Способ приготовления плотной питательной среды для культивирования микроорганизмов

 

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при производстве микробиологических питательных сред. Цель изобретения - ускорение способа. В качестве уплотнителя используют полиакриламидный гель. Его получают путем сополимеризации акриламида и N,N -метиленбисакриламида, затем гель отмывают и пропитывают жидкой питательной средой, состав которой зависит от вида микроорганизма . Помимо основного состава в питательную среду дополнительно вводят полиэтиленоксид в количестве 0,02-J,2 г/л среды. g (Л

„.SU„„1654

СОЮЗ COBETCHHX

РЕСПУБЛИК

А1 (у1)$ С 12 N 1/20

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ГРИ ГКНТ СССР (21) 418224 7/13 (22) 30.01.87 (46) 07.06.91. Бюл. У 21 (71) Киевский медицинский институт им. акад. А.А. Богомольца (72) В.В.Гашинский, В.П.1))иробоков, Н.Н.Марченко, В.Г.Войцеховский, Т.И.Крайнюкова и В.В.Онищенко (53) 576.8.093(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

9 977466, кл . С ()8 F 22 )!56, 1979 . (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЛОТНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в производстве микробиологических питательных сред.

Цель изобретения — ускоре в-:е способа.

Пример 1. Для получения полиакриламидного геля готовят три раствора А,В,С по следующей методике (указанные количества исходных компонентов иэ расчета на 100 мл раствора).

Приготовление раствора А. 0,5 мп

N,N,N,N -тетраметилэтилендиамина ( (ТЕМЕД) растворяют в 99,5 мл дистиллированной воды или физиологическом растворе.

Приготовление раствора В. 0,735 г

N,N -метиленбисакриламида (HhA) растворяют в 50 мп дистиллированной воды или физиологического раствора, подогревая до 60 С, добавляют, ?8 г акрил2 (57) Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при производстве микробиологических питательных сред. Цель изобретения ускорение способа. В качестве уплотнителя используют полиакриламидный гель. его получают путем сополимериэации акриламида и N,N --метиленбисакриламида, затем гель отмывают и про питывают жидкой питательной средой, состав которой зависит от вида микроорганизма. Помимо основного состава в питательную среду дополнительно вводят полиэтиленоксид в количестве

0,0 - ),2 г/л среды. амида (АА), размешивают до полного растворения . Полученный раствор фильтруют, доводят до объема 1!)!) мл дистиллированной водой или физиологическим раствором.

Приготовление раствора С. !), 14 г персульфата аммония растворяют в

100 мп дистиллированной воды или физиологического раствора.

Иэ приготовленных pRcTBopoB готовят реакционную смесь.

Реакционную смесь заливают в hopму, где происходит радикальная сополимеризация до образования геля в форме дисков. Полученные диски отмывают дистиллированной водой или физиологическим раствором в течение 1 ч, Полученный гель используют в качестве основы для получения плотной питательной среды для культивировав ния микроорганизмов.

3 1654332 4

Способ приготовления плотной питательной среды дпя культивирования микроорганизмов, включающий сополимериэацию акриламида и N,N -метилен-! бисакриламида, с последующей отмывкой полученного геля и пропиткой его жидкой питательной средой, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью ускорения способа, для пропитки геля используют жидкую питательную среду, дополнитель,но содержащую 0,020,2 г/л среды полиэтиленоксида.

Составитель Г.Смирнова

Техред Л.0лнйнык Корректор М.Самборская

Редактор Н.Гунько

Заказ 1930 Тираж 381 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

Пропитку дисков осуществляют трип.тическим переваром по Хоттингеру, содержащем 400 мг7. аминного азота и

0,2 г/л полиэтиленоксида, в течение

3 ч при 56 С. Пропитанные диски стерилизуют в течение 30 мин, подсушивают и засевают золотистый стафилококк.

Плотная питательная среда обладает хорошими адгезионными свойствами, эластичностью, плотностью, прозрачностью, ярко выражен эффект скольжения при посеве микроорганизмов бактериологической петлей беэ повреждения поверхности. Культура вырастает типичная, полностью снимается петлей.

Пример 2. Получение питательной среды на основе геля осуществляют аналогично примеру 1 эа исключением того, что пропитку дисков проводят в мясо-пептонном бульоне, содержащем

0,2 г/л полиэтиленоксипа.

Плотная среда питательная, обладает хорошими адгеэионными свойствами, эластичностью, плотностью, прозрачностью, ярко выражен эффект скольжения при посеве микроорганизмов бактериологической петлей без повреждения поверхности. Стафилококк, использованный в качестве тест-культуры, вырастает в виде типичных колоний, полностью снимающихся петлей.

Пример 3. Пропитку дисков осуществляют мясо-пептонным бульоном

1 содержащим 0,1 г/л полиэтиленоксида или полиэтиленгликоля, в течение 3 ч при 5б С. Питательную среду стерилиэуют в течение 30 мин.

11олученная плотная питательная среда обладает хорошими адгеэионными св ойс т вами, эластичностью, плот нос т ью, прозрачностью, ярко выражен при посеве микроорганизмов эффект скольжения бактериологической петли без повреждения поверхности среды.

В качестве тест-микробов используют кишечную палочку ° Культура растет в виде типичных колоний, хорошо снимается с поверхности среды.

Пример 4. Питательную среду готовят аналогично примеру 1 эа исключением того, что диски геля пропитывают мясо-пептонным бульоном, содержащем 0,02 г/л полиэтиленоксида.

Плотная питательная среда обладает хорошими адгезионными свойствами, эластичностью, плотностью, прозрачностью, ярко выражен при посеве микроорганизмов эффект скольжения бактериологической петли без повреждения поверхности среды.

В качестве тест-микроба используют Вас .subtilis. Культура растет в виде типичных колоний, хорошо снимается с поверхности среды.

Таким образом, использование предлагаемого способа позволяет упростить и ускорить процесс приготовления питательных сред на основе полиакриламидного геля без изменения качественных характеристик как геля, так и питательных сред в целом.

Формула изобретения