Среда для проращивания пыльцы линий кукурузы
Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции растений, и может быть использовано в практической работе при гибридизации. Цель изобретения - увеличение количества проросшей пыльцы и удлинение пыльцевых трубок. В среду, содержащую сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко-агар и бидистиллированную воду, вводят стероидный гликозид-цепозид E-[3-0-Α-L-рамнопиранозил(1-2)-α-L-арабинопиранозид]-(25R)-фурост-5-ен-3β, 22α, 26-триол-26-0-β-D-гликопиранозид. Компоненты вводят в питательную среду при следующем соотношении компонентов, мас.%: сахароза 25,00-30,00 борная кислота 0,01-0,02 хлористый кальций 0,03-0,06 Дифко-агар 1,0-1,2 цепозид E 0,001 - 0,00001 и вода бидистиллированная - остальное. 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИН
„.ВО„„ЩЩИ1 А1 (51)5 А 01 Н 1 02
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
g P1" тБД11 - 1:>ЯБЛОК Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГКНТ СССР (21) 4343137/30-1 3 (22) 12.11.87 (46) 15.05.90. Бюл. № 18 (71) Институт экологической генетики АН МССР (72) H,Í,Áàëàøîâà, Y.Н.Лазу, Л,П,Дегтярева, П.К.Кинтя и З.И.Герасименко {53) 631.521{088,8) (56) Canadion Journal of Botany, 1965, V,43, ¹ 7, р, 779-786. (54) СРЕДА ДЛЯ ПРОРА11)ИВАНИЯ ПЫЛЬЦЫ ЛИНИЙ КУКУРУЗЫ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции растений, и может быть использовано в практической работе при гибридизации. Изобретение относится к сельскому хозяйству,. а именно к селекции растений, и может быть использовано в практической работе при гибридизации, Цель изобретения — увеличение количества проросшей пыльцы и удлинение пыльцевых трубок. Среда по сравнению с известной средой, содержащей сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифкоагар и бидистиллированную воду, дополнительно содержит природный стероидный гликозид — цепозид E-биозид-13-0<(-L-рамнопиранозил(l 2)-К-L-арабинопиранозид 1-(252)-фурост-5-ен-3p>2201> 26-триол-26-0-(-D-глюкопиранозид при следующем соотношении компонентов, мас.% . Сахароза 25,00-30,00 Борная кисло0,01-0,02 Цель изобретения — увеличение количества проросшей пыльцы и удлинение пыльцевых трубок. В среду, содержащую сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко-агар и воду, вводят стероидный гликоэид — цепозид Е-(3-0cL-L-рамнопиранозил(1-2)- -L-арабинопиранозид)-(25 В)-фурост-5-ен 3Р> 22 > 26 триол-26-0-$-D-гликопираиозид. Компоненты вводят в питательную среду при следующем соотношении компонентов, мас.%: сахароза 25,00-30,00; борная кислота 0,01-0,02; хлористый кальций 0,03-0,06; Дифко-агар 1,0-!,2; цепозид Е 0,001-0,00001 и вода бидистиллированная остальное. 1 табл. а >О Хлористый кальций О, 03-0 > 06 Дифко-агар 1,0-1,2 Цепоэид F. 0,00001-0,001 Бидистиллированная вода Остальное Способ получения цепозида F. заключается в том, что семена лука репчатого (А1ium сера Ь) экстрагируют на- ф сыщенным водой бутанолом-1, полученный экстракт упаривают и последова,тельно хроматографируют на колонках с окисью алюминия и силикагелем, используя в качестве элюента систему хлороформ — метанол — вода (65:30:IO). Выделенный целевой процукт контролируют в тонком слое силикагеля в этой системе: Rf=0,62. Полученное вещество — аморфный IIc рошок белого цвета, т.пл. 175-!77 С,(ф,i г — 75 (С 10,0, CH OH), мол,вес, 8 2 .