Способ стимуляции спермы рыб
Изобретение относится к промышленном рыбоводству. Изобретение может быт1 использовано для стимуляции спермы рыб. Цель изобретения - увеличение продолжительности времени поступательного движения и повышения активности сперматозоидов . Для достижения этой цепи в качестве биологически активного, стимулирующего вещества предложен простагладин - 11-дезоксипр6стагландйн Е (Допростон), разведенный на физрастворе для пресноводных рыб в концентраций от 0,1 до 1,5 мкг/мл раствора. Использование предложенногб способа увеличивает активность сперматозоидов рыб в 4-6 раз по сравнению с тактовой для необработанной спермы . 1 табл. J
союз соВетских
СОЦИАЛИСТИ IFCKMX
РЕСПУБЛИК
ГОС ДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ BF ОМСТВО СССР (ГО ПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1 (21) 4799169/13 (22) 05,03,90 (46) 07, 02,93. Бюл. N 5 (71) Свердловский сельскохозяйственный инсТитут и Институт органического синтеза АН )1атвССР (72) iB.П.Кашковская, В,Г,Судаков, А.А,КокоI рин и Я,Ф,Фрейманис I (56) Авторское свидетельство СССР N 1 69770, кл, А 01 К 61/00, 1983, (54) tПOСOБ СТИМУЛЯЦИИ СПЕРМЫ РЫБ (57) Изобретение относится к промышленному рыбоводству. Изобретение может быт использовано для стимуляции спермы Изобретение относится к промышленному рыбоводству, в частности к способам искусственного разведения рыб. Изобретение может быть использовано для стимуляции спермы рыб. В рыбоводстве известен способ стимуляц и спермы рыб биологически активными веществами, а именно гибберелином, гетероауксином или его калиевой солью, предус атривающий обработку спермы рыб этими веществами. Известен способ повышения качества спермы рыб путем обработки ее водным раствором хлористого калия, Обработка спермы по этому способу эллиминирует слабые сперматозоиды, за счет чего улучшается качество спермы. ,Известно также использование парааминобензойной кислоты-биологически активного вещества для стимуляции спермы. Недостатками этих способов является продолжительное выдерживание спермы в „„5U„„1792597 А1 рыб. Цель изобретения — увеличение про - должительности времени поступательного движения и повышения активности сперматозойдов. Для достижения этой цепи в качестве биологически активного, стимулирующего вещества предложен простагладин 11-дезоксип ростаглэндин Е (До п ро с тон), разведенный на физрастворе для пресноводных рыб в концентрации от 0;1 до 1,5 мкг/мл раствора, Использование предложенного способа увелйчивает активйость сперматозоидов рыб в 4-6 рэз по сравне- нию с тактовой для необработанной спер мы. 1 табл. активирующем растворе и Незначительный активирующий эффект. Цель изобретения — увеличение йродолжительности времени поступательного движения и повышение активности сперматозоидов. Изобретение осуществляется следующим образом. Простогландин E j Допростон-В разводили физраствором для пресноводных рыб до концентрации в нем 11 — дезоксипростоглэндин Е1 до 1,5 мкг!мл раствора. Состав физраствора для пресноводных рыб: NaCf— 7,5 г, KCl — 0,2 г, СаС!2 — 0,2 г, ИаНСОз — 0,2 г, дистиллированной воды до литра. Средство готовили следующим образом; берем исходную ампулу препарата Допростон-В, содержащую 5 мг/мл 11-дезоксипростогландина Е и разводим этот препарат физраствором в 10000 раз. Таким образом получаем средство, содержащее 0,5 мкг/мл упомянутого простогландина Е1, Стимулирующее действие средства основано на том, 1792597 что простогландины, являясь высокоактивными веществами, действуют на клеточном уровне.. Хранят средство в прохладном месте. Испытания предлагаемого средства проводили в лабораторных условиях на сперме плотвы, леща и карпа, полученной после гипофизарной инъекции. Сперму отцеживали, общепризнанным в рыбоводстве способом, в сухие пробирки, которые помещали в охлажденный термос и в нем перевозили сперму от рыбоводного хозяйства до лаборатории. Эксперименты ставили следующим образом. На чистое сухое предметное стекло наносили каплю стимулирующего раствора глазной пипеткой; В этот раствор с помощью препаровальйой иглы вносили небольшое количество спермы. Качество спермы и стимулятора было постоянным во всех опытах. Рассчитывали ошибку выборки и достоверность различий с контролем. За контроль