Способ получения 11 @ -замещенных стероидов или их фармацевтически или ветеринарно приемлемых солей

 

Изобретение касается замещенных стероидов , в частности, получения соединений общей формулы @ , где R<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">3</SB>- алкил

R<SB POS="POST">2</SB>-A-Z

A-фенилен

Z-NR<SB POS="POST">5</SB>R<SB POS="POST">6</SB>

R<SB POS="POST">5</SB> и R<SB POS="POST">6</SB>-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">3</SB>-алкил

R<SB POS="POST">3</SB>-OH

R<SB POS="POST">4</SB>-C<SB POS="POST">2</SB>-C<SB POS="POST">5</SB>-алкинил или их фармацевтически или ветеринарно приемлемых солей, обладающих противоглюкокортикоидной активностью. Цель - создание более активных и малотоксичных веществ указанного класса. Синтез ведут дегидратацией и декетализацией соединения общей формулы @ где R<SB POS="POST">1</SB>-R<SB POS="POST">4</SB> - см.выше

[R<SP POS="POST">1</SP>+R<SP POS="POST">11</SP>] - защищенная оксогруппа в виде циклического кеталя. В случае необходимости выделенный продукт превращают в нужную соль. Новые вещества малотоксичны и более активны, чем картексолон. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) (51)4 С 0 J 1/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ Гннт СССР

32;,()033AH

)ЯЙЛЫ- ЫБиЧИЯ9

Б ЬЛИЭТЕКА

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К flATEHTY

R1 где R

К,Rg э

К,) ! (21) 4027509/23-04 (22) 29 05.86 (31) 8513723 (32) 31.05.85 (33) СВ (46) 15,09.89. Бюл. > 34 (71) Фармиталиа Карло Эрба С.п.А. (ХТ) (72) Франко Фаустини, Роберто Д Алес" сио, Витториа Вилла и Энрико ди Салле (n) (53) 547,689.6. 07 (088.8) (56) Endocrinology, 1980, 107, 1933 °

Dj erassi. Stегоids, S-Fr, 1963, ch. 5, р. 238. " (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 11 р -ЗАМЕЩЕННЫХ

СТЕРОИДОВ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ИЛИ

ВЕТЕРИНАРНО ПРИЕМЛЕМЫХ СОЛЕЙ (57) Изобретение касается замещенных стероидов, в частности получения сое .динений общей ф-лы

Изобретение относится к способу получения новых производных стерои. дов, именно 11(3-замещенных стероидов общей формулы I

2 где R, — С, — С -алкил; R — -А-Й;

А — фенилен; Е = NR R ; R u Rz !

° С -С-алкил R -ОН R -С-СЭ 1 ),2 5

-алкинил, или их фармацевтически или ветеринарно приемлемых солей, обладающих противоглюкокортикоидной активностью. Цель - создание более активных и малотоксичных веществ указанного класса. Синтез ведут дегидратацией и декетализацией соединения общей ф-лы где R, — R — см. выше; (R +R "3— защищенная оксогруппа в виде циклического кеталя. В случае необходимости выделенный продукт превращают в нужную соль. Новые вещества малотоксичны и более активны, чем картексолон, 1 табл.

С, — С -алкил; группа -А-Е, где А — фенилен;

-R группа -N,где каждый К

6 и К С„- С -алкил; гидроксильная группа;

С вЂ” Cs-алкинил, 3 1508963 или их фармацевтически или ветеринар.но приемлемых солей, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Цель изобретения - получение новых

11)-замещенных стероидных производных, обладающих преимуществами по сравнению с известными структурными аналогами, например кортексолоном.

Сокращения ТГФ, ДМСО и TCX исполь- 10 зованы для обозначения соответственно тетрагидрофурана, диметилсульфоксида и тонкослойной хроматографии.

Пример 1. Шлам 12,69 г 19-нор-5-о -окси-5-P-метил-3-оксо-17-P-оксиандростан-3,3-этилендиокси-17-ацетата в 190 мл пиридина охлаждают, с помощью внешней бани, а затем при перемешивании в реакционный сосуд по каплям добавляют 12,7 мл хлористого 20 тионила, поддерживая температуру на уровне ниже 5О С. Когда операцию добавления завершают, смесь подвергают. перемешиванию в течение 10 мин, после чего добавляют 200 мл воды и водный 25 слой подвергают экстракционной обработке несколькими порциями этилацетата. Органическую фазу промывают водой, высушивают над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получив 14,2 гзО сырого 6-P-метил-17-P-окси-5,10-экстрен-5,10-3-он-3,3-этилендиокси-17-а цетата.

