Способ определения активности нейтрофилов

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики iинфекционно-воспалительных процессов у больных лейкозами. Целью изобретения является повышение точности способа. Эта цель достигается тем, что по способу определения нейтрофила путем постановки цитологической реакции и микроскопического исследования мазков крови оценивают активность никотинамидадениндииуклеотидфосфат оксида и количество реагирующих на фермент клеток и лри увеличении количества положительно реагирующих клеток более чем в 2 раза и интенсивности реакции более чем в 3 раза констатируют активность нейтрофилов.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4631912/14 (22) 04.01.89 (46) 23.02.92. Бюл. М 7

{71) Киевский государственный институт усовершенствования врачей (72) С.А.Гусева, С.Н.Гайдукова и А.А.Федько (53) 615.475(088.8) (56) Архив патологии. M. Медицина, 1989, hh 11, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики

Изобретение относится к области медицийы и может быть использовано для диагностики инфекционно-воспалительных процессов у больных лейкозами.

Целью изобретения является повышение точности способа, Пример. Больная Б., 34 лет, поступила в гематологическое отделение с жалобами на резкую общую слабость, повышение температуры тела, боли в горле при глотании.

Больна в течение двух недель. При осмотре состояние больной тяжелое. Слизистая зева резко гиперемирована, миндалины разрыхлены, с гнойным отделяемым. Провели забор периферической крови, фиксировали свежеприготовленные на воздухе мазки в

60 -ном растворе ацетона в течение 60 с.

Сливали ацетбн и высушивали мазки, на которые наносили на 2 ч при 37 С инкубационную смесь следующего состава: ЙАДФН (никотинамидадениндинуклеотидфосфат. восстановленный) 4 мг; 0,1 М фосфатный буфер {рН 7,4) 0,8 мл; нитросиний тетразо(„, ЯЦ„„1713557 А1 (ы)э А 61 В 10/00 инфекционно-воспалительных процессов у больных. лейкозами. Целью изобретения является повышение точности способа. Эта цель достигается тем, что по способу определения нейтрофила путем постановки цитологической реакции и микроскопического исследования мазков крови оценивают активность никотинамидадениндинуклеотидфосфат оксида и количество реагирующих на фермент клеток и при увеличении количества положительно реагирующих клеток более чем в 2 раза и.интенсивности реакции более чем в 3 раза констатируют активность нейтрофилов. лий 1 мг/мл 1,0 мл; дистиллированная вода С.. до 2,0 мл. Затем промывали мазки в дистиллированной воде, докрашивали ядра и высушивали. НАДФН-огсидаза при микроскопии локализуется в цитоплазме клеток в виде синих гранул диформаэана.

Оценка содержания НАДФН-оксидазы аюай и активность ее проводили на основании подсчета 100 нейтрофилов с учетом интенсивности окраски по четырехбалльной сис- СЛ теме: интенсивная окраска соответствует Ql высокому(+++), средняя — умеренному(++), с слабая — незначительному (+) содержанию фермента. Отрицательная окраска обозначается О.

Средний гистохимический коэффициент (СГК) вычисляли по формуле АстальдиВерга

П, 3A+2f +1B+Of

100 где 3, 2, 1 и 0 — степень интенсивности окраски (от+++ до О); буквы — число клеток с

171

Составитель И.Мелемука

Техред М.Моргентал Корректор Т.Палий

Редактор Л.Гратилло

Заказ 643 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 той или иной интенсивностью реакции;

100 — число подс1читанных клеток. Анализ крови: эр.2,9 10 /n; Нв-78г/л; ц,п.0,81 i; тромб. 176,0 10 /л, лейк, 3,2 10 /л; бласты 14 ; пэлочкоядерные нейтрофилы 2 ; сегментоядерные нейтрофилы (с/я) 107, моноциты 2ф, лимфоциты 68, плазматические клетки 4, СОЭ 48 мм/ч, Миелограмма; бласты 62 ; c/ÿ 1,0ф; лимфоциты

31 ; ретикулярные клетки 6,0 ; плазматические клетки 1,0 .

На основании данных гемо- и миелограммы больной выставлен диагноз: острый миелобластный лейкоз. Осложнение: фолликулярная ангина, При исследовании активности НАДФНоксидазы получены следующие результаты: количество положительно реагирующих

3557 4 клеток 78, т.е. превышает норму (35-50 ) в 2 раза, а интенсивность реакции (СГК)—

1,52, т.е. превышает нормальные значения (0,43-0,57) в 3 раза, 5

Формула изобретения

Способ определения активности нейтрофилов путем постановки цитологической реакции и микроскопического исследова10 ниямазковкрови,отличающийся тем, что; с целью повышения точности способа, оценивают активность никотинамидадениндинуклеотидфосфат оксидазы и количество реагируюырех на фермент клеток и при

15 увеличении количеств ва положительно реагирующих клеток более чем в 2 раза и интенсивности реакции более чем в 3 раза констатируют активность нейтрофилов,