принимали активность спермы в отстоянной воде, Сперму помещенную в раствор стимулятора хорошо перемешивают и выдерживают одну минуту. В разбавляющем растворе сперма остается неподвижной. При добавлении к этой разбавленной сперме. воды сперматозоиды становились подвижными. С помощью микроскопа M6M — 3 при увеличении 8х10 наблюдали за их поведением при естественном или искусственном освещении, в зависимости от условий эксперимента; Секундомером "Агат" засекали время обработки спермы, то есть период выдерживания спермы в растворе разбавителя без добавления простой воды, : а также засекали продолжительность посту. пательного движения сперматозоидов с точностью до 0,2 сек. В качестве контроля использовали поведение спермы от этого же самца в обычной воде без применения простагландинового препарата, О качестве средства судили по поведению спермы после обработки ее препаратом по отношению продолжительности поступательного движения сперматозоидов, обработанных стимулирующим раствором, и необработанных сперматозоидов. Продолжительность поступательного движения сперматозоидов у необработанной спермы принята нами за 100 . Пример . Сперма карпа в воде была подвижной 71,3 с. а сперма этого же самца после обработки предлагаемым способом концентрации простагландина 0,6 мкг/мл оставалась подвижной в течение 438,8 с, таким образом: 10 71,3 с составляет 100, а 438,8 с составляет Х, отсюда Х -. 615.47;, то есть 438,8 100 1 продолжительность поступательного дви15 жения сперматозоидов после обработки спермы простагландином увеличилась более чем в 6 раз. В таблице приведены результаты испытания предлагаемого способа на плотве, ле20 ще и карпе, При высоких концентрациях простагландина от 5000 до 300 мкг/мл раствора сперматозоиды остаются неподвижными и погибают, При использовании простагландина в концентрациях от 300 до 100 мкг/мл активными становятся 10 — 207ь всех сперматозоидов. В опытах при использовании простогландина в концентрациях от 10 до 5 мкг/мл раствора активными становятся 50 — 70 всех сперматозоидов. В 30 опытах с использованием простагландина в концентрации от 1,5 до 0,1 мкг/мл раствора отмечается значительное увеличение периода поступательного движения сперматозоидов. Дальнейшее снижение концент35 рации простагландина ведет к тому, что сперматозоиды становятся подвижными уже в растворе разбавителя, что является отрицательным моментом, так как это ведет к уменьшению периода поступательного 40 движения сперматозоидов. Наилучший результат получен от использования препарата с концентрацией 0,6 мкгlмл раствора. Оптимальная концентрация простагландина от 0,01 до 1,5 мкг/мл раствора, Предлагаемый способ позволяет увеличить продолжительность времени поступательного движения и повысить активность сперматозоидов. 1792597 6 продолжительности времени поступательного движения и повышения активности сперматозоидов, в качестве биологически активного вещества используют раствор простагландин-11-дезоксипростагландина Е1 в концентрации 0,01 — 1.5 мкгlмл раствора. Формула изобретения Способ стимуляции спермы рыб, включающий обработку зрелых спермиев рыб перед осеменением икры раствором биологически активного вещества, о т л ич а }о шийся тем, что, с целью увеличения Влияние Допростона — В на активность спермы рыбы. Продолжител ьность поступательного движения сперматозоидов, с Поведение спермы Обьем выборки: М самца Активность спермы в опыте по отношению к активности ее в контроле, К нцентрация и остагланди} а, мкг/мл Плотва 50,2 1,6 123,7 13,7 146,4 4,1 102,0 3,4 120,4 1,7 Лещ 53,6 3,9 130,0 3,6 - 103,0 2;0 }57.5 14,4 52,4 2,4 Карп 71,3 1,3 105 1,3 115,0 2,9 183 3 1,0 438,8 55,2 310,0 38,0 95,0 7,4 . 90,0 5,9 100 2796,1 291,6. 246,4 239,9 1 2 4 5 Контроль 4,9 4,9 0,6 ; 0,00001 5,6 21,9 }3.6 30,5 Контроль 0,6 0,004 0,0003 0,00005 5 4 242,5 192,2 293,8 97,8 5 4 14,4 11,2 7,0 0,3 3 3 3 4 . 2 Контроль 4,9 2,4 1,5 0.6 0,3 . 0,01 5000 142,9 161,3 257,7 615.4 435,5 133,2 126,2 5 5 4 14,2 6,1 32,9 6,7 6,3 2,4 3,1 Активны на 807, Активны на 90 Не активны Составитель В. Судаков Редактор С. Кулакова Техред M.Моргентал Корректор Н, Бучок Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101! 3эка 3 463 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