ЯМР-спектрограмма (CDC1), Р: 0,81 (3H, с.); 1,05 (3H, д.); 2,03 (3Н, с.), 3,98 (4Н, с.); 4,66 (1Н, дд.) .

Этот сырой продукт растворяют в

130 мл диэтилового эфира и раствор обрабатывают 640 мл 653-ного водного раствора уксусной кислоты и перемеши- 40 вают в течение 24 ч и при комнатной температуре (20 С). Затем реакционную смесь разбавляют 1,3 л воды и несколько раз подвергают экстракционной обработке этилацетатом. Органическую фазу высушивают, растворитель удаляют в вакууме, а уксусную кислоту отгоняют в виде азеотропной смеси с циклогексаном. Сырой продукт очищают на силикагеле с использованием смеси диэтилового эфира с н-гексаном в соотношении 1:1 в качестве элюента, в результате чего получают,7,85 г чистого маслоподобного 6- -метил-17-бетаокси-5,10-экстрен-3-он-17

55 ацетата.

ЯМР-спектрограмма (CDCl ), о : 0,84 (3Н, с., С„з), 1,04 (3Н, деу С )

2, 04 (3Н, с,), 2,63 (1Н, д., С+ ), 4

2,98 (1Н, д., С, ), 4,65 (1Н, дд., 17)

П р и м.е р 2. В раствор 7,85 r

6-Р-метил-17-Р-окси-5,10-экстрен 3-он-17-ацетата в 380 мл сухого пиридина в атмосфере сухого азота с охлаждением с помощью внешней бани отдельными порциями добавляют 9,9 г пиридинийгидробромидпербромида.. Смесь перемешивают в течение 15 мин, затем е нагревают до 50 С и перемешивают в течение 1 ч. Затем реакционную смесь резко охлаждают добавлением в 500 мл воды, подкисляют до рН 2 добавлением

98/-ной серной кислоты и подвергают экстракционной обработке этилацетатом. Органическую фазу высушивают, растворитель удаляют в вакууме и сырой 6- -метил-17-P-окси-4,5-9,10-экстрадиен-3-он-17-ацетат подвергают хроматографическбй обработке на силикагеле с использованием диэтилового эфира в смеси с н-гексаном в соотно- . шении 6:4, в результате чего получают

6,12 г чистого 6-P-метил-17- -окси-4,5-9,10-экстрадиен-3-он-17-ацетата в виде белых кристаллов с т.пл. 9799 С.

УФ-спектрограмма (этанол):9.„„

= 304; Е = 19,429; сс) = -215 Ic = — 1, хлороформ).

ЯМР-спектрограмма (CD Cl ), 8:

0,92 (3Н, с.); 1,04 (3Н, д.), 2,02 (3Н, с. ), 4,64 (1Н, дд. ); 5,70 (1Н, с.) ..

Пример 3. В раствор 9,2 г

6- -метил-17-P-окси-4, 5-9, 10-э кстрадиен-3-он-17-ацетата в 100 мл сухого дихлорметана добавляют 6,3 мл этиленгликоля, 7,5 мл этилортоформиата и

0,24 г п-толуолсульфокислоты, после чего смесь нагревают до 40 С и перемешивают в течение 1,5 ч. Реакционную смесь нейтрализуют триэтиламином, разбавляют 100 мл этилацетата, про" мывают насыщенным раствором карбоната калия и высушивают, затем удаляют растворитель, в результате чего получают 10 г сырого 6-Р-метил-17-окси-5,10-9,11-эстрадиен-3-он-3,3-этилендиокси-17-ацетата. Сырой продукт растворяют в 150 мл метанола и .:обрабатывают 6 г гидрата окиси лития и

