Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье
Изобретение относится к фармации, а именно к фармацевтической химии, и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье. Цель изобретения - сокращение числа операций и времени анализа. Точную навеску лекарственного растительного сырья кипятят 20-30 мин с 30%-70%-ным спиртом при соотношении 1:(100-200) в колбе с обратным холодильником, охлаждают, доводят до первоначальной массы соответствующим спиртом, профильтрованную аликвотную часть экстракта обрабатывают алюминия хлоридом в 70%-ном спирте и измеряют при аналитической длине волны 410-415 нм оптическую плотность раствора на спектрофотометре на фоне пробы, не обработанной алюминия хлоридом, а подкисленной уксусной кислотой. Параллельно в тех же условиях проводят опыт с 1,5 мл 0,1%-ного раствора рутина. Расчет содержания флавоноидов в сырье осуществляют по формуле, приведенной в описании.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
А1
„„SU„„1507 (р 4 А 61 K 35/78
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АBTOPCKCNY СВИ4ЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4301201/28-14 (22) 25.08.87 (46) 15.09.89. Бюл. И- 34 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт химии и технологии лекарственных средств (72) В.В. Беликов и Н.Т. Колесник (53) 615.32 (088.8)
I (56) Romisch Die Pharmazie, 1960, Ф 1, 33. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛАВОНОИДОВ В РАСТИТЕЛЬНОМ СЫРЬЕ (57) Изобретение относится к фармации, а именно к фармацевтической химии,. и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье.
Цель изобретения — сокращение числа
Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической химии, и может быть использовано для количественного определения флавоноидов в лекарственном растительном сырье.
Цель изобретения — сокращение числа операций и времени.
Сущность предлагаемого способа состоит в быстрой экстракции флавоноидов из растительного материала большим (не менее чем 100-кратным) избытком кипящего 30-70% водного раствора спирта, проведении реакции комплексообразования с хлоридом алюминия и спектрофотометрировании на фоне пробы, подкисленной уксусной кислотой. Такой способ спектрофотомет2 операций и времени анализа. Точную навеску лекарственного растительного сырья кипятят 20-30 мин с 30-70Х-ным спиртом при соотношении 1:(!00-200) в колбе с обратным холодильником,охлаждают, доводят до первоначальной массы соответствующим спиртом,профильтрованную аликвотную часть экстракта обрабатывают хлоридом алюминия в 707-ном спирте и измеряют при аналитической длине волны 410-415 нм оптическую плотность раствора на спектрофотометре на фоне пробы, не обработанной хлоридом алюминия, а подкисленной уксусной кислотой. Параллельно .в тех же условиях проводят опыт с с
1, 5 мл О, 17-ного раствора рутина.Расчет содервания фдавоноидов в сырье Щ осуществляют по формуле, приведенной в описании. рирования поЗволяет получать более точные результаты анализа, так как при этом исключается поглощение сопутствующих окрашенных веществ растений. Контрольную пробу подкисляют уксусной кислотой для переведения флавоноидов и сопутствующих нм веществ в недиссоциированную форму с целью улучшения воспроизводимости результатов.
Пример 1. Определение рутина в бутонах софоры японской.
0,5 г (точная масса) измельченного и просеянного сквозь сито с размером отверстий О, 5 мм сырья бутонов софоры японской помещают в колбу со шлифом вместимостью 200 мл, прибав1507394 ляют 100 мл ЗОХ-ного этилового спирта, взвешивают, присоединяют к колбе обратный водяной холодильник, содержимое колбы нагревают 20 мин на кипящей водяной бане, отмечая время с начала кипения, затем колбу отсоединяют, искусственно охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначального веса соответствующим спиртом. В две мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 1 мл экстракта, в одну колбу прибавляют
4 мл 5 .-ного раствора хлорида алюминия, а в другую колбу — 0,1 мл 15
ЗОБ-ной уксусной кислоты, доводят объем в колбах водой до метки, перемешивают и через 10 мин измеряют оптическую плотность раствора с хлоридом алюминия на спектрофотометре 20 в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 415 нм, применяя в качестве контроля раствор, подкисленный уксусной кислотой.
Параллельно в тех же условиях проводят опыт с 1,5 мл 0,1Х-ного раствора рутина.
