Способ получения липидов

 

Изобретение относится к технической микробиологии, в частности к способам получения липидов микробиологическим синтезом. Микробные липиды могут быть использованы в качестве заменителей технических жиров. Цель изобретения - повышение содержания олеиновой кислоты в липидах. Штаммы липогенных микроскопических грибов CUNNING-HAMELLA, JAPONICA ВКМ F - 1204, ASPERGILLUS TERREUS ВКМ F-67, FUSARIUM OXYSPORUM ВКМ F-137 или ALTERNARIA CUCUMORINA ВКМ F-1881 выращивают глубинным способом на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, фосфора и стимулятор роста. Соотношение C:N равно 50:1. В качестве источника углерода используют сточные воды производства оливкового масла, содержащие 3,0-3,8% сухих веществ следующего состава, %: редуцирующие вещества 40-50

пектиновые вещества 16,5-20

жиры 7,5-8,0

клетчатка 0,2

общий азот 0,2-0,3

в т.ч.белковый 0,25-0,27

небелковый 0,01-0,015

сырой протеин 1,2-1,8. Содержание РВ в сточных водах 1,5-2,5%. Затем биомассу отделяют, сушат и экстрагируют из нее липиды. Выход липидов 30-57%. Содержание олеиновой кислоты в липидах 65,6-79,1%. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУЕ ЧИК (51)5 С 12 P 7/64, С 12 N 1/14//

//(С 12 N 1/14 С 12 R 1.645

С 12 R 1:66, С 12 R 1:77) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOIVIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ L или Al ternaria cucumerina BKM F-1881 культивируют глубинным способом на питательной среде, содержащей сточные воды производства оливкового масла (отходы маслоэкстракцианных заводов) в качестве источника углерода.

Среда содержит также источник азота и фосфора, предпочтительна в виде фосбата аммония и стимупятор роста, например автолизат дрожжей.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 44 78668/30-13 (22) 27.06.88 (46) 15. 12.90. Бюп. Р 46 (71) Сектор микробиологии АН ЛзССР (72) Г! .А . Ma мед ьяр он, A . .А . Раджа бова, !!.В.Канава, С.Г,Гасанова и P.È.Ãóìб; това (53) 663 . 18 (088 .8) (56) Лвтарско свидетельство СССР

Р 270663, кл. С 12 P 7/64, 1969.

Авторс к ое с вид етел ьст во СССР

М 1050295, кл. С 12 Р 7/64, 1981. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПИДОВ (57) Изобретение относится к технической микробиологии, в частности к способам получения липидов микробиологическим синтезом. 1!икробные липиды могут быть использованы в качестве заменителей технических жиров.

Цель изобретения — повышение содержания олеиновой кислоты в липидах.

Г1таммы липогенных микроскопических

Изобретение относится к технической микробиологии и касается способа получения липидов микробиологическим синтезом. Иикрабные липиды могут быть использованы в качестве заменителей технических ха(ров °

Цел ь и зобр етення — повышение содержания алеиновой кислоты в липидах.

Способ получения липидпв псуществл я ют сл ед ующи м а бр а з ом.

Цтаммы липигенных микроскапичес— ких грибов Cunninghamel 1 a japonica

ВК!! Г-1204, Asperg il lu s ter reu s ВКМ

F-67, Fuss riu."i с:.:ysporum В1!! Г-137

„„SU„„1613492 А1

2 грибов Cunninghamella japonica ВКИ

Г-1204, Aspergillus terreus BKM F-67, Fusarium oxysporum BKM F-137 или Al—

ternaria cucumorina ВКМ F-1881 выращивают глубинным способом на питательной среде, содержащей источники углерода, азота, фосфора и стимулятор роста, Соотношение С:N равно

50: 1. В качестве источника углерода используют сточные воды производства оливкового масла, содержащие 3,03,8i. сухих веществ следующего.состава, Е: редуцирующие вещества 40-50, пектиновые вещества 16,5-20, жиры

7 5-8,0, клетчатка О, 2; общий азот

0,2-0,3, в т.ч. белковый 0,25-0,27, небелковый О, 01-0,015; сырой протеин

1,2-1,8. Содержание PB в сточных водах 1,5-2,57.. Затем биомассу отделяют, сушат и экстрагируют иэ нее липиды. Выход липидов 30-57Х. Содержание олеиновой кислоты в липидах

65,6-79, 1Z. 2 табл.

Сточные воды производства оливкового масла содержат 3,0 — 3,8", сухих веществ (СВ) следующего со<-та ва, 7.:

1613492

Редуцирующие вещества РВ 40 — 50

Пектиновые вещества 16,5 — 20

Жиры 7,5 — 8,0

Клетчатка 0,2

Общий азот 0,2 — 0,3 в том числе белковый 0,25 — 0,27 небелковый 0,01 — 0,015

Сырой протеин 1,2 — 1,8

Содержание РВ в сточных водах (,5 — 2,57.. РВ состоят в основном из глюкозы, фруктозы, сахарозь(, ксилозы и арабинозы.