50 мл воды. Раствор перемешивают в течение 1,5 ч при комнатной температуре, а затем нейтрализуют 2 н. соляной кислотой, отгоняют метанол и ос" таток подвергают экстракционной обра5 !5 ботке этилацетатом. Органическую фазу высушивают и выпаривают в вакууме с получением 9,7 г 6- метил- l7-окси-5, 10-9, ll-эстрадиен-З-он-3,3-этилендиокси. В раствор добавляют 6,44 г сырого 6-P-метил-17-;-окси-5,10-9,11—

-эстрадиен-З-он-3,3-этилендиокси в

60 мл смеси сухого ДМСО/бензола в соотношении 1:1, 12,1 г дициклогексилкарбодиимида, 1,57 мл пиридина и

0,77 мл трифторуксусной кислоты а затем смесь перемешивают при 20 С в течение 5 ч. После завершения операции окисления (контролируют с помощью ТСЗ) смесь разбавляют 90 мл бензола, твердый материал фильтруют с вакуумированием в органическую фазу, выпаривают в вакууме. Полученный -сырой продукт подвергают хроматографической обработке на силикагеле (смесь диэтилового эфира с н-гексаном и триэтиламином в соотношении 50:50:0,2 в качестве элюента), в результате чего получают 5,74 г чистого 6-P-метил-5,10-9,11-эстрадиен-3,3-этилендиокси-3, l7-диона, с4Дц — — 267 (с = 1, хлороформ) .

ЛИР-спектрограмма (CD С1 ), 8:

0,88 (ЗН, с.), 1, 12 (ЗН, д.), 3,98 (4H, с.); 5,56 (1Н, м.).

Пример 4. Через 2,2 M раствор .этилмагнийбромида в 120 мл сухого

ТГФ в течение 2 ч барботируют метилацетилен, высушенный на хлористом о кальции, после чего охлаждают до 30 С с помощью внешней термостатической бани. Затем в атмосфере сухого аргона в эту смесь по каплям добавляют раст.вор 8,6 г 6-Р-метил-5,10-9,11-эстрадиен.-3,3-этилендиокси-3,17-диона в

35 мл сухого ТГФ. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч, а затем охлаждают добавлением в 500 мл смеси льда с водой и хлористым аммонием и подвергают несколько раз хроматографической обработке диэтиловым эфиром.

Органическую фазу промывают водой, высушивают и растворитель удаляют.

Сырой остаток с гексаном очищают на окиси алюминия с использованием смеси этилацетата с гексаном в соотношении

10:90 в качестве элюента, в результате чего получают 8,7 г чистого 6-/3-метил-17- -окси-17-о -(1-пропионил)-3,3-этилендиокси-5,10-9,11-эстрадиен-З-она. о(= +161 (с = 1, хлороформ).

08963

5

1О

6

ЯИР-спектрограмма (CD С1 ), Р:

0,84 (ЗН, с.); 1 08 (3H, д ° ); 1 83 (ЗН, с.); 3,98 (4Н, с.); 5,55 (1H,.ì.).

Пример 5. Раствор 7,78 г

6-P-метил-17-(3-окси-17- (1-пропинил)-3,3-этилендиокси-5,10-9,1l-эстрадиен-3-она в 100 мл дихлорметана охлаждают до температуры от -5 до

-l0 Ñ и обрабатывают добавлением отдельными порциями 4,78 г м-хлорнадбензойной кислоты с последующим перемешиванием в течение 45 мин, После перемешивания добавляют 4,62 г карбоната калия и шлам оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение 30 мин, Твердый материал фильтруют, а органическую фазу разбавляют этилацетатом и промывают 5 ным раствором бикарбоната натрия в воде, а затем высушивают и удаляют растворитель. Сырой продукт подвергают хроматографической обработке на силикагеле с использованием смеси н-гексана с этилацетатом и триэтиламином в соотношении 70:30:0,2 в качестве элюента, в результате чего получают 3,85 г

6-P-метил-5,10-о -эпоксид-17-P-окси-17-Ы;(l ïðîïèíèë)-3,3-этилендиокси-9 ll-эстрен-З-она.

У о (о = -1,1 (с = 1, хлороформ).

ЯИР-спектрограмма (CD С1 ),8:

0,83 (ЗН, c.), 1,14 (3H, д.); 1,85 (ЗН с ° ); 3,93 (4Н, м.); 6,04 (1H, м.) .

