Способ получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием . Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта. Сущность изобретения заключается в обработке листьев грецкого ореха (Juglans regia L.) хлороформом в соотношении 1:3-6, высушивании, экстракции сырья 70-75%- ным этанолом дважды в соотношении 1:6-8, упаривании экстракта и высушивании. Положительный эффект заключается в повышении выхода до 10,7%. 2 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (si)s А 61 К 35/78
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ (21) 4908453/14 (22) 06.02.91 (46) 07.11.92. Бюл. М 41 (71) Харьковское производственное химикофармацевтическое объединение "Здоровье" (72) В.В.Просвирнин, В.А,Заболотный, Б.А.Рогожин, Ю.M.Hàáîêà, А.В.Коломоец, Л.Г.Ковязина и Н.М.Мартынюк (73) Харьковское производственное химикофармацевтическое объеди н ение "Здоровье" (56) Авторское свидетельство СССР
М 1670847, кл. А 61 К 35/78, 1989.. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИМ И
АНТИМИКРОБНЫМ ДЕЙСТВИЕМ
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием.
Известен способ получения средства
"хлорофиллипт", обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием, путем экстракции листьев эвкалипта шарикового 96%-ным этанолом, упаривания, очистки раствором серно-кислой меди, извлечения целевого продукта бензолом и повторного упаривания для получения сухого экстракта (см.а.с СССР М 801134, кл. А 61
К 35/78, 1977).
Недостатком известного способа являются ограниченность сырьевой базы, повышенная аллерген ность препарата и использование при производстве хлоро„„. Ж„„1774871 АЗ (57) Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием. Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта. Сущность изобретения заключается в обработке листьев грецкого ореха (Juglans regia Е.) хлороформом в соотношении 1:3-6, высушивании, экстракции сырья 70 — 75%ным этанолом дважды в соотношении 1:6 — 8, упаривании экстракта и высушивании. Положительный эффект заключается в повышении выхода до 10,7%. 2 табл. филлипта бензола, относящегося к опасным для здоровья людей веществам.
Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу является выбранный в качестве прототипа способ получения средства, обладающего раноза живляющим и антимикробнным действием, путем экстракции растительного сырья этанолом, упаривания, очистки, извлечения це- QQ левого продукта органическим растворителем и повторного упаривания. В д качестве растительного сырья используют листья ореха грецкого (Juglans regia L,).
Зкстракцию проводят 70 — 75 спиртом методом настаивания. Упаренный экстракт очищают хлороформом в соотношении 1:1, а целевой продукт извлекают смесью этилового спирта и этилацетата в соотношении (8-9):(2 — 1). Затем отделяют водный остаток и полученный экстракт повторно упарива1774871 ют (см. заявку N 4734579/30-14, кл, А 61 К
35/78, I 989).
К недостаткам прототипа можно отнести недостаточно высокий процент выхода сухого экстракта готового продукта, а также относительная сложность способа, связанная с использованием этилацетата.
Целью изобретения вляется повышение выхода готового продукта.
Поставленная цель достигается тем, что при получении средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием осуществляют экстракцию растительного сырья из листьев ореха грецкого (Jugians regia L.) этанолом методом настаивания, отделение водного остатка и упаривание полученного экстракта под вакуумам. Отличительной особенностью заявляемого способа является то, что перед экстракцией растительное сырье обрабатывают хлороформам в соотношении 1:5...6 со сменой растворителя через каждые 12 ч не менее 5 раз, до полного обесцвечивания растворителя, затем сырье просушивают при комнатной температуре до удаления запаха хлороформа, после чего целевой продукт извлекают путем двойной экстракции
70...75 -ным этанолом в соотношении
1;6...8 со сменой экстрагента через 24 ч с последуюшей отгонкой спирта из обьединенного экстракта под вакуумом, после чего водную фракцию упаривают под вакуумом до сухого остатка.
