Способ фракционирования гумусовых кислот

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и почвоведению и касается раздела химии почв по выделению и определению состава и свойств специфических продуктов почвооборудования-гумусовых соединений почв. Целью изобретения является повышение точности фракционирования гумусовых кислот. Для этого гумусовые кислоты обрабатывают 0,8-1,2 М раствором этилендиаминтетрауксусной кислотой при 20-25°С в течение 20-30 ч. Способ позволяет получить индивидуальные фракции гумусовых кислот почвы и увеличивает выход низкомолекулярной фракции в 10-11 раз, что дает возможность на качественном уровне определить его роль и влияние на почвенное плодородие, герезис и эволюцию почв. 2 табл., 2 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

О 01 N 1/28, 33/24

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4615945/30-15 (22) 31. 05.88 (46) 15. 10.90. Бюл. № 38 (71) МГУ нм. М.В.Ломоносова (72) Л.С. Орлов, О.И.Минько, .

В.Г. Сальников, В.В. Лемин и Н.Е. Измайлова (53) 631.411.4(088.8) (56) Милановский F.10. Лрименение ионного детергента в гельхроматографии гумусовых кислот почв. — Лочвоведение 1984, ¹ 8, с. 142-146, (54) СЛОСОВ ФРАКЦИОНИРОВАНИЯ ГУМУСОВЫХ КИСЛОТ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству и почвоведению и касается раздела химии почв по выделению и

Изобретение относится к сельскому хозяйству и почвоведения и касается раздела химии почв по выделению и определению состава и свойств спефицических продуктов почвообразованиягумусовых соединений, а именно фракционированию гумусовых кислот по мо-. лекулярным массам.

Целью изобретения является повьппение точности Аракционирования гумусовьтх кислот.

На Аиг. 1 изображена кривая фракционирования гумусовых кислот по известному способу; на фиг. 2 — то же, по предлагаемому способу.

Л р и м е р. Гумусовые кислоты ,экстрагируют из почвы 0,1 н раство-ром NaOH, :центрифугируют при

10000 об. /мин 20 мин, Ьильтруют

„.SU „„1599701 A 1

2 определению состава и свойств специфических продуктов почвооборудования— гумусовых соединений почв. Целью изобретения является повьппение точности фракционирования гумусовых кислот.

Для этого гумусовые кислоты обрабатывают 0,8-1,2 М раствором этилендиаминтетрауксусной кислотой при 20-25 С в течение 20-30 ч. Способ позволяет получить индивидуальные Аракции гумусовых кислот почвы и увеличивает выход низкомолекулярной фракции в 1011 раз, что дает возможность на качественном уровне определить его роль и влияние на почвенное плодородие, герезис и эволюцию почв. 2 табл.

2 ил. сквозь мембранный Аильтр с диаметром пор 0,45 мкм, К 5 мл полученного раствора гумусовых кислоT добавляют в кристаллическом виде 1,86 г этилендиалинтетрауксусную кислоту (ЭЛТА). что соответствует раствору с концентрацией 1 М ЭЛТА, и после растворения

Э тА, раствор выдерживают при 22 С

24 ч, Затем 2 мл раствора обессоливают на колонке с гелем Г-t0 используя в качестве элюентной системы трис-НС1-буАер (рН 9), Собирают фрак- «ф» цию гумусовых кислот, выходящ ю в свободном объеме геля. Элюирование проводят 0,05 М раствором трис-НС1 с добавлением 0,57. додецилсульфата натрия (рН 9) . Количественное вьщеление фракций ведут на препаратив:ной колонке размером 2,6" 60 см с ге1599701

: лем Г-50, на которую наносят 2-5 мл . :подготовленного раствора гумусоных

1 кислот. !

Условия фракционирования: колонка стеклянная размером 0,9к70 или

2,6 60 см, заполненная декстранавым гелем; детектор с проточной кюветой, регистрация оптической плотности при 280 нм; скорость элюирования

5 мл/ч обеспечивается с помощью перестальтического насоса.

В табл, 1 представлены данные (средние величины из определений), показывающие, что при 20-25 Г достигается полная диссоциация агрегатов молекул гумусоных кислот за 20-30 ч, Увеличение времени взаимодействия гумусоных кислот с ЭдТА удлиняет время анализа, а повышение температуры не приводит к дальнейшему росту количественного содержания низкомолек тлярной фракции гумусоных кислот.

Кроме этого, увеличение времени взаимодействия и повышение температуры реакции повышают вероятность протекания вторичных-реакций, При низкой температуре (15 Г) и времени взаимо1 действия гумусоных кислот с ЭДТА до

20 ч не обеспечивается полнота выхода низкомолекулярной фракции.

В табл. ? приведены данные, снидетельствующие î том> что наиболее полное разрушение молекулярных агрегатов гумусовых кислот достигается при добавлении к их раствору 0,8-1,2 N

Э)ТТА (температура — 22 Г, время взаимодействия — 24 ч).

В качестве примера приведены результаты фракционирования гумусовых кислот по молекулярным массам на декстрановом геле 7-50 по известному (фиг. 1) и предлагаемому (фиг, 2) Таблица 1 о

Температура, С

15 20 22 25 30

47

52

56

58

49

54

56

56

56

57

36

41

44

44

38

52

54

54

?5

Время взаимодействия гумусовых кислот с

ЭДТА, ч способам, Полученные данные свидетельствуют о том, что количество низкомолекулярной фракции возрастает (максимум 3) при одновременном уменьшении количества фракций с ММ 1030 тыс. и выше (максимумы 1 и 2 на фиг. 2). Обнаруженное изменение относительного содержания молекулярных фракций обусловлено разрушением агрегатов молекул гумусовых кислот после их взаимодействия с Э ТА.

Таким образом, обработка гумусовых кислот перед их обессоливанием на геле Г-10 при 20-25 Г в течение 2030 ч приводит к максимальному разрушению агрегатон молекул гумусовых кислот и позволяет увеличить выход низкомолекулярных фракций в 10-11 раз, что повышает точность определения молекулярно-массового распределения гумусовых кислот методом фракционирования на декстрановых гелях. Увеличение выхода низкомолекулярной фракции сокращает трудозатраты при препаративном выделении этих соединений по сравнению со способом-прототипом.

ОфoPxyaavso6PeTeHHP

Способ фракционирования гумусовых кислот по молекулярным массам путем извлечения их из почвы, очистки, обессолинания и фракционирования на декстрановом геле с выделением низкомолекулярной фракции, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повышения точности, перед обессоливанием их дополнительно обрабатывают 0,81,2 М раствором этилендиаминтетрауксусной кислоты при ?0-25 Г в течение

20-.30 мин.

1599701

Таблица 2

Показатель

0,6

1,2

58 56

Концентрация Э)ТТА, И

Относительное содержание гумусовых кислот с ИМ 5-6 тыс., _#_ 43 57 57

Насьпцение по раство-римости

По прототипу (без добавления

ЭДТА) 1599701

Составитель В. Раскатов

Техред А.Кравчук Корректор М. Кучерявая

Редактор Т. Парфенова

Заказ 3136

Тираж 51 6

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СЧСР

113035., Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101