Способ приготовления тотальных препаратов трематод

 

Изобретение относится к ветеринарии , в частности к гельминтологии . Цель изобретения - обеспечение дифференциальной диагносГики консервированных материалов. Мацерирование трематод ведут до появления белого налета, а после окрашивания 0,6- 0,8%-ным водным раствором молочнокислого кармина осуществляют окрашивание 3-3,5%-ным водным раствором квасцового кармина. Просветление ведут в диметилэстере фталевой кислоты . 1 з;п. ф-лы. О)

« угу ."Pl»; j g

1- чг и,.

Г В. " " ! „>(;.;т .. М «

i Д «41

„. SU„„1454338

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1

1511 4 А Ol N I 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К д ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4253931/30-15 (22) 0.04.87 (46) 30. 01 . 89. Бюл. У 4 (71) Кубанский сельскохозяйственный институт (72) М.И. Звержановский (53) 616.995.122(088,8) (56) Тепляков Л.Я.. Методика окрашивания дигенетических сосальщиков молочнокислым кармином.-C6. Материалы научно-производственной конференции по болезням сельскохозяйственных животных и птиц. Псков, 1968, с. 264-265.

Ивашкин В.М., Контрашавичус В.Н., Назарова Н.С. Методы сбора и изучения гельминтов наземных млекопитающих. Окраска гельминтов и приготовление препаратов.-M. Наука, 1971, с.44-45.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPbITHRM

ПРИ rHHT СССР (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ТОТАЛЪНЫХ

ПРЕПАРАТОВ ТРЕМАТОД (57) Изобретение относится к ветеринарии, в частности к гельминтологии. Цель изобретения — обеспечение дифференциальной диагностики консервированных материалов. Мацерирование трематод ведут до появления белого налета, а после окрашивания 0,60,8Х-ным водным раствором молочнокислого кармина осуществляют окрашивание 3-3,5Х-ным водным раствором квасцового кармина. Просветление ведут в диметилэстере фталевой кислоты. 1 з;п. ф-лы.

1454338

Изобретение относится к области

Гельминтологии, а именно к способам

<)краски препаратов трематод.

Целью изобретения является обеспе5

Чение дифференциальной диагностики консервированных материалов.

Пример 1. В качестве контроля используют способ приготовления репаратов, согласно которому окра- 1ð ивают взрослых трематод, фиксироанных спиртом- (70 ) и скомпрессироанных между стеклами, после кратко-ременной промывки в дистиллированой воде, помещают в молочнокислый армии 0,6%-ной концентрации на 2,5 ч затем промывают B дистиллированной оде, После этого окрашенные тремата4ы проводят через спирты возрастаюей крепости 60, 70, 80, 90, 96, 1 00". 20 атем объект просветляют в гвоздичом масле и заключают в бальзам. Таой метод используют при окраске рематод рыб.

При окраске трематод птиц по это- 25 у способу без длительной мацерации

Не все трематоды разных родов впитывают в себя краску. Так, более неж ые прокрашиваются лучше, более крупь ые (эхиностомы, циклоцелиды) окра — 30 аются хуже. Поэтому перед окрасой мацерируют трематод до белого алета.

Приготовленные по этой методике препараты имеют однотонную оранжево-желтую окраску всех органов, что затрудняет дифференциальную диагностику.

Пример 2. Консервированный ь атериап мацерируют в дистиллированной воде со сменой ее в первые сутки. Пос.те этого воду больше не мен яют до появления белого налета. В воде при такой мацерации трематод оШущается запах сероводорода. 45

При появлении налета трематод ополаскивают в сменной дистиллированной воде, налет удаляют мягкими кисточками, дополнительно прессуют между предмеТными стеклами, сжимают и фиксируют нитками, сменяя обвязку через каждые сутКи. Мелких и нежных трематод прессуют 1 0-15 мин, толстых

ceM. Dicrocoeliidae, Fasciolidae, Echinostomatidae, Cicloceliidae, Ptosthogonimidae, Notocotilidae. несКолько суток, поместив в чашки Петри и залив свежей дистиллированной водой (22-24 С).

