Штамм бактерий рsеudомоnаs аrguата, используемый для обогащения силоса белком

 

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и касается нового штамма бактерий, используемого при изготовлении силоса для обогащения последнего белком и витаминами. Цель изобретения-штамм бактерий PSEUDOMONAS ARGUATA ВКПМ В-2590 (лабораторный номер КРС-134), способный усваивать мочевину и обогащающий силос белком и физиологически активными веществами. При внесении штамма в силосуемую массу количество белкового азота в ней возрастает с 0,42 до 0,61% в расчете на сухое вещество. 5 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU „„/4 795() 6

<5п 4 С 12 N 1/20 1/22

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

HA@:, К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4272324/28-13 (22) 29.06.87 (46) 15 ° 05.89. Бюл. 1 - 18 (71) Алма-Атинский зооветеринарный институт (72) Б.Толысбаев, H.Ê.Чуканов и О.Бисенбаев (53) 663.15 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

Р- 1270172, кл. С l2 N 1/20, l985, Авторское свидетельство СССР

М 12932 15, кл. С 12 N 1/20, 1984 . (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEVDOYONAS ARQUATA, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОБОГАШЕНИЯ

СИЛОСА БЕЛКОМ

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и касается нового штамма бактерий, используемого при приготовлении силоса для обогащения последнего белком и витаминами.

Цель изобретения — штамм бактерий

Pseudomonas arquata КРС-134, способный усваивать мочевину и обогащающий силос белком и физиологически активными веществами.

Штамм выделен из содержимого рубца крупного рогатого .скота с последующей селекцией на твердых средах Рубенчика и Омелянского. Штамм хранят на полужидком KIA с мочевиной или без нее под слоем вазелинового масла или в лиофильно высушенном состоянии.

Штамм P seudomonas arquata КРС-134 депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под но(57) Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и касается нового штамма бактерий, используемого при приготовлении силоса для обогащения последнего белком и витаминами. Цель изобретения — штамм бактерий Pseudomonas arquata ВКГП

 †25 (лабораторный номер КРС-134), способный усваивать мочевину и обогащающий силос белком и Аизиологически активнычи веществами. При внесении штамма в силосуемую массу количество белкового азота в ней возрастает с

0,42 до 0,617. в расчете на сухое ве-. щество. 5 табл. мером ВКПМ В-2590 и имеет следующую характеристику.

Культурально-морфологические признаки. На МПА колонии круглые плоские серовато-мутные с неправильно изрезанными краями размером 2-3 мм и более.

На IIIA с 51 †н мочевиной колонии, как на МПА клетки в форме коккобактерий и овоидов размером 12 0,7 мкм. Встречаются и цепочки клеток. Клетки подвижны грамотрицательны и хорошо окрашиваются обычными анилиновыми красками.

На синтетической твердой среде Рубенчика с 5Z-ной мочевиной колонии круглые выпуклые беловато-мутные с фестончатыми краями размером 1-2 мм и более. Клетки имеют форму коккобактерий (0,7-1 0,7 мкм) или мелких

1479506

15 с закругленными концами паЛочек (1-2 ° О, 7 мкм) .

Мясо-пептонная желатина: рост на поверхности и умеренный нитевидный по линии укола, разжижения нет.

На МПБ обильное помутнение с белым плотным осадком на дне пробирки.

На МПБ с 5 -Hîé мочевиной рост, как на ИПБ.

На полужидком ИПА с 5 -нои мочевиной рост, как íà MITE. На указанных средах клетки имеют форму коккобактерий (0,7-1i0,7 мкм) или мелких палочек (1-2к0,7 мкм) .

На синтетической жидкой среде Рубенчика с 5 . †н мочевиной наблюдается обильное помутнение с беловаторыхлым осадком на дне пробирки. Клетки имеют форму коккобактерий или овоидов размером 1-2<0,7 мкм.

Физиолого-биохимические признаки.

Отношение к источникам углеродов: сбраживают лактозу, мальтозу, глюкозу, малактозу, маннит, сорбит, салициловый спирт, глицерин с образованием кислоты, использует сахарозу, глюкозу, лактозу, мальтозу, дульцит, галактозу, салициловый спирт, сорбит, арабинозу, инозит, лимонно-кислый натрий, яблочно-кислый калий, виннокислый натрий, янтарно-кислый калий, щавелево †кисл натрий, пировиноградно-кислый натрий, уксусно-кислый натрий, фумарово-кислый натрий.

Отношение к источникам азота: усваивает мочевину, .нитраты, аммонийный азот, пептон, казеин.

Каталазная активность и редукция метиленовой синьки хорошо выражены.

Образование сероводорода, индола, аммиака, восстановление нитратов, гидролиз крахмала и гемолиз эритроцитов барана не отмечаются.

На минеральной среде Рубенчика на рост штамма стимулирующее действие оказывает лейцин, метионин, фенилаланин, изолейцин, серин, цистин, цистеин, которые взаимозаменяемы.

Штамм устойчив к пенициллину, стрептомицину, террамицину, мономицину и фуразолидону, слабочувствителен к биомицину, тетрациклину, левомицетину, полимиксину, эритромицину, I мономицину.

Растет при 28-37 С.

Диапазон рН для роста 6,5-8,5.

Факультативный анаэроб.

Штамм нетоксичен и непатогенен.

Штамм выращивают на оптимицированной синтетической среде Рубенчика следующего состава, г/л: мочевина

36 3; натрий лимонно-кислый трехзамещенный 30,0; К НРО < 0,37; NaC1 1,0;

MgS0q 7Н О 0,75; FeS04 0,005; рН

8,0-8,2.

