Способ определения бронхоспазма аллергического генеза при воспалительных заболеваниях легких

 

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии. Целью является повышение точности способа. Цель достигается тем, что в крови исследуют полинуклеарные лейкоциты, в которых определяют содержание катионных белков, при этом исследования проводят одновременно двух мазков, один из. которых до выявления катионных белков облучают ультрафиолетовым светом в течение 2-3 мин. При увеличении содержания катионных белков в клетках облученного мазка по отношению к необлученному на 16% и больше определяют бронхоспазм аллергического генеза. Способ значительно повышает точность диагностики .

.БЦ„, 1755098 А1

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИ Ч Е СКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 1/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ пгн гкнт сссг ""СЖксйт|т ШТЕКЩ}. Pg -ь..: .

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ с т

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬС ГВУ (21) 4110530/14 именно к пульмонологии, Целью является (22) 05.08.86 повышение точности способа. Цель достига(46} 15.08,92. Бюл. N. 30 ется тем, что в крови исследуют полинукле(71) Ялтинский научно-исследовательский арные лейкоциты, в которых определяют институт физических методов лечения и ме- содержание катионных белков, при этом исдицинской климатологии им. И.M. Сеченова следования проводят одновременно двух (72) Л.В, Ященко, 3.Н. Остапяк, Л.М. Гах и мазков, один из которых до выявления катиЛ.Ю. Подставкина .. :: . онных белков облучают ультрафиолетовым (56) Путов Н.В, и др, Руководство по пульмо- светом в течение 2 — 3 мин. При увеличении нологии, Л., 1984, с.103, -: содержания катионных белков в клетках об(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БРОНХОС- . лученного мазка по отношению к необлуПАЗМА АЛЛЕРГИЧЕСКОГО ГЕНЕЗА ПРИ ченному íà 16% и больше определяют

ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ . бронхоспазм аллергического генеза. СпоЛЕГКИХ соб значительно повышает точность диагно(57) Изобретение относится к медицйне, а стики.

Кк т °

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, Цель изобретения — повышение точности способа, Способ осуществляют следующим образом,.

Из периферической крови готовят два мазка, Оба мазка (до и после УФ-воздействия) изготовляются из одной пробы крови, взятой из пальца или вены в количестве не менее 0,2 мл с одним из используемых антикоагулянтов (гепарин, цитрат или оксалат натрия) в соотношении 10:1. Для УФ-воздействия 0,1 мл крови помещают на пред.метное стекло с лун кой и облучают в течение

2-4 мин. Через 1-2 мин после облучения кровь перемешивают (не выключая лампы)

2-кратным набором ее в пипетку. Для облучения используют ртутно-кварцевую лампу мощностью 250 Вт. Облучение производят при расстоянии 40 см от лампы до поверхности крови. Затем из оставшейся необлу.ченной порции крови и облученной готовят два мазка с последующей окраской на катионные белки по Шубичу с последующей ци- (Л тоспектрофотометрией по Шерудило и (Я определяют содержание катионных белков О в ПНЛ мазков обеих порций крови. Возмож-, О но определение содержания катионных бел- (р ков визуально с помощью микроскопа по балльной системе. При увеличении показателя содержания катионных белков в ПНЛ после воздействия УФ в сравнении с показателем содержания катионных белков без воздействия на 16% и больше диагностируют бронхоспазм аллергического характера при воспалительных заболеваниях легких.

Окраска мазков по Шубичу.

Высушенные свежеприготовленные мазки фиксируют 60-90 с 5%- a раство1755098 ром сульфосалициловой кислоты или 3-4 мин в парах формалина, тщательно промывают дистиллированной водой, высушивают и окрашивают 1 — 2 мин в 0,1%-ном растворе бромфенолового синего в 0,05 М боратном буфере (рН 8,2), после чего мазки промывают в трех сменах этого же буфера по 1 — 2 мин в каждой смене, высушивают и производят докраску (необязательно) ядер

1 -ным раствором сафранина 30-60 с.

Составитель Л.Стебаева

Редактор Л. Веселовская Техред M.Моргентал Корректор П.Гереши

Заказ 2885 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

1 13035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Цитоспектрофотометрия по Шерудило заключается в том, что оптическую. плот. ность клетки измеряют на одном и том же зонде при двух длинах волн экстинкции.

Экстинкция использованного в реакции красителя при 2-й длине волны должна составлять 0,4 — 0,6 экстинкции при 1-й длине волны, Масса красителя в клетке, отражающая количество окрашенного вещества (катионный белок), определяется по формуле, учитывающей оптические плотности клетки при 1-й и 2-й длинах волн экстинкции использованного красителя, при. тех же длинах волн и площадь зонда.

Диагностический показатель установлен эмпирически, Пример 1, У больного А., находившегося на лечении по поводу хронического обструктивного бронхита с клийико-функциональными проявлениями бронхоспазма, взяли из пальца 0,2 мл крови в пробирку с 0,02 мл 1.34 -ного раствора оксалата натрия. 0,1 мл кровй поместили на предметное стекло с лункой и воздействовали на нее в течение 2 — 3 мин с помощью лампы 0-139.

Расстояние от лампы до поверхности крови

40 см. Спустя 1,5 мин перемешали кровь

2-кратным набором ее в пипетку, не выключая лампы. Затем из необлученной и облученной порций крови сделали мазки и

Ькрасили одним и тем же реактивом на катионные белки по Шубичу. С помощью цитоспектрофотометра установили, что показатель содержания катионных белков в

ПНЛ в порции крови без облучения равен

1,07 усл.ед., после УФ-воздействия — 1,47 усл.ед. Увеличение составляет 37,38 . Таким образом, по предлагаемому способу у больного диагностирован бронхоспаэм аллергического характера, Исследование по прототипу по тесту

ППН выявило сенсибилизацию к эуфелли5 ну, новокаину.

Пример 2. У больного Б„находившегося на лечении по поводу хронического обструктивного бронхита с клинико-функциональными проявлениями бронхоспазма, 10 исследование по предлагаемому способу показало, что показатель содержания катионных белков в ПНЛ порции крови без воздействия УФ равен 1,24 усл.ед., после

УФ-воздействия — 1,31 усл.ед. В этом случае

15 диагностический показатель равен 5,64"",ь, и по предлагаемому способу у больного не диагностирован бронхоспазм аллергического характера, Исследование по прототипу по тесту

20 ППН у этого больного не выявило сенсибилизации к бактериальным аллергенам и лекарственным препаратам, Таким образом, предложение основано на экспериментально установленной спо25 собности УФ оказывать разное влияние на

ПНЛ в завиСимости от характера бронхоспазма с последующей регистрацией этой разницы цитохимическим определением в

ПНЛ катионных белков, 30 Способ позволяет определить бронхоспазм аллергического генеза с большой веро ятностью.

Формула изобретения

Способ определения бронхоспазма ал35 лергического генеза при воспалительных заболеваниях легких, путем исследования мазков крови,отл ич а ю щи йс я тем, что, с целью повышения точности способа, исследуют полинуклеарные лейкоциты, в кото40 рых определяют содержание катионных белков, при этом исследования проводят одновременно двух мазков, один из которых до выявления катионных белков облучают ультрафиолетовйм светом в течение 2 — 3

45 мин, и при увеличении содержания катионных белков в клетках облученного мазка по отношению к необлученному на 16 и больше определяют бронхоспазм аллергического генеза.