культуральные признаки, На плотном агаре образует гладкие, окру;лыс, :po .ða÷íh|a, плоско-выпуклые с ровным краем колонии диаметром

2-2,5 м; . В жидких средах вызывает помутнение, образует гленку. 20

Физиологические свойства.

Ок идазоположительный, относится к гр .ше Хейберга, ферментирует глюкозу и ма нит до кислоты беэ rasa, не ферментирует инозит и салицин, образует индол и сероводород. Имеет декарбокснлазу лизина и орнитина и не имеет лигндролазы аргинина, не растет в 17.-чой пептонной воде с добавлением

7 и 10Х хлорида натрия. Штамм КМ-16 (316/771j агглютинируется диагностическими холерными сыворотками О, R0

Огава, Инаба в разведении 1:100, не агглютинируется диагностически,ми сыворотками против вибрионов 2-66 сероваров. Не лизпруется фагами .Эльтор. ХДФ 3,4,5,ТЭПВ-2,7,С, гиэируется фагом ТЭПВ-1 в разведении 10

Обладает специфическим О-антигеном, При иммунизации животных О-антигеном 40 данного штамма образуются специфические аrглютинины.

Для приготовления моноварной сыво" ротки используют О-антиген штамма

Viorio Nag КМ-16 67 серовара.

Куль туру штамма Vibrio Nag КМ- I 6 высевают в ll-ную пептонную воду (рН 7,6) и выращивают при 37 С в течение 4 ч, затем пересевают на свеже-. скошенный агар, содержащий настой сердечно". мьппцы (рН 7,6). Посевы инкубивуют при 37 С в течение 18-20 ч.

С поверхности агара смывают культуру физиологическим раствором (рй 7,2), Полученную микробную взвесь кипятят о при 100 С в течение 2 ч с момента эа" кипания в )OX-ном растворе хлорида натрия ° Затем взвесь дважды отмывают физиологическим раствором (рН 7,2) путем центрифугирования. После контроля на стерильность микробную взвесь используют для иммунизации кроликов.

Кроликов породы шиншипла весом 22,5 кг иммунизируют трехкратно с трехдневными интервалами . первую и вторую инъекции делают подкожно по

20 млрд м.т., третью внутривенно .5 млрд. м,т. На седьмые сутки после последней инъекции кроликов обескровливают. Сыворотку консервируют путем добавления мертиолата натрия 1:10000.

Титры сывороток составляют I:25600.

После адсорбции гетерологичные антитела полностью удаляются. За диагностический титр принято разведение сыворотки 1:400. Сыворотку применяют в реакции агглютинации с вибрионами

2-66 сероваров. Реакцию агглютинации ставят объемным методом в пробирках, сыворотку используют в одном разведении — диагностическом титре. Для приготовления сывороток и взвесей культур используют физиологический раствор (рН 7,2). Положительной считают реакцию оценкой 2-4 "+".

Сыворотка против вибрионов 67 серовара строго специфична и активна.

Положительная реакция отмечается только с гомологичным штаммом.

Данная сыворотка имеет большое практическое значение при диагностике кишечных заболеваний. Ислольэование сыворотки позволяет более широко дифференцировать патогенные вибрионы.

Формула изобретения

Штамм бактерий Vibrio Nag 67 серовара КМ 16(316-771), используемый для приготовления монова1 ной диагностической сыворотки.