е,, брутто156364,! Формула С4 Н О,, Хорошо растворяется в воде, метиловом и этиловом спирте, пиридине. Нерастворим в ацетоне, хлороформе, серном эфире. Препарат не гигроскопичен, устойчив при хранении. В ИК-спектре присутствуют полосы поглощения: 900 см 1 (широкая полоса, характерная для фуростаноловых гликозидов), 3400 см (ОН-группа). ! Пример, Среду для проращивания пыльцы линии кукурузы готовят следующим образом, В 0,5 л бидистиллиро ванной воды растворяют 300 г сахарозы, 200 мг борной кислоты, 600 мг хлористого кальция, 12 r Дифко-.arapa, 1 мг цепозида E затем доводят объем раствора до 1 л бидистиллятом. Полученную питательную среду разогревают до полного растворения компонентов и наносят на предметное стекло. Ha saстывшую питательную среду наносят пыльцу кукурузы, затем предметное стекло помещают в чашку Петри с увлажненной фильтровальной бумагой и выдержи- 25 вают в термостате при 27 С в течение о 40 мин. Жизнеспособность определяют по количеству проросших пыльцевых трубок. Число проросших пыльцевых зерен определяют под микроскопом. Длину пыльцевых трубок измеряют при помощи окуляромикрометра. Для выявления оптимального состава среды, обеспечивающей наибольший процент прорастания пыльцы кукурузы, были приготовлены и испытаны 3 варианта среды 1-3, отличающиеся содержанием цепоэида. Результаты опыта представлены в таблице, Контролем служила известная 40 среда (см.таблицу). Как видно из данных таблицы, предлагаемая среда позволяет увелиФормула изобретения Среда для проращивания пыльцы линий кукурузы, содержащая сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко-агар и бидистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью увеличения количества проросшей пыльцы и удлинения пыльцевых трубок, питательная среда дополнительно содержит стероидный гликозид — цепозид Е-(3-О-М-L-рамнопираноэил(1-2)g-L-араьинопираноэид— (25R)-фурост-5-ен-3,Я 22 26-триол26-О-P-D-гликопираноэид при следующем соотношении компонентов, мас.7: I,. 25-30. 0 01-0,02 Сахароза Борная кислота Хлористый кальций Дифко-агар Указанный цепозид Е Бидистиллированная вода 0,03-0,06 1,0-1,20 0,001-0,00001 Остальное чить,процент прорастания пыльцы кукурузы на 25,6М, при этом пыльцевые трубки в 2,5 раза длиннее, чем в контроле, Среда дает возможность максимально сохранить менее жизнеспособные пальцевые зерна и расширить спектр доступной генетической изменчивости при гибридизации. Изобретение просто в применении и может быть использовано в селекционной практике с целью получения форм растений, более продуктивных и устойчивых к неблагоприятным факторам среды. 5 1563641 6 Сравнительные данные по действию сред на прорастание пыльцы и длину трубок линии кукурузы 0,156 Rf, Ингредиенты среды, мас,X КоличестСреда Иэ них проросло Длина пыльцевых трубок, мм во изученных шт. Ж пыльцевых зерен Сахароза 25,00; борная кислота 0,01 хлористый кальций 0,03; Дифко-агар 1,2; цепозид E 0 001.; вода остальное Сахароза 30,00 борная кислота 0,02; хлористый кальций . 0,06; Дифко-.агар.1,2; цепозид E 0 0001; вода остальное Сахароза 27,00; борная кислота 0,0; хло-" ристый кальций 0,05; Дифко-агар 1,1; цепозид Е 0,00001; вода остальное Сахароза 30 00 борная кислота 0,02; хлористый кальций 0,06; Дифко-агар 1,2; вода остальное (контроль) 1000 35 3,5+0,58 18,7 1000 276 27,6+1,41 37,5 24 2,4+0,48 16,1 1000 20 2,0+0,44 15,0 100 Составитель E.ØKðàäþê Редактор Н,Киштулинец Техред M.Дидык Корректор О,Ципле Заказ 1112 Тираж 437 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35,,Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина, 101