Пример 6. 1È раствор и-диметиламинофенилмагнийбромида в 240 мл

ТГФ охлаждают до -30 С в атмосфере сухого азота, после чего добавляют в него 1,20 r хлорида одновалентной меди. Смесь перемешивают в течение

20 мин, после чего ее охлаждают с помощью внешней бани до -30 С и добав- ляют в нее по каплям раствор 15 г

6-P-метил-5, 10-ф ..-эпокси-17-P-окси-17-oL-(l-пропинил)-3,3-этилендиокси-9,11-эстрен-З-она в 80 мл ТГФ.

Температуру в течение 1 ч выдерживают на уровне -30 С, а затем раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры. Смесь охлаждают добавлением в 500 мл смеси раствора хлористого аммония со льдом и подвергают экст-. ракционной обработке этилацетатом, органическую фазу промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивают и удаляют растворитель.

Сырой продукт подвергают очистке в колонке с силикагелем, используя сме1508963

Cl ), 8 :

n. l; 1,87

436 (Й, м ), д ° ),704

ЯИР-спектрограмма (CD

0,55 (3Н, с.) 1,28 (3Н, (3Н, с.) 2,88 (6Н, с.), 5,80 (1Н, с ° ), 6,68 (2Н, (2Н, д.).

П р и м.е р 8. 6 -Иетил-17Р-оки-1 о -(1-пропинил)-11 -4-диметиламинофенил)-4,5-9,10-эстрадиен-3-он (440 мг, 1 ммоль) растворяют в простом диэтиловом эфире (10 мл) и перемешанный раствор обрабатывают 3,5 И раствором хлористоводородной кислоты в этаноле (0,31 мл, 1,1 ммоль). си н-гексана с этилацетатом и триэтиламином в соотношении 60:40:0,2 в качестве элюента, в результате чего получают 14,1 r 6-8-метил-5- -17-Р-диокси-1 7-о - (1-пропинил) -1 1-р-(4-ди5 метиламинофенил)-3,3-этилендиокси-9, .10-экстрен-3-он. о,= -13 (с = 1, хлороФорм).

ЯИР-спектрограмма (CD С1 ), в

0,44 (3Н, с.); 1,05 (3Н, д.); 1,96 (3Н, с.), 2,90 (6Н, с.), 4,00 (4Н,м.), 4,16 (1Н, м.), 6,70 (2H, д.), 7,10 (2Н, д.) .

Пример 7. В раствор 11 3 r

6-P-метил-5-, 17-P-ди-окси-17-Ы†(1-пропинил)-и-P-(4-диметиламинофенил)-3,3-этилендиокси-9,10-эстрен-.3-она в 400 мл метанола добавляют

14 мл концентрированной соляной кисо лоты и раствор перемешивают при 25 С в течение 30 мин. После этого декетализацию завершают в реакционную смесь, разбавляют 1000 мл диэтилового эфира и нейтрализуют 350 мл lн. вод- 25 ного раствора гидрата окиси натрия.

Органическую фазу отделяют, а водный слой подвергают экстракционной обработке диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты промывают вод- g0 ным раствором хлорида нагрия, высушивают и диэтиловый эфир удаляют. Остаток очищают в колонке с силикагелем с использованием смеси н-гексана с этилацетатом в соотношении 50:50 в качестве элюента, в результате чего получают 9,2 г чистого 6-P-метил.-l7-Р-окси-17-о4-(1-пропинил)-11-P†(4-диметиламинофенил)-4,5-9,10-эстрадиен-3-она. (

Уф-спектрограмма (этанол):% ма к с = — 262; Я = 17,764, A м ко = 306; Е

= 19,403 °

Через несколько минут образующуюся соль собирают путем фильтрования и промывают простым диэтиловым эфиром.

Неочищенный продукт повторно кристаллизуют из этанола с получением

310 мг чистого гидрохлорида 6Р -метил-17Р-окси-17 -1-пропинил-11 -(4-диметиламинофенил)-4,5-9,10-эстрадиен-3-она.

Вычислено, 4: С 75,98 Н 8,08;

N 2,92; Сl 7,40.

