Способ определения азота, окисленного в растении

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству , к агрохимии и может быть использовано при определении форм азота в растении. Целью изобретения является повышение точности определения. Определение азота, окисленного в растении, осуществляют путем отбора пробы растения, культивируемого на питательной среде, содержащей восстановленный азот, меченый N, гомогенизации пробы, экстракции водорастворимых соединений, осаждения белка, фильтрации. После этого в растительную пробу вводят окись магния и сернокислый алюминий, содержащий JN природного обогащения, пробу кипятят. Затем проводят восстановление окиспенного в растении азота до аммиака путем введения в пробу окиси магния и сплава Деварда и последующей парооой дистилляции, после чего проводят масс-спектрометр ческий анализ на содержащие N. СпосоЭ позволяет повысить точность определения окисленного в растении азота более чем на 43%. 1 табл. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (s>)s А 01 6 7/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

М

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4670917/13 (22) 31.03.89 (46) 30. 04,91, Бюл. N 16 (71) Московская сельскохозяйственная академия им. К. А. Тимирязева (72) Н. А, Савидов, Б. А, Ягодин и И. В, Верниченко (53) 631.811.1(088.8) (56) Ягодин Б. А. и Верниченко И. В. Возможность окисления аммонийного азота в тканях растений до нитратов (опыты с N).

Известия АН СССР. — Сер. "Биологическая".

1984 N. 2, с. 268 — 272, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЗОТА, ОКИСЛЕННОГО В РАСТЕНИИ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, к агрохимии и может быть использовано при определении форм азота в растении, Целью изобретения является поИзобретение относится к сельскому хозяйству, к агрохимии и может быть использовано при определении форм азота в растен ии.

Целью изобретения является повышение точности определения.

Пример. Растения картофеля высаживают в стерильные пробирки с 5 см стандартной среды Мурасиге-Скуга, содержащей 4 мг азота в форме аммония сернокислого с обогащением N 96,3 ат., и культивируют в стерильных условиях в течение 2 мес. Затем отбирают пробу свежих листьев картофеля массой 0,5 г., растирают в фарфоровой ступке, переносят а стеклянный стакан емкостью 300 см с 40 см дистиллированной воды и выдерживают на

„, 1Ы,„ 1644812 А1 вышение точности определения. Определеwe азота. окисленного в растении, осуществляют путем отбора пробы растения, культивируемого на питательной среде. соержащей восстановленный азот, меченый

N, гомогенизации пробы, экстракции водорастворимых соединений, осаждения белка. фильтрации. После этого в растительную пробу вводят окись магния и сернокис 15 лый алюминий, содержащий " N природного обогащения, пробу кипятят. Затем проводят восстановление окисленного в растении азота до аммиака путем введения в пробу окиси магния и сплава Деварда и последующей паровой дистилляции, после чего проводят yacc-спектуометрический анализ на содержащие N. Способ позволяет повысить точность определения окисленного в растении азота более чем на

43 $. 1 табл. паровой бане в течение 10 мин, после чего О в стакан вводят раствор меди сернокислой Дь и осторожно, при тщательном перемешива- фь нии — раствор гидроокиси натрия, образую- QQI щий осадок, отфильтровывают. В д полученном экстракте определяют содержание нитратов потенциометрическим методом с помощью ионоселективного электрода и ионометра.

В фильтрат последовательно вводят 0,2 г окиси магния и 2,0 см 107,-ного раствора

3 аммония сернокислого. Растительную пробу осторожно перемешивают и оставляют на 1 ч, затем кипятят а течение 5 мин в конической колбе с воронкой и упаривают до 10 см на водяной бане. Обработанный экстракт переносят в реакционную колбу

1644812

167„5 f 00;„

292,4

3 кварцевого аппарата, "полумикрокьельдаль", в которую последовательно вводят

0,2 г окиси магния и 0,2 г сплава Деварда и сразу проводят паровую дистилляцию со скоростью отгона 7,5 см /мин до обьема

30 смз. Конденсат упариаают до 2-3 см . з

Определяют изотопный состав полученного аммиака на масс-спектрометре, после чего расчетным путем с учетом ранее определенного содержания нитратов в растении определяют количество окисленного в растении азота.

Результаты испытания способа определения окисленного азота в соответствии с изобретением представлены в таблице.