Выращивание ведут в ферментере объемом 0,5 м при 28 С и аэрации

40 м /ч в течение 2-3 сут.

Выход сухой биомассы, белка (общего и истинного) и внеклеточных витаминов приведен в табл,1.

Характеристика аминокислотного состава белка штамма P.arquata ВКПМ

В-2590 представлена в табл.2.

Коэффициент отношения суммы незаменимых кислот к сумме заменимых составляет 1,07.

Анализ липидов, проведенный методом ТСХ в системе петролейный эфир— диэтиловый эфир — уксусная кислота (85:15:1), выявил наличие следующих классов соединений, %: фосАолипиды

20, моноглицериды 27,04, диглицериды

6,96, триглицериды 19,5 и углеводороды 26,5 от общего количества липидов.

Жирно-кислотный состав триглицеридной фракции липидов Р,arquata BKIIY.

В-2590 показан в табл.3.

Уровень белка, нуклеиновых кислот, липидов и фосфора, содержащихся в биомассе штамма, приведен в табл.4.

Биологическая ценность белка бактерий (по литературным данным) составляет 85, à его переваримость 74,6Ж.

Пример. Влажность предварительно измельченной соломы доводят до 65 путем добавления воды (1;2).

Данная влажность является оптимальной для течения молочно-кислого брожения. Затем в контрольный и опытный вариант вносят мочевину из расчета

0,5 к весу общей массы. В качестве углеродного питания к силосуемому сырью добавляют 2,5% мелассы. Последняя необходима также для оСесггечения молочно-кислого брожения.

В опытный вариант вносят по 2 r биомассы штамма ВКПМ В-2590 из расчета на 1 т соломы. Все компоненты хорошо перемешивают с соломой и полученный таким образом силос вскрывают через 2 месяцы и анализируют.

Результаты приведены в табл.5.

1479506

Продолжение табл. 2

4,64

4,55

6,64, 5,87

5,79

3,38

3,86

0,26

8,44

8,57

9,15

6 05

4,14

7,61

Глицин

Пролин

Серин даемости животными.

Таблица 3

Содержание, к общему количеству

Кислота

Число уг леродных атомов

Т а блица 1

Вещество

С 17 .0

С и e0

c:o

c„20

С„:0

С„:1

С„:1

С:2

С, :3

С о:4

Лауриеновая

Миристиновая

Пальмитиновая

Стеари о ая

Арахиновая

Пальмитолеиновая

Олеиновая

Линолевая

4Ц Линоленовая

Арахиновая

3,85

79, 70

66,87

0,1322

О, 1633

0,0820

0,0023

3,3327

Таблица 4

73,3

Количество, Ж от сухой биомассы

Вещество

Т.аблица 2

Истинный белок

Нуклеиновые кислоты

Липиды

Зола

55 Фосфор

65,5-66,87

12 3-12,83

2,5-2,7

5,9-6,3

2, 05-2, 25

Изолейцин

Лейцин

Фенилаланин

Метионин

4,57

8,19

4,81

3,48

Данные табл.5 показывают, что при добавлении к силосуемой соломе штамма ВКПМ В-2590 мочевиноусваивающих бактерий в качестве закваски и трансформатора мочевины в микробный

5 белок наблюдается заметный прирост белкового азота. Наряду с этим силос хорошо оценивается по органолептическим свойствам: имеет приятный запах квашеных продуктов. Контрольный силос, наоборот, распространяет неприятный запах затхлой соломы.

Таким образом, применение штамма мочевиноусваивающих бактерий Р,arquata BKIIM В-2590 при обработке соломы по типу силосования с целью обогащения ее белком является простым и доступным в условиях производства, а отсутствие в составе корма масляной кислоты очень важно в отношении поеФормула и з обре т е н и я

Штамм бактерий Pseudomonas arqu25

ata ВКПМ В-2590, используемый для обогащения силоса белком.

Сухая биомасса, г/л

Общий белок, 7 на сухую биомассу

Истинный белок; Ж к общему белку

Тиамин (В,), г/л

Пантотеновая кислота (ВЗ), г/л

Пиридоксин (В ), г/л

Биотин (В т), г/л

Инозит (В g) г/л

Кобаламин (В ), мкг/л Треонин

Триптофан

Валин

Лизин

Аргинин

Гистидин

Тирозин

Цистин

Аланин

Аспарагиновая кислота

Глутаминовая кислота

16,1

20,2

20,1

5,3

0,6

16,70

6,40

5,40

5,20

4,00

14 79506

Табл ица 5

Органические кислоты> Х

Вариант

Содержание

Лэот на воэдушно-сухое вещество, Х

Свободные

Конечньв3

ПерноначальСняэаиные аммиака,У, Общий 1 Белко ный

Уксус- Иасляная ная

НолочУксус- Расляная ная ныя ная

7,0

0,59

О, 14 Ов00 0 ° 35 0100 0 043 1, 12 Ое61

4,9

6,9

П р и и е ч а н н е. Температура при закладке 20-22 С; прн вскрытии 31-33 С. о о

Составитель Л.Минеева

Техред M.Õîäàíè÷

Корректор A.0бручар

Редактор M.Недолуженко

Подписное

Тираж 501

Заказ 2504/25

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, И-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина, 101

Солома+нода+мочевипа+меласса (контроль)

Солома+вода+мочевина+меласса+ штамм ВКПН

В-2590

5,2 0,63 0,33 0,00 0,22 0,00 0,049 1,03 0,42