Способ разделения пула лимфоцитов крови и устройство для его осуществления

 

Изобретение относится к медицине, а именно к имунологии. Цель изобретения - обеспечение обогащения В-клеточной суспензии. В устройстве используется пластиковый шприц 1 с поршнем 2. равномерно заполненный синтетическим веществом 3. Вымывание производится последовательно инкубационной смесью (среда 199 + мужская сыворотка 4-й группы крови), нагретой до 37°С, затем той же инкубационной смесью, охлажденной до +4°С. посредством проталкивания поршнем 2 через волоконный фильтр под напором. 2 с.п. ф-лы. 1 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ, РЕСПУБЛИК (51)5 А 61 М 5/00

ГОСУДАРСТВЕ I+IblA КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ f 2 (21) 4433205/14 (22) 27.05.88 (46) 30,05.91. Бюл. ЬЬ 20 (71) Киевский научно-исследовательский инстигут урологии и нефрологии (72) Г.Н.Дранник, Е.П.Павленко и E.ß.Áàðàí (53) 615.472(088.8) (56) Зарецкая Ю.M. Клиническая иммунология. М.: Медицина, 1983. (54) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ ПУЛА ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ И УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЕГО

ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

„„ « Ц „„1651913 А1 (57)- Изобретение относится к медицине, а именно к имунологии. Цель изобретения— обеспечение обогащения В-клеточной сус- пензии. В устройстве используется пластиковый шприц 1 с поршнем 2, равномерно заполненный синтетическим веществом 3.

Вымывание производится последовательно инкубационной смесью (среда 199 + мужская сыворотка 4-й группы крови), нагретой до 37 С, затем той же инкубационной смесью, охлажденной до+4 С. посредством проталкивания поршнем 2 через волоконный фильтр под напором. 2 с.п. ф-лы. 1 ил.

0 (Я

6д

1651913

° Составитель В. Баганов

Редактор Т, Парфенова Техред М.Моргентал Корректор,С. Черни

Заказ 1731 Тираж 395 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для разделения пула лимфоцитов на популяции, обогащенные Т- и

В-клетками.

Цель изобретения — обеспечение обогащения В-клеточной суспензии.

На чертеже изображено устройство для разделения пула лимфоцитов на популяции.

Устройство состоит из пластикового цилиндрического корпуса 1, поршня 2, синтетического вещества 3 и заполнено устройство лимфоцитарной суспензией, Способ разделения пула лимфоцитов на популяции осуществляется следующим образом.

Аефибрированную кровь разводят в отношении 1;2 5 средой 199 и выделяют лимфоциты в градиенте фиколурографина и доводятдо концентрации 2х10 в 1 мм, разводя средой 199,,содержащей 5 мужской сыворотки 4-й группы крови. В качестве "колонки" используют пластиковый шприц на 1 мм с поршнем, 100 мг синтетического вещества тщательно разволокняют и набивают им рыхло "колонку", затем смачивают его раствором Хенкса так, чтобы не было пузырей (аналогично прототипу). "Колонку" промы вают последовательно 10-15 мл раствора Хенкса, 5 мл инкубационной смеси (среда 199+5 мужской сыворотки 4-й группы крови), нагретой до 37 С. В "колонку" по каплям приливают 1 мл — 0,5 мл суспензии лимфоцитов, затем "колонку" помещают в горизонтальном положении на чашку Петри и инкубируют 30-60 мин при

+37 С. В штатив ставят 3 пробирки, "колонку" помещают в вертикальном положении

5 над пробиркой Ф 1 и промывают по каплям

5 мл инкубационной смеси, подогретой до

+37 С, затем "колонку" над пробиркой М 2 промывают 5 мл инкубационной смеси при

+37 С, а над другой пробиркой промывают

10 "колонку" 5 мл инкубационной смеси, охлажденной до +4 С, проталкивая поршнем шприца и выжимая таким образом всю жидкость из "колонки". При этом содержание

В-лимфоцитов нарастает от пробы к пробе

15 так, что в пробирке Ь 1 содержатся Т-лимфоциты, а в пробирке М.3 — B-лимфоциты.

Формула изобретения

1. Способ разделения пула лимфоцитов

20 крови путем промывания и фильтрации на волоконном фильтре, отличающийся тем, что, с целью обеспечения обогащения

В-клеточной суспензии, промывание осуществляют инкубационной смесью. состоящей

25 из среды 199 и мужской сыворотки 4 группы крови при 37 С, затем эту операцию повторяют при+4 С.

2. Устройство для разделения пула лимфоцитов крови, состоящее из цилиндриче30 ского корпуса и волоконного фильтра, размещенного в полости цилиндра, от л ич а ю щ е е с я тем, что; с целью обогащения

В-клеточной суспензии, в него введен поршень, а волокна ориентированы вдоль кор35 пуса.,