Способ диагностики степени тяжести вирусного гепатита в

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике вирусного гепатита. Цель - ранняя диагностика степени тяжести вирусного гепатита B. Способ заключается в том, что в сыворотке крови больного определяют титр гомореактантов и титр R-белков и при титре гомореактантов 1:16 - 1:128 и титре R-белков 1:6400 - 1:12800 диагностируют легкую форму заболевания, при титре гомореактантов 1:256 - 1:512 и титре R-белков 1:25600 - среднетяжелую форму, а при титре гомореактантов 1:1024 - 1:8192 и титре R-белков 1:51200 - 1:102400 - тяжелую форму вирусного гепатита B. Способ позволяет в более ранние сроки диагностировать заболевание. 1 табл.

1. О(ОЗ СОВЕТ КИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕС((УБЛИК (Я(» G 01 N 33/53

ГОСУДЛРСТЯЕННЫИ КОМИТЕТ

Г1О ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ (IРИ ГКНТ СССР

:Ц у( (з >

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1О ) (fQ (21) 4662993/14 (22) 16.03.89 (46) 23.08.91. Бюл.%31 (71) Курский государственный медицинский институт и Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи (72) Л,Ф.Шамара, Д,Н.Евнин, А.Я.Кульберг и Л.М.Бартова (53) 615.373 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР йт 583964, кл. А 61 В 5/ОО. (54) СПОСОБ ДИГНОСТИКИ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА В

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике вирусного гепатита.

Цель изобретения — ранняя диагностика степени тяжести вирусного гепатита В.

Способ осуществляют следующим образом. Из вены больного берут кровь(3 -5 мл), отделяют сыворотку и определяют в ней титр гомореактантов и титр R-белков.

Титрование гомореактантов проводят в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), используя резус-положительные эритроциты человека 0(1) группы, сенсибилизированные Г(ав()р-фрагментами антирезусного иммуноглобулина человека.

Резус-положительные эритроциты человека

О(1) группы отмывают три раза изотоническим раствором хлорида натрия и получают

4 (-ную суспензию эритроцитов. Полученную суспенэию инкубируют с Г(ав()г-фрагментом антирезусного иммуноглобулина человека (2 мгlмл) в течение 1 ч при комнат..,5U„„1672367 А1 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике вирусного гепатита. Цель — ранняя диагностика степени тяжести вирусного гепатита В. Способ заключается в том, что в сыворотке крови больного определяют титр гомореактантов и титр R-белков и при титре гомореактантов

1:16 — 1:128 и титре R-белков 1:6400—

1:12800 диагностируют легкую форму заболевания, при титре гомореактантов 1:256 — 1:

512 и титре R-белков 1:25600— среднетяжелую форму, а при титре гомореактантов 1:1024 — 1:8192 и титре R-белков

1:51200 — 1:102400 — тяжелую форму вирусного гепатита В. Способ позволяет в более ранwe сроки диагностировать заболевание.. 1 табл, ной температуре. После инкубации эритроциты четырехкратно отмывают изотоническим раствором хлорида натрия, готовят

4 -ную суспензию и используют в реакции.

Сыворотки крови больных инактивируют при 56 С в течение 30 мин и адсорбируют эритроцитами человека (резус-положител ьными 0(1) группы). Затем исследуемые сыворотки разводят 1 g,-ной нормальной кроличьей сывороткой в изотоническом растворе хлорида натрия посредством двухкратных серийных разведений.

Нормальную кроличью сыворотку перед использованием также инактивируют при

56 С в течение 30 мин и адсорбируют эритроцитами человека. 8 каждую лунку с разведениями исследуемой сыворотки добавляют

0,025 мл суспенэии эритроцитов человека, сенсибилизированных F(ae )2-фрагменI том антирезусного иммуноглобулина человека, тщательно перемешивают и

1672367

55 оставляют на 18 ч при 4"С, Реакцию учитывают визуально.

