Способ культивирования микроводоросли хлореллы

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается культивирования микроводорослей, биомасса которых широко применяется в различных отраслях народного хозяйства. Цель изобретения - повышение выхода биомассы микроводоросли хлореллы. Способ культивирования хлореллы заключается в том, что инокулят микроводоросли хлореллы вносят в жидкую органоминеральную питательную среду, представляющую собой 2-4%-ную водную вытяжку солодовых ростков и 0,5%-ного водного экстракта хлопкового шрота в соотношении 1:1 и выращивают водоросли в условиях освещения и перемешивания. Предлагаемый способ позволяет увеличить выход биомассы фотоорганотрофных микроводорослей более чем в два раза по сравнению с известным способом. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (111

5884 A 1 (S>)S С 12 И 1/12

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

Н А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ! (21) 4215188/31-13 (22) 25,03,87 (46) 23.05.90. Бюл, ¹ 19 (71) Институт микробиологии АН

УЗССР (72) Б.И,Бильмес, Д.А,Б1ток и Х.Ф.Якубов (53) 636.085:639.64 (088 ° 8) (56) Бильмес Б.И. и др. Некоторые физиологические особенности местного фотоорганотрофного штамма Chlorella

vulgaris. — Узбецкий биологический журнал, 1985, № 2, с ° 17-19. (54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВЛНИЯ 51ИКРОВОДОРОСЛИ ХЛОРЕЛЛЫ (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается культивирования микроводорослей, Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается культивирования микроводорослей, биомасса которых широко применяется,в различных отраслях народного хозяйства.

Цель изобретения — повышение выхода биомассы микроводоросли хлореллы.

Способ культивирования микроводоросли хлореллы заключается в томр что инокулят микроводоросли хлореллы вносят в жидкую органоминеральную питательную среду, представляющую собой 2-4%-ную водную вытяжку солодовых ростков или смесь 2%-ной водной вытяжки солодовьм ростков и 0,5%-ного водного экстракта хлопкового шрота биомасса которых широко применяется в различных отраслях народного хозяйства. Цель изобретения — понышение выхода биомассы микронодоросли хлореллы. Способ культивирования хлореллы заключается в том, что инокулят микроводоросли хлореллы вносят в ж щкую органоминеральную питательную среду, представляющую собой 2-4%-ную водную вытяжку солодовых ростков и

0,5%-ного нодного экстракта хлопкового шрота в соотношении 1: 1, и выращивают водоросли в условиях освещения и перемешивания. Предлагаемый способ позволяет унеличить выход биомассы фотоорганотрофных микроводорослей более чем в два раза по сравнению с известным способом. з.п. A-лЬ», 3 табл.

Оае

©ч в соотношении 1:1 и выращивают водоросли н услоВиях освещения и перемешивания.

Пример 1 (стерильное культивирование). Для культивирования водо- О рослей готовят жидкую питательную среду, которой служит водная вытяжка из солодовых ростков. Для приготовления вытяжки берут солодовые ростки в количестве 400 г, заливают 1 л водопроводйой воды, оставляют на 8 ч при комнатной температуре для наста»1 в 1 вания, затем отделяют жидкую фазу, фильтруют ее через матерчатый фильтр, а перед использованием разбавляют водой в 10 раэ (до 10 л) и разливл» т по 50 мл в колбы Эрленмейера емкс с»»-.».

1565884

750 мл и по 10 мл в колбы емкостью

100 мп, стерилиэуют при 0,5 атм

20 мин.

Для получе,ния посевного материала используют 2-суточную культуру фотоорганотрофного штамма СЫ. vulgaris штамм Е.К., выращенную на косяках твердой питательной среды, которую переносят путем смыва в колбы, содар- 10 жащие 10 мл приготовленной вытяжки из солодовых ростков, .и выращивают в люминостате 2 сут. Полученную акти.вированную культуру водорослей пере;носят в .колбы, содержащие по 50 мл

;вытяжки из расчета 6-8 мпн. клеток

1, .на 1 мп среды. Выращивание проводят, :в течение 4 сут с периодическим осве,щением люминесцентными лампами по 8 ч в сутки при 26 С и перемешивании встряхиванием.

Данные по интенсивности накопления, биомассы хлореллы приведены в табл. 1.

Иэ табл. 1 видно, что продуктивность фотоорганотрофных..водорослей при стерильном культивировании этим способом составляет 165,0 млн. клеток на 1 мл среды, максимальная продук-: тивность этого штамма хлореллы на известной среде составляет 77,3 млн. клеток на 1 мл среды.

Пример 2 (нес.герильное культивирование). Питательную среду готовят так же, как в примере 1, но не, стерилизуют. Полученную среду разли вают в культиваторы лабораторной ус, тановки для выращивания водорослей, ,состоящей из 10 культиваторов емко стью по 1 л каждый, и засевают активированной культурой фотоорганотрофнъас водорослей Chl. чц18аг3.э штамм

Е.К.

Для получения активированной культуры (посевного материала) используют

2-сУточнУю кУльтУРУ хлорелж4 выРа- 45 щенную на косяках твердой питательной среды. Ее переносят из расчета 1820 млн. клеток на 1 мп среды путем смыва в колбы Эрленмейера, содержащие по 10 мл нестерильной жидкой питательной среды, которой служит водная вытяжка из солодовых ростков, и ведут выращивание в люминостате при 2226 С 4 сут при периодическом освещении по 8 ч в сутки и леремешивании.