Обработка листьев ореха грецкого перед экстракцией хлороформом в соотношении 1:5...6 со сменой растворителя до полного его обесцвечивания обеспечивает полное удаление липофильной фракции, не обладающей полезной активностью, что позволяет более полно выделить целевые гидрофильные вещества при последующей экстракции 70-75 g,-ным этанолом, Просушивание сырья при комнатной температуре после обработки хлороформом необходимо для полного удаления хлороформа, чтобы избежать смешивание растворителя и этанола при последующей экстракции сырья; что затрудняет более полное извлечение гидрофильных веществ, Удаление хлороформа контролируют по наличию его запаха.
Экстракция сырья после удаления хлороформа 70...75 этиловым спиртом в соотношении 1:6...8 последовательно два раза с последующей отгонкой спирта из обьединенного экстракта и упаривание водной фракции обеспечивает наиболее полное извлечение гидрофильного вещества из растительного cb1pbA.
Соотношения между количеством сырья и хлороформом. а также этанолом определены экспериментально, Наличие перечисленных, отличительных по отношению к выбранному прототипу признаков, позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого способа критерию изобретения "Новизна", В связи с отсутствием в известных источниках информации признаков, отличающих заявляемый способ от прототипа, можно сделать вывод о соответствии разработанного технического решения критерию изобретения "Существенные отличия". В прототипе удаление липофильных компонентов осуществляют путем обработки водного остатка, образующегося после экстракции растительного сырья этанолом и удаления из экстракта этилового спирта упариванием. Последующая экстракция смесью этиловый спирт — этилацетат позволяет выделить только ту сумму флавонаидов, которая была экстрагирована из растительного сырья совместно с липофильными компонентами. В заявляемом же способе предварительное удаление липофильных компонентов хлороформом до начала зкстракции позволяет во время экстракции этанолом более полно выделить только гидрофильные вещества.
Положительный эффект, указанный в цели изобретения, будет получен благодаря тому, что предварительное удаление из растительного сырья липофильных компонентов до начала экстракции позволяет более полно осуществить выделение только гидрофильных веществ в процессе экстракции этанолом. Экстракт выделенных гидрофильных веществ проявляет ранозаживляющее и антимикробное действие.
Заявляемый способ может быть реализован, например следующим образом. Сухой лист ореха грецкого (Jugians гера L.) в количестве 10 кг измельчали на вальцах и заливали 50 л хлороформа (соотношение
1:5). Растворитель меняли через 12 ч 6 раз до полного обесцвечивания хлороформа.
Затем сырье просушивали при комнатной температуре до полного удаления запаха хлороформа. После органолептического определения отсутствия запаха хлороформа . сырье заливали 70 этиловым спиртом в количестве 70 л (соотношение 1:7). Через 24 ч производили замену этилового спирта.
Спиртовые экстракты обьединяли и под вакуумом на водяной бане отгоняли спирт, Упаривание экстракта этилового спирта производили на аппарате "Симакс". Оставшуюся водную фракцию высушивают под вакуумом до получения сухого остатка. Вы1774871 ход готового продукта составил 10.7 (у прототипа 8,0 ).
Готовый продукт представляет собой мелкокристаллический порошок коричйевокрасного цвета, со своеобразным запахом, 5 горького вкуса, хорошо растворимый в воде, спирте и ацетоне. Рекомендованное хранение: в плотноукупоренных склянках оранжевого стекла в прохладном месте, flo описанной технологии проводились 10 эксперименты, в которых изменялось соотношение между массой сырья и объемом этанола. Изменялась также концентрация этилового спирта. Данные экспериментов сведены в табл.1, 15
На основании проведенных опытов можно сделать вывод, что оптимальной концентрацией этилового спирта является
70..75О, соотношение сырья и хлороформа должно составлять 1:5...6, а сырья и этило- 20 вого спирта — 1:6...8. Дальнейшее повышение количества хлороформа при предварительной обработке сырья и повышение количества этилового спирта при последующей экстракции сырья 25 нецелесообразно, так как выход годного продукта практически не увеличивается.
