Способ дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких

 

Изобретение относится к медицине и может найти применение во фтизиатрии, и пульмонологии для дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких. Цель изобретения - повышение точности и сокращение времени способа за счет определения адгезионной способности нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки. В новом способе определяют и сопоставляют адгезивную способность нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки и без нее и при достоверном повышении реакции в присутствии аутосыворотки диагностируют саркоидоз, а при отсутствии или снижении реакции - диссеминированный туберкулез легких. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (st)s G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ С ВИДЕТЕЛ Ь СТВУ (21) 4824646/14 (22) 14.05.90 (46) 30.11.92. Бюл, N 44 (71) Киевский научно-исследовательский институт фтизиатрии и пульмонологии им. акад. Ф.Г.Яновского (72) Н,А.Ты ш ко, Е, Ф.Чернушенко и

А.Ф. Поддубн ы и (56) Чернушенко Е.Ф„Когосова Л,С, Иммунология и иммунопатология заболеваний легких. Киев: Здоров я, 1981, с.178 — 179, (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ДИССЕМИНИРОВАННОГО

ТУБЕРКУЛЕЗА И САРКОИДОЗА ЛЕГКИХ (57) Изобретение относится к медицине и может найти применение во фтизиатрии, и

Изобретение относится к области медицины и может найти применение во фтизиатрии и пульмонологии для дифференциальной диагностики диссеминированного губеркулеза и саркоидоза лег ких.

Известен способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза, заключающийся в проведении реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) с туберкулином in vitro. Метод основан на активации пролиферативной способности сенсибилизированных лимфоцитов под действием специфического антигена. У больных туберкулезом количество бластообразующих клеток в присутствии туберкулина, как правило, значительно больше, чем у больных саркоидозом.

Культивирование клеток проводят в течение

4 дн.

Недостатками данного способа дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких являются: недостаточная

„„5U„„1778703 Al пульмонологии для дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких, Цель иэобретения— повышение точности и сокращение времени способа за счет определения адгезионной способности нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки. В новом способе определяют и сопоставляют адгезивную способность нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки и без нее и при достоверном повышении реакции в присутствии аутосыворотки диагностируют саркоидоз, а при отсутствии или снижении реакции — диссеминированный туберкулез легких. 1 табл. точность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоэа легких; длительность постановки реакции; технологическая сложность осуществления методики.

Известен способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких, заключающийся в проведении реакции торможения миграции лейкоцитов (PTMJl), которая основана на подавлении миграции лейкоцитов из капилляров под действием медиатора, синтезируемого сенсибилиэированными лимфоцитами в присутствии специфического антигена, Реакция проходит 24 ч.

Недостатками данного способа являются: недостаточная точность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких; длительность постановки реакции.

Данный способ является наиболее близким по технической сущности заявляемому изобретению и принят в качестве прототипа, 1778703

15

Цель изобретение — повышение точности и сокращение времени дифференциаль, ной диагностики диссеминированно о туберкулеза и саркоидоза легких за счет определения адгезивной способности нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки, Поставленная цель достигается тем, что в известном способе, заключающемся в определении функциональной активности лейкоцитов, согласно изобретению опреде, ляют адгезивную способность нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки больного и при повышении адгезивной способности клеток по сравнению с контролем без аутосыворотки диагностируют саркоидоз, а при отсутствии различий или снижении — диагностируют диссеминированный туберкулез легких.

Способ дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких осуществляется следующим образом.

Гепаринизированную кровь наслаивают на раствор фиколл-верографина с градиентом плотности 1,080. центоифугируют

30 мин при 1500 об/мин при+4 С, Снимают белую пленку нейтрофилов на осадке эритроцитов и разводят средой 199 до 1 мл.

Количество нейтрофил ьных гранулоцитов (НГ) подсчитывают в камере Горяева, окрашивая клетки растворов генцианвиолета на уксусной кислоте, Полученную взвесь наслаивают на стекла с лункой (контроль). Для прилипания НГ стекла инкубируют в термостате при+37 С 5 мин. Эритроциты и неприлипшие клетки отмывают фосфатным буфером. В лунку заливают 0,1 л 0,2 раствора ЭДТА (этилендиаминтетраацетат или трилон Б). содержащего 5 / сыворотки крупного рогатого скота и ставят в холодильник на 20 мин. За это время все прилипшие клетки отстают от стекла. их количество подсчитывают в камере Горяева, Вычисляют процент прилипших клеток, что является показателем адгезивности, Для определения действия аутосы воротки на адгезивную способность НГ в реакцию добавляют 0,2 мл мл декомплементированной (при 56ОC 30 мин.) аутосыворотки (опыт), В контрольную пробу добавляют 0,02 мл среды 199. Показатель,, действия аутосыворотки вычисляют по формуле: опыт х =контроль

При достоверном повышении адгезивной способности НГ в присутствии аутосыворотки (показатель реакции больше 1,0, в среднем — 1,7+0,2) диагностируют саркоидоз, а при отсутствии или снижении реакции

55 (показатель меньше или равен 1,0, в среднем — 0,9ч-0.1) — туберкулез легких, Использование аналогичных отличительных существенных признаков в медицине для указанной выше цели заявителю неизвестно, Это дает основание сделать вывод, что предлагаемое изобретение обладает новизной, а обеспечение данными признаками указанного способа для достижения поставленной цели подтверждает их существенность, Ниже приведены конкретные примеры выполнения способа.