Расчет содержания рутина в абсолютно сухом сырье проводят по формуле 30
D1ОО С,,100 ° 100
Х )
D Ч а (100-Ь) где D — - оптическая плотность спектрофотометрируемой пробы анели- 5 зируемого экстракта;
D, — оптическая плотность спектрофотометрируемой пробы раствора рутина;
С вЂ” содержание рутина в спектро40 фотометрируемой пробе в пересчете на сухое вещество,г; а — масса сырья, взятая для экстрагирования, г;
Ь вЂ” влага сырья, 7;
Ч вЂ” объем экстракта, взятого для спектрофотометрирования мл, Пример 2. Определение флавоноидов в листьях скумпии. 50
1 г (точная масса) измельченного и просеянного сквозь сито с размером отверстий 1 мм растительного материала помещают в колбу со шлифом вместимостью 200 мл, прибавляют
100 мл 50Х-ного этилового спирта,взвешивают, присоединяют к колбе обратный водяной холодильник, содержимое колбы нагревают 30 мин на водяной бане, отмечая время с начала кипения, затем колбу отсоединяют, искусственно охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначального веса соответствующим спиртом.
Часть извлечения фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. В две мерные колбы вместимостью 25 мл помещают по 2, О мл фильтрата, в одну колбу прибавляют 4 мл 57.-ного раствора хлорида алюминия в 70Х-ном спирте, а в другую колбу — 0,1 мл 307-ной уксусной кислоты, доводят объем в колбах 70Х-ным спиртом до метки, перемешивают и через 30 мин измеряют оптическую плотность раствора с хлоридом алюминия на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны
415 нм на фоне раствора, подкисленного уксусной кислотой. Параллельно в тех же условиях проводят опыт с
1, 5 мл О, 1Е-ного раствора рутина в
957-ном спирте. Расчет содержания флавоноидов в сырье в пересчете на мирицетин-3-рамноэид, проводят по приведенной в примере 1 формуле, однако, в знаменатель вводят коэффициент
1,27, полученный делением молекулярной массы рутина на молекулярную массу мирицетин-Ç-рамноэида, так как последний является основным компонентом флавоноидов листьев скумпии.
В таблице приведены результаты определения флавоноидов предлагаемым способом в различном растительном сырье.
Предлагаемый способ упрощает количественное определение флавоноидов в растительном сырье эа счет исключения операций упаривания, фильтрации, обработки аликвотной части извлечения четыреххлористым углеродом, уксусной кислотой, пиридином, а также в 1О раз сокращает время проведения анализа.
Формула изобретения
Способ количественного определения фпавоноидов в растительном сырье путем экстракции спиртом, обработки извлечения алюминия хлоридом и фотометрирования, отличающийся. тем, что, с целью сокращения числа операций и времени, экстракцию проводят кипячением в течение 20-30 мин с 30-70Х-ным водным раствором спирта
1507394 6 фоне прооы, подкисленной уксусной кислотой. при соотношении 1:100-200 с последующим спектрофотометрированием на
Растительный материал
Условия экстракции
Параметры спектрофотометрирования
ЭкстраВремя, Объем
1 макс ) нм гент мин
26,5
0,25* 0,5 415 1,00
30%-ный 20
415
1,27
2,0 скумпии
Листья
415 1,27
1,5 сумаха
Листья каштана
70
410 1,40 2,2
1,5
70%-ный спирт 30
410 1,40 0,6
Трава зверобоя
50%-ный спирт 30
1,14
410
5,1
Цветки ромашки
То me 20
2,5
415
1,00
2,0
П р и м е ч а н и е. Соотношение сырье — экстрагент 1:100 °
* По методике берут 1 мл экстракта на 100 мл спектрофотометрируемого раствора.
Составитель С. Фирсова
Техред А.Кравчук Корректор М. Самборская
Редактор Л; Веселовская
Заказ 5481/9 Тираж 643 Подписное ю
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101
Бутоны софоры японской
Листья конского
Трава горца птичьего спирт
50%-ный 30 спирт
To me 30 экстракта для
25 мл пробы,мл
Концентрация спирта, %
Коэффициент пересчета рутина . а флавоноиды сырья
Найдено флавоноидов, %
