Способ прогнозирования послеоперационных гнойно- воспалительных осложнений

 

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для диагностики гнойно-воспалительных процессов, прогнозирования течения раневого процесса, а также для оценки эффективности проводимого лечения ран и раневой инфекции. Целью изобретения является снижение травматичности и упрощение способа при сохранении высокой точности, Целью достигается за счет того , что через 24 ч после операции в крови определяют удельную активность супероксиддисмутазы до и после бактериальной нагрузки крови, рассчитывают отношение первого показателя ко второму и при значении отношения больше единицы диагностируют гнойно-воспалительные осложнения. Основными преимуществами предложенного способа являются упрощение способа (однократное взятие крови), снижение травматизации и сокращение времени исследования при сохранении высокой точности, равной 88%. Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33/68

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ!

1 () О !

Ю

Ф (21) 4821182/14 (22) 06.04.90 (46) 15,05.92. Бюл. ¹ 18 (71) 1-й Московский медицинский институт ,им. И.М.Сеченова (72j А.В,Николаев, Л.А.Мамедов, В.B.Захаров, В.К.Гостищев, В.А.Комаров, Б.П,Мищенко, Л.Ф.Муляев и Ч.P.ÐàãèìîB (53) 612;015(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР N.

1490649, кл, G 01 N 33/68, 1989. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫХ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для диагностики гнойно-воспалительных процессов, прогнозирования

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для диагностики гнойно-воспалительных осложнений, прогнозирования течения раневого процесса, а также для оценки эффективности лечения ран и раневой инфекции.

Целью изобретения является снижение травматизации больного, при сохранении высокой точности.

Способ осуществляют следующим образом.

Через 24 ч после операции из вены в две пробирки по 2 мл берут кровь и смешивают с гепарином из расчета 1 ед/мл крови. Затем в первую (контрольную) пробирку добавляют 50 мкл инкубационной среды (физиологический раствор с концентрацией глюкозы 5,55 ммоль/л, хлористого кальция

„„сд „„1 734024А1 течения раневого процесса, а также для оценки эффективности проводимого лечения ран и раневой инфекции. Целью изобретения является снижение травматичности и упрощение способа при сохранении высокой точности, Целью достигается за счет того, что через 24 ч после операции в крови определяют удельную активность супероксиддисмутазы до и после бактериальной нагрузки крови, рассчитывают отношение первого показателя ко второму и при значении отношения больше единицы диагностируют гнойно-воспалительные осложнения.

Основ н ыми и реимуществами и редложен ного способа являются упрощение способа (однократное взятие крови), снижение травматизации и сокращение времени исследования при сохранении высокой точности, равной 88%, 0,9 ммоль/л и хлористого калия 4,5 ммоль/л), а во вторую (опытную пробирку для осуществления бактериальной нагрузки крови добавляют 50 мкл опсонизированных частиц микрококков, приготавливаемых. по общепринятой методике, Далее смесь в контрольной и опытной пробирках перемешивают и инкубируют 30

5 мин при 37 С. Все пробирки центрифугируют 10 мин при 2500 об/мин, Затем в полученных супернатантах определяют удельную активность СОД,в кювету спектрофотометра вносят 0,2 мл супернатанта и добавляют туда 2 мл свежеприготовленной среды, состоящей из 0,5 М Nag СОз, 10 М

ЭДТА (рН среды 10,2 и 1=30 С), а также для инициирования реакции — 50 мкл адреналина (3-10 М). Состав перемешивают и кювету помещают в ячейку спектрофотометра. При

1734024 длине волны 560 нм измеряют изменение скорости 02 — зависимого образования.