Выросшую 4-суточную жидкую культуру

5S хлореллы переносят в колбы Эрленмейера емкостью 500 мл, содержащие по

5О мп питательной срецы из расчета

Плотность культуры водорослей на 4-е сутки роста, млн. клеток/1 мл среды

Варианты культивирования

Стерильное (в колбах): на пептонно-солевой среде на предлагаемой среде (4 -ная водная вытяжка из солодовых ростков)

Нестернльное (в культиваторах): на пептонно-солевой среде на предлагаемой среде (4%-ная водная вытяжка из солодовых ростков) 77,3

165,0

Роста нет

155,7 Рост водорослей подавляется из-за бурного развития бактерий.

Таким образом, культивирование фотоорганотрофного штамма хлореллы на водной вытяжке из солодовых ростков позволяет увеличить продуктивность культуры в 2,1 раза по сравнению с известной средой, а также дает возможность проводить процесс культи нирования этих. водорослей в нестерильных условиях. не менее 18-20 млн. клеток на 1 мп среды, и выращивают в условиях люминостата при 22-26 С 4 сут. Полученную активированную культуру фотооргано-трофных водорослей переносят в культиваторы из расчета не менее 1820 млн. клеток на 1 мп среды и выращивают в течение 4 сут при периодическом барботировании и аэрации среды с помощью микрокомпрессора марки БК-1 и освещении интенсивностью 6-8 тыс. лк от лампы ДРЛ-750 при 22-26 C.

Из приведенных в табл.1 результатов видно, что при культивировании хлореллы этим способом максимальная плотность культуры составляет

155,7 млн. клеток в 1 мл среды. На известной оптимальной среде (пептонно-солевой) вести культивирование таким способом, т.е. без соблюдения стерильности, невозможно.

Т а б л и ц а 1

Продолжение табл.2

195,0

Роста нет

154, 1 ктивмлн. к/1 мл

5 15658

Пример 3 (стерильное культи-вирование). Для культивирования фотоорганотрофных водорослей готовят жидкую питательную среду которой явля-1

У

5 ется смесь равных объемов водных вы-, тяжек из солодовых ростков и хлопкового шрота. Вытяжку из солодовых ростков (2%-ную) готовят аналогично примеру 1. Экстракт из хлопкового шрота (0,5%-ный раствор) получают следующим образом. Навеску шрота 50 г заливают 1 л водопроводной воды, кипятят 30 мин, остужают и фильтруют через матерчатый фильтр. Перед засевом инокулятом хлореллы смешивают по 1 л вытяжки солодовых ростков и экстракта из хлопкового шрота, доводят объем до 10 л. Среду стерилизуют при 0 5 атм в течение 20 мин. В даль- 20 нейшем способ культивирования выполняют, как в примере 1.

Данные роста хлореллы на различных вариантах питательных сред приведены в табл.2. 25

Продуктивность культуры хлореллы при стерильном культивировании этим способом 195 мпн. клеток на 1 мл на

4-е сутки, а на известной среде—

77,3 млн. клеток на 1 мл. 30

Пример 4, (нестерильное куль-. тивирование). Питательную среду готовят так же, как в примере 3, но не стерилизуют. Исходная плотность засева культурой хлореллы 18-20 илн. кле35 ток на 1 мл. В дальнейшем культивирование осуществляют аналогично примеру 2. Максимальная продуктивность хлореллы на предлагаемой среде

154,1 млн. клеток на 1 мл, на иэвест- 40 ной среде (пептонно-солевой) рост водорослей отсутствовал из-эа подавления бактериями (табл.2). !

Таблица2 ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,5%-ного экстракта хлопкового шрота)

Нестерильное (в культиваторах): на пептонно-солевой среде на предлагаемой среде (смесь 2%ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,5%-,ного экстракта хлопкового шрота) Из данных, приведенных в табл.2, видно что культивирование фотоорганотрофного штамма хлореллы на смеси (1: 1) 2%-ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,5%-ного экстракта хлопкового шрота увеличивает продуктивность культуры в 2,5 раза, а также позволяет проводить процесс в нестерильных условиях.

Данные, обосновывающие использование 2-4%-ной водной вытяжки солодовых ростков, а также смеси 2%-ной водной вытяжки солодовых ростков и 0,5%-ного водного экстракта хлопкового шрота в соотношении 1:1 в качестве питательной среды для получения максимальной продуктивности культуры фото-. органотрофного штамма микроводоросли хлореллы, приведены в табл.3, Т а б л и ц а 3

77,3

77,3

Стерильное (в колбах): на пептонно-солевой среде на предлагаемой среде (смесь 2%1

Пептонно-солевая среда (известная)

Водная вытяжка иэ солодовых ростков, г/л воды:

200 . 100

42,3

102,5

165, 9 128, t

108, 3

60,1

1565884 е женному способу по сравнению с известным обеспечивает увеличение выхода биомассы более чем в 2 раза.

52,7

88,6

50 0 129,2

195, 2

138, 1

2. Способ по п.1, о т л и ч а ю— шийся тем, что при использовании 2Х-ной вытяжки солодовых ростков в нее дополнительно вносят 0,5Х-ный водный экстракт хлопкового шрота в соотношении 1: 1.

Таким образом, культивирование,.микроводорослей хлореллы по предлоСоставитель P.Àíäðååâà

Редактор О.Юрковецкая Техред М.Дндык Корректор Т.Малец

Заказ 1199

Тираж 489

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

Водный экстракт иэ хлопкового шрота ° г/л воды:

5 ,Смесь (1:1) из водной вытяжки солодовых рост; ков и хлопкового щрота соответственно, г/л:

40и10 .20и5

10и2,5

Формула изобретения

1. Способ культивирования микроводоросли хлореллы, включающий засев органоминеральной среды микроводорослями, выращивание их в условиях освещения и перемешивания, о т л и ч а— ю шийся тем, что, с целью повышения выхода биомассы,в качестве органоминеральной среды используют 24Х-ную водную вытяжку солодовых ростков.