Способ получения семян самонесовместимых форм петунии гибридной
Изобретение относится к биологии, а именно к прикладной генетике, и может быть использовано в сельском хозяйстве, в плодоводстве и цветоводстве для полунения инбрецного потомства от самонеопыляющихся растений, в частности у петунии гибридной . Цель изобретения - повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения. При получении семян опыление проводят смесью собственной пыльцы и совместимого компонента, предварительно обработанного у-излучением, в соотношении 1:1. Совместимый компонент обрабатывают у-излучением в дозе 5000- 6000 Гр при мощности дозы 0,3 Гр/с в течение 4,5-5,5 ч. 2 ил.. 1 табл.
COI03 СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)л А 01 Н 1/02
ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4720489/13 (22) 19.07,89 (46) 23.11.91. Бюл. N 43 (71) Киевский медицинский институт им.акад, А.А.Богомольца (72) С.В.Андрейченко (53) 631.521(088.8) (56) Доклады АН УССР, сер, Б., 1982, Р4. 4, с.56 — 58. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЕМЯН САМОНЕСОВМЕСТИМЫХ ФОРМ ПЕТУНИИ ГИБРИДНОЙ (57) Изобретение относится к биологии, а именно к прикладной генетике, и может
Изобретение относится к биологии, а именно к прикладной генетике, и может быть использовано в сельском хозяйстве, в плОдоводстве и цветоводстведля получения инбредного потомства от самонеопыляющихся растений, в частности к петунии гибридной.
Целью изобретения является повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения.
На фиг,1 представлена дозовая зависимость влияния 1"облучения совместимого компонента пыльцесмеси на среднее количество жизнеспособных семян, образующееся при опылении одного цветка петунии гибридной; на фиг.2 — дозовая кривая роста пыльцевых трубок самонесовместимой и облученной совместимой пыльцы петунии гибридной в пестике растения петунии гибридной самонесовместимой после опыления.
Способ осуществляется следующим образом.
„„SU „„1692402 А1 быть использовано в сельском хозяйстве, в плодоводстве и цветоводстве для получения инбре1ного потомства от самонеопыляющихся растений, в частности у петунии гибридной. Цель изобретения — повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения. При получении семян опыление проводят смесью собственной пыльцы и совместимого компонента, предварительно обработанного у-излучением, в соотношении 1:1, Совместимый компонент обрабатывают у -излучением в дозе 50006000 Гр при мощности дозы 0,3 Гр/с в течение 4,5 — 5,5 ч, 2 ил., 1 табл.
Для сбора пыльцы петунии гибридной срезают бутонизированные цветки непосредственно перед их раскрытием. Еще закрытые пыльники помещают на сутки в чашки Петри в условиях комнатной температуры и нормального давления, Из растрескавшихся пыльников производят вытрушивание пыльцы путем быстрого ручного перемещения чашки i етри в разные стороны, Собранную пыльцу хранят при температуре -20 С в стеклянных плотных закрытых боксах. Для использования пыльцы ее перед началом эксперимента вь держивают в течение 1 с при комнатной температуре и
807,-ной влажности воздуха. Облучение проводят 1 -радиацией в стеклянных боксах дозами 5000 — 6000 Гр в течение 4,5 — 5,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с.
Облученную пыльцу смешивают в соотноШении 1:1 со свежесобранной пыльцой самонесовместимых растений и сразу проводят опыление пестиков самонесовместимых растений приготовленной смесью, Облученную пыльцу собирают с растений, 1692402 перекрестно совместимых с растениями из самонесовместимого клона, Пример 1, Для сбора пыльцы петунии гибридной срезают бутонизированные цветки перед самым раскрытием. Пыльники помещают на сутки в чашки Петри при комнатной температуре на 24 — 28 ч после того, как их извлекли из цветков. Вытрушивание пыльцы из растрескавшихся пыльников проводят вручную путем резких перемешений чашек Петри, Собранную пыльцу помещают в стеклянные бюксы и облучали
1радиацией Со с мощностью дозы 0,3
Гр/с в дозе 2000 Гр в течение 1,8 ч. Облученную пыльцу смешивают с аналогично собранной пыльцой самонесовместимых растений в соотношении 1:1, Затем проводят опыление пестиков самонесовместимых растений полученной смесью, Результаты опыления показали, что плоды образуются в 96% случаев после про ведения опылений пыльцесмесями, При этом количество плодов с семенами составляло 68%, а в остальных плодах семян обнаружено не было, Среднее количество семян в плоде равнялось 9 + 6. Всхожесть семян
66%, Отмечено большое количество разрушенных и пустых семян, а также семян с деградировавшим зародышем и эндоспермом (таблица и фиг.1).
Путем окраски срезанных, предварительно опыленных пестиков с помощью флуоресцентного красителя анилинового голубого показано, что пыльцевые трубки совместимой пыльцы, облученной в дозе
2000 Гр за 1,8 ч, сохраняют способность дорастать до завязи и проникать в семяпочки (фиг.2). На фиг.2 также видно, что пыльцевые трубки самонесовместимой пыльцы при самостоятельном росте в пестике пре- кращают свое движение чуть ниже середины столбика пестика, Пример 2, Пыльцу петунии гибридной собирают из пыльников по методике, описанной в примере 1. Облучение совместимого компонента для пыльцесмеси проводят у-радиацией Со в дозе 4000 Гр в течение 3,6 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с. После этого проводят опыление самонесовместимой петунии гибридной смесью из обученной совместимой M со1эственной самонесовместимой пыльцы в соотношении 1;1.