Титр R-белков в сыворотке крови определяют по ингибированию реакции гемагглютинации между резус-положительными эритроцитами человека 0(1) группы и анти-R сывороткой, полученной иммунизацией кроликов R-белками человека (4). Резус-положительные эритроциты человека 0(1) группы отмывают три раза иэотоническим раствором хлорида натрия и получают 4 ную суспензию эритроцитов. В лунку агглютинационной доски вносят по 0,1 мл изотонического раствора хлорида натрия, затем в 1-ю лунку добавляют 0,1 мл сыворотки больного (в разведении 1:50) и готовят серию двухкратных разведений. В каждую лунку добавляют 0,1 мл анти-R сыворотки в разведении, превышающем рабочее в 2 раза. В каждую лунку добавляют 0,025 мл

4 -ной суспензии эритроцитов человека. тщательно перемешивают и оставляют на

18 ч при 4 С. Реакцию учитывают визуально. Последнее разведение сыворотки больного, которое еще дает ингибирующий эффект, принимают за титр R-белков.

Пример 1. Больная Л. поступила в гематологическое отделение на 6-й день болезни с жалобами на общую слабость, недомогание. Обьективно: состояние удовлетворительное, легкая желтушность кожи и склер, печень на 2 сл ниже края реберной дуги, мягкая, при пальпации чувствительна, Со стороны других органов патологии не в явлено. Билирубин общий 79,2 мкмоль/л (прямой 72,0; непрямой 7.2); АлАТ 5,5

MMohb/(÷.ë.); тимоловая проба 5 ед. протромбиновый индекс 857 o, Обнаружен HBSAg.

Длительность желтухи 11 дн.

Диагноз; Вирусный гепатит В(HBSAg+), легкая форма. Титр гомореактантов в сыворотке крови 1:64, титр R-белков 1:12800.

Изменения у данной больной значений иммунохимических показателей соответствуют таковым при легкой форме заболевания.

Пример 2. Больной А., 41 год. В анамнезе — протезирование зубов. Преджелтушный период 10дн. Предъявлял жалобы на тошноту, отсутствие аппетита, боли в животе, кожный зуд, сонливость. Обьективно: кожа и склеры интенсивно желтушны.

Печень на 3 см ниже края реберной дуги. мягкой консистенции, селезенка не увеличена. В крови: лейкоциты 4,4 х 10 /л; СОЭ

3 мм/ч: билирубин 316,4 мкмоль/л (прямой

248,5; непрямой 67,9): АлАТ 5,8 ммоль/(ч.л.); тимоловая проба 18 ед; протромбиновый индекс 577,. Длительность желтухи 56 дн, 5

Диагноз: вирусный гепатит B(HBSAg+), тяжелая форма. Титр гомореактантов у больного 1:1024, титр R-белков 1;52100, что соответствует изменениям, характерным для тяжелой формы вирусного гепатита В.

Результаты обследования 79 больных острым вирусным гепатитом представлены в таблице.

Как видно иэ приведенных данных, титры гомореактантов и титры R-белков находятся в прямой зависимости от степени тяжести вирусного гепатита В и достоверно отличаются при легкой, среднетяжелой и тяжелой форме заболевания (р < 0,01 — 0;001).

Уровень гомореактантов и R-белков при различных формах тяжести вирусного гепатита В показан в таблице.

Предлагаемый способ позволяет диагностировать степень тяжести вирусного гепатита В уже на 2 — 3-й день желтушного периода, когда еще не происходит разрушение лизосом клеток печени и не наблюдается существенного увеличения активности тканевых ферментов в сыворотке крови, в то время как нарушения метаболизма гепатоцитов в этот период сопровождаются повышением в сыворотке крови уровня фрагментов клеточных рецепторов (R-белков) и их комплексов с иммуноглобулинами— гомореактантов.

Предлагаемый способ может быть использован в практической работе инфекционных и гематологических отделений.

Правильная и своевременная диагностика степени тяжести вирусного гепатита В позволит выбрать адекватную лечебную тактику, что сократит пребывание больного в стационаре и предотвратит летальный исход.

Формула изобретения

Способ диагностики степени тяжести вирусного гепатита В, включающий исследование сыворотки крови, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ранней диагностики, в сыворотке крови определяют титр гомореактантов и титр R-белков и при титре гомореактантов 1:16 — 1.128 и титре R-белков

1:6400 — 1:12800 диагностируют легкую форму вирусного гепатита В, при титре гемореактантов 1:256 -- 1:512 и титре R-белков 1;25600 -- средне-. тяжелую форму, а при титре гомореактантов 1;1024 — 1:8192 и при титре R-белков 1:51200 — 1:102400 — тяжелую форму.

1672367

Составитель И.Башкаев

Техред М.Моргентал Корректор В.Гирняк

Редактор А.Козориз

Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина. 101

Заказ 2836 Тираж 391 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5