Как видна из таблицы, определенное в известном способе количество азота, окисленное в растениях картофеля, заметно выше данного показателя этой же пробы в предлагаемом способе, ято является следствием завышения обогащения N азота

15 нитратов в известном способе. А так как такое завышение могло произойти только за счет загрязнения азота нитратов азотом восстановленных форм (исходное обогащение 95,6 ат. g в сотни раз превышает обогащение окисленных форм), то отсюда следует, что повышение точности определения количества азота, окисленного в растениях, в данном спасо в произошло путем снижения количества И из других, помимо окисленного азота, источников.

Для того, чтобы рассчитать точность определения окисленного азота в 16,1 r cyxux листьев картофеля (т. е. на 1000 растений), использовали следующие данные: содержание нитратов — 1,72 ф; избыток обогащения

N сернокислого аммония, введенного в питательную среду вначале «ультивирования растений картавя — 95,2 ат. ; избыток обогащения М нитратного азота растений, определенного а конце вегетации способом по изобретению — 0,055 ат.$ и известным — 0,036 ат. $, Далее рассчитывали следующее: общее количество нитратного азота — 230,0 (мг/1000 расте100 ний) где 1000 — коэффициент перевода граммов в милли граммы; количество избыточного И, содержа15 щегося в нитратах согласно известному способу;

290,0 0,096 1000

100

= 278,4 (мкг/1000 растений);

5 количество азота, окисленного s расте.ниях согласно известному способу

= 292,4 (мкг/1000 растений);

278,4 100

1 количество избыточного 15N, содержащегося в нитратах согласно предлагаемому способу;

290,0 0,055 f000 f00

= 169,5 (мкг/1000 растений);

20 количество азота, окисленного в растениях согласно предлагаемому способу

159,6 100

= 167,5 (мкг/1000 растений};

25 точность известного способа(принимая точность предлагаемого способа за f00 ) Таким образом, способ по изобретению повышает точность определения более чем . на 43$.

35 Формула изоб рете ни я

Способ определения азота, окисленно-. го в растении, включающий отбор пробы растения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде, содержащей

40 восстановленный азот, меченый Н, гомо1 гениэацию пробы, экстракцию водорастворимых соединений, осаждение белка, фильтрацию, восстановление азота, окисленного в растении, и масс-спектрометриче45 ский анализ аммиака на содержание N, 15 отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения, после фильтрации в растительную пробу вводят окись магния и сернокйСлый аммоний, со50 держащий 5È природного обогащения, кипятят, а восстановление азота, окисленного в растении, осуществляется путем паровой дистилляции после введения в пробу окиси магния и сплава Деварда.

v v

Ф Х «II

I- „Q

Ф

ООФ у Ф хво

I-»

«ох

О «Ъ Ф

Y ««I

О о с

О

>Я

2 х

«v

Ф

«CI. «II

Q о у З ф. о х ь

Д С5 Щ

3»

«С Ъ о в .

>go

Ф («II

xS o

И уФо

«а 3.

ОО хЖ

-о в Хсъ аao е

S е» о Ф

z.x i

X Ф у О

Ф «II о

Ф о

О о

Ф

У

«II

«0

OÞ

Y c0 х о о о

2 ф а

3 Ю Щ

I OO i

Яео

Q и

Q с

1 о о

v о

C и

S

Z «II

S. «II

X IФ о

03

Щ о 2««Ъ

lO о сО а «»

1 щ

Фй х

S QO х, х

Ф.Х Л

3(х О

«II и Ф О ««I V

«О

Облоу

Ф

Z

l о

«о

«II - СЪ

Оа

О ЕО

1Я

Ф S

С«(» Ф

«5

Ха О

О а.L. л Г

Ф

ОО«

О

«

Щ

I»

S о

О

С0

CL о

l о

Ф с о

I» о х о

« Q

«II. з х . «II Ф

„Sz

««I Ф а О-, I»

S. х

«Il о

«II Z о

О « о з

О а о Ф в I» о О

X щ с о о.

Б

S х с

О!

О з а

I- C" е з а о «съ

X о - Ф съ хо

«L O,Х

%» °

° с z

x «» Ф

«»

Ф.у v - й Ф Ф

СЧ С

ОЪ С3

C4 CV

«O CO hl я съ оъ оо съ

СЧ CC W

«0 С. LO акоп оо

60 «О

С«Ъ С> С«Ъ

Ф С Ъ С ) С"Ъ Ю

«O EO «O

ОСЪО

С:Ъ О О

У» ОЪ «О

СМ с СМ 3 Ф- Ф»

О ОС:Ъ

C4 3 » 00 ИЪ о съ

С«Ъ«О „-.."

«хк

>„x о

5 о.

С-Д Y

1644В12