Ранозаживляющая активность исследуемого экстракта оценивалась по скорости эпителизации поверхности пораженного 30 участка кожи, Динамика изучения площади раны пораженной поверхности представлена в табл,2, и свидетельствует о выраженном и соизмеряемом терапевтическом эффекте 17-ного раствора гидрофильного 35 экстракта из листьев ореха грецкого, полученного по заявляемому способу, Как видно из табл.2, полная эпителизация раневого дефекта при применении экстракта, полученного по заявляемому 40 способу, наступает на 12 сутки, т.е. активность полученного экстракта такая же, как и экстракта, полученного по способу-прототипу.
Антимикробная активность гидро- 45 фильного экстракта листа ореха грецкого, полученная по заявляемому способу, определялась методом двукратных серийных разведений в мясопептонном бульоне с последующим посевом на МПА или среду Плоскирева для определения минимальной бактерицидной концентрации водного раствора исследуемого экстракта. В качестве тест-микробов были исследованы следующие штаммы: стафилококка hk 25923, синегнойной палочки М 27653, протеус вульгарис f4 Х 4636. В результате экспериментов установлено, что минимальная бактерицидная концентрация исследуемого экстракта в отношении стафилококка составляет 0,9 — 1,07-ный раствор, в отношении синегнойной палочки — 0.5 — 1.0 -ный раствор и в отношении протея — 0,9...1,17,ный раствор экстракта из листьев ореха грецкого.
Средство, полученное по заявляемому способу, обладает в 3 раза более выраженной антимикробной активностью в отношении изученных штаммов микроорганизмов по сравнению с "хлорофиллиптом".
В сравнении со способом прототипом заявляемый способ позволяет повысить выход средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием на
0,7...2,9оь. При этом упрощается реализация способа, так как отпадает необходимость использовать этилацетат, предусмотренный по технологии прототипа.
Формула изобретения
Способ получения средства, обладающего ранозаживляющим и антимикробным действием, включающий экстракцию листьев ореха грецкого (Jug Таб ца1 Выход готово» ro продукта, 3 Ф То же 1 5 «tl «!!» «!! 1;4 То же 1;6 «! !» l! !! «!! I!» 1:4 То же «t!» «t t» lI»!! «!! 1:4 То же I:8 Il lI !! «!!» 1:5 То же 1:5 «I 1 «t t» 1:6 1:5 То же II «t! «t t» «! t» «t!« 1:5 То же 1:7 «1t» «! «! t «!!« «!!» 1:8 1:5 То же «!!« l!» «!! «!! «I l 1:6 1:6 1:5 1:5 «l I «!!» «I l» «t1» 1:6 «1!» lI II «!!» «! !» !:6 lI» ll !! ll» «! !» «t !» 1:8 1:6 l I» «! !» « I I!! «!!» Ю Соотношение: .пп сырье/хлороформ 4 5 б 8 11 12 13 14 16 17 18 19 21 22 23 24 26 27 28 29 31 32 33 34 36 37 38 39 41 42 43 44 46 47 . 48 Соотношение: сырье/этило. вый спирт Концентрация спирта этилового, град 8 0 6,6 6,8 7,8 8,1 6,8 7,6 7,8 8,2 6,9 7,7 8,4 8,3 6,9 7 7 7,9 8,2 7,8 8,4 8,5 9 1 8,8 10,3 10,6 9,7 9,2 I0 7 l0 9 9,7 8,8 9,8 .10,8 7 ф 8,2 8,6 8,I 8,6 9,4 9,6 8,9 8,6 8,8 9,Э 8,9 8,5 8,7 8,9 8,7 10.1 774871 Тэблица 2 Составитель В,Просвирнин Техред M.Mîpãåíòàë Корректор O.КравЧова Редактор С.Кулакова Производственно-издательский комбинат "Патент", r Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 3939 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская на6.,4/5