Сравнивают скорости образования адренохрома в присутствии или отсутствии объемов адренохрома в сыворотке. За единицу активности принимают объем исследуемой пробы, вызывающий 50 -ное ингибирование реакции автоокисления адреналина в

Л1 двухволновом режиме. - — 560/650 нм в г течение 1 мин, затем по стандартному графику определяют количество (в мл) супернатанта (V), вызывающее 50%-ное ингибирование этой реакции.Для подсчета удельной активности СОД дополнительно в плазме исследуемой крови биуретовым методом (5) определяют конструкцию белка следующим образом; 20 мкл плазмы разводят 1;500 фосфатным буфером, далее на 0,5 мл разбавленного раствора добавляют 0,5 мл раствора А, состоящего из 0,5%-ного сульфата меди, 0,1/о-ного тетрата винокислого натрия, 0,5 M раствора NaOH и 10/

Ма2СОз и в течение 10 мин держат при комнатной температуре. Затем в эту смесь добавляют 0,2 мл 0,11 реактива Фолина в разведении 1:9 и в течении 5 мин держат в водяной бане при 55 С. Затем охлаждают во льду в течение 2 мин и измеряют оптическую платность полученных проб на спектрофотометре при длине волны 650 нм и по калибровочной кривой определяют концентрацию белка (С) в мг/мл, Удельную актив1 ность СОД вычисляют по формуле где V — количество супернатанта, которое вызывает 50 /-ное ингибирование описанной реакции автоокисления коантиноксидазы в присутствии СОД исследуемых проб;

С вЂ” концентрация белка. Затем рассчитывают отношение СОД в первой пробирке к СОД второй пробирки и при значении отношения больше единицы диагностируют гнойно-воспалительные осложнения, Пример 1, Больной К,. 28 лет, поступил с диагнозом: острый аппендицит с явлениями перитонита, по поводу чего в тот же день был оперирован. Рана зашита послойно, наглухо. Через 24 ч после операции в плазме крови определяли активность супероксиддисмутазы до бактериальной нагрузки (СОД1) и после нее (СОД2). которые были 2,2 и 23,2. Соотношение СОД1/СОД2 (2,2/23,2) было меньше единицы (0,1), что свидетельствовало об отсутствии в ране признаков

55 гнойного воспаления, Рана зажила первичным натяжением и больной через 8 дней после операции был выписан.

Пример 2. Больной B., 48 лет, поступил с диагнозом: паховая грыжа, по поводу которой был оперирован. Через 24 ч после операции из вены взята кровь, в плазме которой определена супер оксиддисмутаза до бактериальной нагрузки (СОД1) и после нее (СОД ). После исследования выяснилось, что СОД1=0.71 эд.акт на 1 мг белка и

СОДг=0,17 ед.акт. на 1 мг белка, то соотношение СОД1/СОДг — -4,1, что свидетельствует о наличии гнойно-воспалительного процесса. На этом основании был поставлен диагноз нагноения раны. В то же время по другим клинико-лабораторным данным признаки гнойного воспаления отсутствовали, Поставленный по нашим данным диагноз нагноения раны в дальнейшем подтвержден; через 5 дней отмечались боли, гиперемия, отечность в области раны, температура тела у больного повышена до

37,6 С. Через 1 с/т рана была раскрыта по поводу нагноения. Дальнейшее лечение нагноившейся раны проводилось по общеизвестной методике, Рана зажила вторичным натяжением, Больнои был выписан через 24 дня после операции.

Предлагаемыи способ является менее травматичным и простым при сохранении высокой точности, В предлагаемом способе отсутствует этап дооперационного внутривенного взятия пробы крови, вся методика осуществляется за 1 ч 25 мин (3 ч 10 мин в прототипе), В то же время способ сохраняет высокую точность, равную 88/, Формула изобретения

Способ прогнозирования послеоперационных гнойно-зос алительных осложнений, включают,ий определение после операции активнс сти супероксиддисмутазы в крови больного, отличающийся тем, что, с целью уменьшения травматизации и упрощения способа при сохранении высокой точности, активн< сть супероксиддисмутазы определяют при добавлении в пробу оксонизированных микрококков, рассчитывают соотношение активности фермента при бактериальной нагрузке и без нее, и при значении показателя более единицы, прогнозируют развитие осложнений,