После этого трематод подвергают окрашиванию молочнокислым кармином

0,6%-ной концентрации. Окраску коптролируют путем просмотра трематод в микроскопе МБР-1, МБР-6. Время окрашивания — от нескольких часов до нескольких суток при комнатной температуре (22-24 С)

Как только цвет желточников, семенников и присосок становится оранжевым, окраску прекращают, трематод вынимают и промывают в воде.

После кратковременной промывки водой (в течение 1-2 мин) препарат помещают в квасцовый кармин 3%-ной концентрации и выдерживают до выявления темно-фиолетовой окраски внутренних органов под контролем бинокуляра.При окраске семенников в темно-фиолетовый цвет трематод вынимают и промывают в воде. Затем пропускают через спирты возрастающей концентрации

50, 60, 70, 90, 96, 100. Далее просветляют трематод в диметилэстере фталевой кислоты, при помощи фильтровальной бумаги удаляют остаток просветляющего раствора, переносят на предметное стекло и заливают канадским бальзамом.

Пример 3. Консервированный материал мацерируют в дистиллированной воде со сменой ее в первые сутки.

После этого воду больше не меняют до появления белого налета. В воде при такой мацерации трематод ощущается запах сероводорода.

При появлении налета трематод ополаскивают в сменной дистиллированной воде, налет удаляют мягкими кисточками, дополнИтельно прессуют между предметными стеклами, сжимают и фиксируют нитками, сменяя обвязку через каждые сутки. Мелких и нежных трематод прессуют 10-15 мин, толстых сем. Dicrocoeliidae Fasciolidae Echinostomatidae, Cicloceliidae Prosthogonimidae Notocotilidae — несколько суток, поместив в чашки Петри и залив свежей дистиллированной водой (2224 С). После этого трематод подвергают окрашиванию молочнокислым кармином 0,8%-ной концентрации. Окраску контролируют путем просмотра трематод в микроскопе МБР-1, МБР-6. Время окрашивания — от нескольких часов до нескольких суток при комнатной температуре (22-24 С) .

Б контроле наблюдается однотонность в окраске вьппеперечисленных органов. Таким образом, предлагаемый способ облегчает изучение анатомических и морфологических особенностей трематод, что способствует определению их до вида.

Формула изобретения

Составитель Н. Дмитриченко

Техред М.Ходанич Корректор 1Т.Ñàìáoðñêàÿ

Редактор И. Рыбченко

Заказ 7366/4 Тираж 422 Подписное

BHHHIIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул . Проектная, 4 з 145433

Как только цвет желточников, семенников и присосок становится оранжевым, окраску прекращают, трематод вынимают и промьвают в воде.

5

После кратковременной промьвки водой (в течение 1-2 мин) объект помещают в квасцовый кармин 3,5Х-ной концентрации и выдерживают до выявления темно-фиолетовой окраски внут- 10 ренних органов под контролем бинокуляра. При окраске семенников в темно-фиолетовый цвет трематод вынимают и промывают в воде, затем пропускают через спирты возрастающей концентра- 15 ции 50, 60, 70, 90, 96, 100 . При помощи фильтровальной бумаги удаляют остаток просветляющего раствора, переносят на предметное стекло и заливают канадским бальзамом. 20

Препараты, приготовленные предлагаемым способом имеют окраску, которая проявляется в нескольких тонах: тело трематод оранжево-желтое; половые органы мужской и женской сис- 25 тем (яичник,семенники) красноватофиолетовые (могут быть фиолетовые); желточники на фоне оранжево-желтого тела имеют светло- и темно-коричневый цвет. Все системы органов про- 30 сматриваются на препаратах полностью.

1. Способ приготовления тотальных препаратов трематод, включающий мацерирование трематод, прессова"ние, окраску молочнокислым кармином и последующее просветление и заключение в канадский бальзам, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью обеспечения дифференциальной диагно- стики.консервированных материалов, мацерирование ведут до появления белого налета, а после окрашивания молочнокислым кармином осуществляют окраску квасцовым кармином, при зтом просветление ведут в диметилэстере фталевой кислоты.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю-шийся тем, что для скрашивания трематод используют 0,6-0,8Х-ный водный раствор молочнокислого кармина и 3-3,57-ный водный раствор квасцового кармина.