Результаты опыления показывают, что образования плодов происходят в 98% случаев. При этом в 72% случаев образуются семенные плоды, тогда как в остальных плодах семян обнаружено не было (таблица).
Количество семян в плодах не превышало
29 и в среднем составляло 22 семян на плод.
10 1 Р
В плодах отмечено наличие большого количества пустых семян без зародыша, а также разрушенных семян. Путем окраски срезанных опыленных пестиков с помощью краси-. теля анилинового голубого показано, что пыльцевые трубки облученной совместимой пыльцы после применения дозы 4000 Гр в течение 3,6 ч сохраняют способность дорастать.до завязи и проникать в семяпочки (фиг.1 и 2).
Пример 3, Пыльцу петунии гибридной собирают из пыльников по методике, описанной в примере 1, Облучение совместимого компонента для пыльцесмеси проводят дозой в 5000 Гр в течение 4,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с, После этого проводят опыление пестиков растений самонесовместимого клона петунии гибридной пыльцесмесью из облученной совместимой и самонесовместимой пыльцы в соотношении
1:1.
Отмечено появление плодов для вех опылений. При этом количество плодов с семенами составляет 96%. Остальные характеризовались полным отсутствием семян или их остатками, Количество семян в плодах в среднем составляет 80 + 17. Семена характеризуются высокой всхожестью.
Отмечено уменьшение в плодах пустых и разрушенных семян по сравнению с использованием дозы 4000 Гр за 3,6 ч. В результате всхожесть семян достигла 88% (таблица и фиг.1).
Путем проведения окраски срезанных пестиков после их опыления облученной в дозе 5000 Гр за 4,5 ч совместимой пыльцой с помощью красителя анилинового голубого показано, что рост пыльцевых трубок продолжается до завязи (фиг,2).
Пример 4. Пыльцу собирают из пыльника петунии гибридной по методике; описанной в примере 1. Совместимую пыльцу, собранную с перекрестно совместимых с опыляемым клоном растений, облучают дозой 6000 Гр в течение 5,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с. После облучения проводят смешивание облученного компонента с самонесовместимой пыльцой в соотношении
1,1 и полученной смесью опыляют самонесовместимые растения. Отмечено появление плодов для всех опылений. Количество семенных плодов достигает 96% от всего количества. Среднее количество семян в плодах равняется 85 ь 15 (таблица). Всхожесть семян достигла 90%. По методике с использованием флуоресцентного красителя анилинового голубого определено, что рост пыльцевых трубок облученной совместимой пыльцы происходит до завязи, 1692402
Среднее количество образовавшихся в одном опылении жизнеспособных семян, шт.
Всхожесть семян, Среднее количество семян, образовавшихся в одном опылении, шт
Количество плодов с семенами от общего числа опылений, Количество образовавшихся плодов от общего числа опылений, О
Доза, Гр
1200 (базовый объект) 2000
4000
5000
5500
6000
7000
8000
8»-6
6»-4
15»-5
70+15
71 »-15
77 »- 14
1»-1
63 ":5
66»68» 4
88»-9
88»-6
90»-8
87 »-7
12 » 10
9»-6
22 +.8
79 +17
81+17
85 ="15
1»-t
93
98
99
98
21
87
68
93
96
11
Пример 5, Сбор пыльцы осуществляют по методике, описанной.в примере 1, Совместимую пыльцу облучают в дозе 7000
Гр в течение 6,4 ч при мощности дозы у-ра.диации Со 0,3 Гр/с..После облучения про. водят смешивание облученного компонента с самонесовместимой пыльцой в соотношении 1:1 и полученной смесью опыляют самонесовместимые растения.
Отмечено резкое уменьшение количества образовавшихся плодов в опылениях, причем количество плодов с семенами сократилось до 11, Количество семян в плоде составляет 3» 2. В то же время всхожесть семян осталась на уровне 87, что указывает на низкое содержание в плодах неполнеценных семян (таблица и фиг.1).
Использование предлагаемого способа позволит получить специалистам-селекционерам целый ряд преимуществ по сравнению с известным.
Это повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения в
5 — 6 раэ по сравнению с применениэм известного способа.
10 Уменьшение затрат на облучение V-ðàдиацией за счет сокращения времени работы облучателя, и как следствие этого, сокращения времени работы обслуживающего персонала, 15 Уменьшение времени эксплуатации оборудования облучателя и подсобных помещений, т.е. снижение амортизационных расходов.
Формула изобретения
20 Способ получения семян самонесовместимых форм петунии гибридной, включающий опыление смесью собственной пыльцы и пыльцы совместимого компонента, предварительно обработанного у-излучением, в
25 соотношении 1:1, отл и ч а ю щи и ся тем, что, с целью повышения выхода жизнеспособных семян материнского происхождения, совместимый компонент обрабатывают )-излучением в дозе 5000 — 6000 Гр при
30 мощности дозы 0,3 Гр/с в течение 4,5-5,5 ч, 1б92402 го
Доза, I p
Фиг,/
7 8 9 х103
Корректор Т,Палий
Редактор А.Гратилло
Заказ 4019 Тираж Подписное
ВНИИП Л Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул,Гагарина, 101
100 go 80 70 з 60 50 90
4 30
2 3 9 о 6 7 g i@3
Доза,9 сс -саиосодиестииая, Си" .саиоиесооиестииах оьиьца 4
Составитель Е,Шкрадюк
Техред M.Ìîðãåíòàë