Cуо П ъ7 йЮ НС1 (479, 5)

Найдено, 4: С 74,96 Н 8, 11

N 2,91; Cl 7,86.

Биологические испытания.

Противоглюкокортикоидная активность полученных соединений оценена в сравнении с известным антагонистом глюкокортикоида кортексолоном (11-деоксикартизол ().

Противоглюкокортикоидная активность исследована на испытаниях по аккумулированию гликогена в печени крыс, согласно данным C.P, Guthrie.

Самцы крыс породы.Спрэг-Доули (массой 175-200 г) перед обработкой подвергнуты посту за 14 ч. Антагонисты, суспендированные в метилцеллюлозе 0,53, назначены для введения через рот при различных дозировках и через

15 мин внутрибрюшинно введена постоянная доза (0,05 мг/кг) агониста дексаметаноза (индуктора глюкокортикоидного эффекта).

Одна группа животных подвергнута обработке с помощью дексаметазона, а другая группа разбавителями. животных умерщвляют. отсечением головы через 7 ч после антагониста, печень быстро удаляют и взвешивают.

Содержание гликогена в печени опре" делена в соответствии с известными данными.

Полученные результаты приведены в таблице.

Влияние РСЕ 23560 (6-Р-метил-17-(-окси-17-4-1-пропинил)-118-(4-диметиламинофенил)-4,5-9,10-эстрадиен-3-он) и кортексолона на накопление гликогена в печени, вызванное дексаметазоном (0,05 мг/кг при внутрибрюшинном введении) у подвергнутых посту самцов крыс. Антагонист назначен за 15 минут до агониста и животных умерщвляют через 7 ч.

Из таблицы видно, что соединения по изобретению, например 6-P-метил8963

1О

= 1

0Н формула изобретения

Способ получения 11Р-замещенных ,стероидов общей формулы I

Агонист Антагонист, мг/кг, при введении в рот

Гликоген печени, г/100 г веса печени

0,25 + 0,02

Отсутствует

Отсут-. ствует

Дексаметазон

1,20 + 0,10

1,18 «+ 0,12

0,49 «+ 0,10

0,33 + 0,09

0,22 «+ 0,07

1,22 «+ 0,08

1,15 m 0,12

O,72 + О,1О

Отсутствует

ГСК 23560

2,5

5,0

10,0

20,0

10во

20,0

40,0

«!!

l!»

«!!»

l!»

«!!»

«!!»

«!!»

«! !»

Кортексолон

»!!»

l!»

Составитель И.федосеева

Техред Л.Сердюкова Корректор Н.Борисова

Редактор О. Спесивых

Заказ 5553/58 Тираж 338 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. ч/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

9 150

-17-t!-окси-17-О -(1-пропинил)-11-/3†(4-диметиламинофенил)-4,5-9,10-эстрадиен-3-он, обозначенное внутренним кодом FCE 23560, являются более эффективными антиглюкокортикоидами по сравнению с кортексолоном.

Действительно, FCE 23560 существенно снижает скопление гликогена в печени, вызванное дексаметазоном, начиная с дозировки 5 мг/кг. Кортексолон при той же дозировке оказался неэффективен и лишь при дозировке

40 мг/кг приводит к существенному снижению гликогена (в результате по меньшей мере,в 8 раз менее эффективен по сравнению с FCE 23560) .

Кроме того, токсичность соединений например FCE 23560, является незначительной и они могут безопасно использоваться в терапии: они действительно попадают в категорию малотоксичных соединений. где R — С, — С -алкил;

К вЂ” группа -А-Е, где А - фени-. лен;

Z — группа -N R где каждый R

Вь и R С, — Сз-алкил;

R — гидроксильная группа ;

R — С, — С,-алкинил, или их фармацевтически или ветеринарно приемлемых солей, о т л и ч а юшийся тем, что соединение общей формулы II где 1 R<, R и R+ имеют Указанные значения

R u R вместе взятые об-! !! разуют защищенную в виде цикличес-.. кого кеталя оксо" группу, подвергают дегидратации с одновременной декетализацией и при необходимос- ти полученное соединение I превращают в его фармацевтически или ветеринарно

35 приемлемую соль.