Процесс ведут при соотношении С:N, равном 50: 1, т.е. в условиях лимитиэации содержания азота в среде, 3атем биомассу отделяют от жидкой фазы, сушат и экстрагируют из нее липиды.

Пример 1. Нтамм микроскопического гриба Cunninghamilla japonica ВКМ F-1204 культивируют на питательной среде, содержащей 2,57. (по

РВ) сточных вод» О, 17 (NH4) z HPO4 и

0,057, дрожжевого автолизата. Параллельно проводят выращивание на среде, содержащей О, 157. (NH4) НРО«« .

Среду разливают по 80 мп в колбы емкостью 500 мл, доводят рН до 6,0 и стерилиэуют. Затем засевают 7-суточной культурой, выращенной на сусло-агаровой среде. Процесс выращлвания ведут при 26 С в течение 72 ч о

35 глубинным способом °

Полученную биомассу отделяют от м«дкой фазы, промывают, сушат и экстрагируют хлороформом. Из экстракта липиды выделяют под вакуумом.

Состав жирных кислот определяют методом газовой хроматограции на хр омат ограф е "Хр ом-4" .

Полученные результаты приведены в таблице 1, 2.

Пример 2, В качестве микроорганизма используют штамм Alternaria cucumerina BKM F-188 1. Состав питательной среды идентичен примеру

1. C N = 50 1.

Внход биомассы 847 от PB. Вь«ход липидов 357. от абс. сухой биомассы.

Жирнокислотный состав липидов, 7.:

С «я:о 4,9, C«4.о 1,6, Сц:о 9,7; C«S;o 55

2,3, С «у«» 68,7; С « ; 11,6, C(((,g 1,3.

П р и и е р 3. Процесс ведут по примеру ", »o в качестве микроорганизма используют штамм Aspergillus

terreus BKM F-б7.

Выход биомассы 66,47 от РВ, выход пипидов 307 от абс. сухой биомассы.

Жирнокислотный состав липидов, 7:

C(2 о 1 8, С«4 0 О 81» Сло,0 9,5;

C«((;o 3,2; С « ;» 71,6; С (B z 11,6;

С (в;з 1,8

Пример 4. Процесс ведут по примеру 2, но в качестве микроорганизма используют штамм Fusarium oxysporum BKM F-137.

Выход биомассы 66,67, от РВ, выход липидов 327 от абс. сухой биомассы.

Лирнокислотйый состав липидов, 7.:

С((о 0»3; C(«, о 15,6; С(6 о 5,3;

С(««,«65,5; С «В 2 12,2; ѫ 1,4.

Как следует из примеров 1 — 4, выход липидов 30 — 577, содержание алеиновой кислоты 65, 5 — 79, 17..

Фор мула и э обр ет ения

Способ получения липидов, включающий глубинное культивирование микроорганизмов на питательной среде, содержащей источники углерода и азота при соотношении С:N, равном 50:1, а также источник фосфора и стимулятор роста, с последующим выделением целевого продукта, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения содержания в липидах олеиновой кислоты, в качестве источника углерода используют сточные воды производства оливкового масла, содержащего 3, Π— 3,87. сухих веществ следующег о состава, 7.:

Редуцирующие вещества 40 — 50

Пектиновые вещества 16,5 — 20

Жиры 7,5 — 8,0

Кпетчатка 0,2

Общий азот 0,2 — 0,3 в том числе белковый 0,25 — 0,27 небелковый 0,01 — 0,015

Сыр ой пр от еи и 1,2 — 1,8 а в качестве микроорганизмов — штамм .липогенных микроскопических грибов

Cunninghamella japonica ВКИ F-1204, или Aspergillus terreus ВКИ Г-67, или Fusarium oxysporum BKM F-137,или

Alternaria cucumerina ВКМ F-1881.

1613492

Та бли ца 1

С:N

Содержание

О1Н4) НРОфэ

Содержание PB в сточных водах, 7.

47

73,0

79,1

0,15 20: 1

О) 10 50:1

1,5

?,5

Та бли ца 2 г С N 20:1

C N = 50: 1

С<6 3,0

С„., 2,8

С,8,, 73,0

С„в. 16,1

С (в;э 590

Составитель Г.Голева

Редактор О.Спесивых . Техред М.Дидык

Корр ектор И. Эрдейи

Заказ 3867 Тираж 480 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

С 6.о 11,2

С „, 79,1

С18:г 9 6

Выход липидов, Х от PB

Содержание олеиновой кислоты, 7