Пример 1. Больная Б„26 лет, история болезни hb 125, поступила в клинику КНИИФиП с диссеминированным процессом в легких 05.01.88 г, Изменения в легких выявлены при рентгенообследовании, Данные обследования при поступлении: общий анализ крови — лейкоциты — 7,6х х10 /л. э-8, Ю-1, п-6, с-60, лимфоциты — 20, 9 м-5, СОЭ вЂ” 29 мм/час. Общий анализ мочи без особенностей. Проба Манту — отрицательная. Рентгенография (06.01,88 г.) — значительно усилен легочный рисунок с узелками по ходу тканей. Корни легких расширены, уплотнены.

Иммунологическое исследование выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении: — определение адгезивной способности

НГ в контроле (=4,5 g). — определение адгезивной способности

Н Г в присутствии аутосыворотки (=11,5 ).

Адгезивная способность клеток в присутствии аутосыворотки повысилась в 2,3 раза. Реакция НГ периферической крови данного больного на аутосыворотку при определении адгезивной способности этих клеток позволяет диагностировать саркоидоз легких, Пример 2. Больной Б., 47 лет, история болезни N. 536. поступил в клинику КНИИФП с диссеминированным процессом в легких 29.12.87 r. Изменения в легких выявлены при профосмотре.

Данные обследования при поступлении: общий анализ крови — лейкоциты — 7,1х х10 /л, э-4, п-б, с-59, лимфоциты — 26, м — 5, 9

СОЭ вЂ” 11 мм/ч. Общий анализ мочи без особенностей. Проба Манту отрицательная.

Рентгенография — билатерально в легких мелкоячеистая деформация, усиление легочного рисунка, мелкоочаговые изменения, Корни легких расширены с элементами фиброзной деформации.

Иммунологическое исследование выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении:

1778703

Формула изобретения

П р и м е ч а н и е: p> — достоверность различий с контрольной группой; р ; — достоверность различий между группами больных. — определение адгезивной способности

НГ в контроле =14,5 — определение адгезивной способности

НГ в присутствии аутосыворотки (опыт) =

8% 5

Адгеэивная способность НГ в присутствии аутосыворотки снизилась и показатель реакции составил 0,5, Поскольку аутосыворотка данного больного не стимулирует адгезивную способность НГ, это позволило 10 диагностировать диссеминированный туберкулез легких.

Всего обследовано 43 больных впервые выявленным диссеминированным туберкулезам и 58 больных саркоидозом легких, 15 находящихся на лечении в КНИИФиП.

Приводим таблицу, которая дает сопоставительную характеристику метода прототипа и заявляемого изобретения.

Из таблицы следует РТМЛ не отличает- 20 ся у больных туберкулезом, саркоидоэом и здоровых лиц, поэтому не может служить дифференциально-диагностическим тестом, используя определение реакции адгезии НГ периферической крови на 25 аутосыворотку, согласно изобретению, выявлено, что у больных диссеминированным туберкулезом адгезивная способность НГ в присутствии аутосыворотки или не изменяется или же снижается (e среднем зто соста- 30 вило 0,9+0,1), что является диагностическим признаком в определении туберкулезного процесса; при определении реакции адгеэии НГ крови на аутосыворотку больных саркоидозом. согласно изобрете- 35 нию, установлено значительное повышение адгезионной способности этих клеток в присутствии аутосыворотки (B среднем это составило 1,7й 0.2), что является диагностическим признаком саркоидоза. 40

Способ дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких находит применение у лиц с характерной клинико-рентгенолагической картиной, отрицательными туберкулиновыми пробами и отсутствием бактериовыделения, когда не известно, с какой патологией мы имеем дело, какой терапевтический подход нужен данному пациенту.

Данный способ позволяет повысить точность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоэа легких и сократить время диагностики с 2 сут до 2 ч. Учитывая простоту и доступность методики, способ дифференциальной диагностики диссеминированого туберкулеза и саркоидоза легких может найти применение в практическом здравоохранении. Его использование возможно в иммунологических лабораториях учреждений фтизиопульмонологического профиля.

Способ дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких, заключающийся в определении функциональной активности лейкоцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени проведения способа, определяют адгезивную способность нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки больного и при повышении адгеэивной способности клеток по сравнению с контролем без -аутосывороки диагностируют саркоидоз. а при отсутствии различий или снижении — диссеминированный туберкулез легких.