Способ подготовки биоптата для регистрации инфракрасных спектров при диагностике рака легкого
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при диагностике рака легкого. Целью изобретения является удешевление и повышение безопасности способа с одновременным повышением достоверности диагностики рака легкого за счет увеличения интенсивности анализируемых полос инфракрасного спектра. Для этого взятый биоптат обрабатывают диметилформамидом в течение 1-2 ч на водяной бане, после диметилформамида биоптат промывают органическим растворителем и высушивают на воздухе. При диагностике рака легкого регистрируют спектр поглощения веществ биоптата в инфракрасной области и по отношению величины показателей, оптических плотностей выносят суждение о наличии заболевания.
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при диагностике рака легкого. Известен способ подготовки образцов для инфракрасной спектроскопии при диагностике рака легкого, включающий взятие биоптата, обработку его органическим растворителем гексаметилдисилазаном в течение 1-2 ч при температуре 120-140оС, удаление растворителя и высушивание биоптата. Для диагностики рака легкого регистрировали спектр поглощения вещества биоптата в инфракрасной области (ИК-спектр), рассчитывали отношение максимума поглощения при 1160 см-1 к максимуму поглощения при 1065 см-1, по величине которого выносили суждения о наличии заболевания. Вместе с тем способ требует повышенной точности анализа ИК-спектров. Кроме того, в процессе подготовки образцов используют повышенные температуры, пожароопасные теплоносители (масло, глицерин), сложную химическую аппаратуру. Стоимость гексаметилдисилазана высока. Целью изобретения является повышение безопасности и удешевление способа с одновременным повышением достоверности диагностики рака легкого за счет увеличения интенсивности анализируемых полос инфракрасного спектра. Способ осуществляют следующим образом. Биоптат ткани легкого в количестве 0,05-0,3 г помещают в пробирку с 2-5 мл диметилформамида и нагревают на водяной бане 1-2 ч. Диметилформамид сливают, промывают органическим растворителем (гексан, диэтиловый эфир, высушивают на воздухе и снимают ИК-спектр в тонком слое вещества в виде суспензии в вазелиновом масле между крышками из бромистого калия или в таблетках с бромистым калием на спектрофотометрах, позволяющих регистрировать поглощение в инфракрасной области спектра. По полученным спектрам рассчитывают отношения оптических плотностей полос поглощения с максимумами при 1160 и 1065 см-1 и при значении этого показателя, равном 0,4 и менее, диагностируют рак легкого. П р и м е р 1. Больной М, доставлен с проникающим ранением грудной клетки слева с ранением нижней доли легкого. Торакотомия, ушивание раны легкого. 0,5 г биоптата ткани легкого нагревали с 3 мл диметилформамида на кипящей водяной бане 2 ч. После окончания нагревания образец промывали гексаном и высушивали на воздухе. Часть образца размельчали на вибрационной мельнице и снимали ИК-спектр образца в виде суспензии в вазелиновом масле между крышками из КВr на приборе PerKin Elmer 577. Определяли соотношение оптических плотностей полос поглощения с максимумами при 1160 и 1065 см-1. Найденно: 
0,6 Вывод: не рак. П р и м е р 2. Больной М. 59 лет. Клинический диагноз: центральный рак левого нижнедолевого бронха, осложненный кровотечением, метастазы в бронхопульмональные лимфоузлы. Пневмонэктомия слева. Биоптат опухолевой и здоровой ткани обрабатывали аналогично в течение 1,5 ч. Образец промывали диэтиловым эфиром, высушивали, снимали ИК-спектр на приборе PerKin-Elmer-577. Найдено для здоровой ткани: 
0,6 Частный вывод: не рак. Найдено для опухолевой ткани: 
= 0,4 Частный вывод: рак. Общий вывод: рак. Гистологическое исследование: в легком имеет место проскоклеточный рак без ороговения с перибронхиальным распространением и одиночными отсевами в периферическую легочную ткань. В лимфоузлах метастазы рака. П р и м е р 3. Больная Е. 36 л. Клинический диагноз: периферический рак верхней доли правого легкого, Т3M1Mo. Операция расширенная верхняя лобэктомия справа. Биоптат опухолевой ткани обрабатывали аналогично в течение 1 ч диметилформамидом (промывание гексаном, высушивание, съемка ИК-спектра). Найдено: 
0,4 Вывод: рак. Гистоло- гическое исследование в периферической ткани легкого имеет место инфильтративный рост альвеолярноклеточного рака с метастазами в лимфоузлы. П р и м е р 4. Больной К. Клинический диагноз: центральный рак верхней доли правого легкого с метастазами в бронхопульмональные лимфоузлы. Операция пневмонэктомия справа. Биоптаты опухолевой и здоровой ткани обрабатывали аналогично в течение 1 ч. ИК-спектры снимали на приборе PerKin-Elmer-577. Найдено для здоровой ткани: 
0,6 Частный вывод: не рак. Найдено для опухолевой ткани: 
0,3. Частный вывод: рак. Общий вывод: рак. Гистологическое исследование: катетер-биоптат отдельные клетки и комплексы плоскоклеточного рака без ороговения. Трахеобронхобиопсия: эндобронхиальный рак справа. П р и м е р 5. Больной У. 46 л. Клинический диагноз: туберкулез верхней доли легкого с подозрением на рак. Операция правая резекция второго сегмента левого легкого. Биопаты здоровой и опухолевой ткани обрабатывали диметилформамидом аналогично в течение 2 ч. ИК-спектры снимали на Specord-75-1R. Найдено для здоровой ткани 
9 Частный вывод не рак. Найдено для опухолевой ткани: 
0,7. Частный вывод: не рак. Общий вывод: не рак. Гистологическое исследование: в препарате очаги казеоза в окружении фиброзного кольца с проявлениями хронического воспаления, преимущественно в виде лимфоидно-клеточной инфильтрации, видны единичные гигантские клетки Пирогова-Лагганса и редкие мелкие скопления эпителиальных клеток. Заключение: туберкулез легких. П р и м е р 6. Больная Г. 55 л. Клинический диагноз: хроническая пневмония. Операция резекция средней доли правого легкого. Биоптат опухолевой ткани обрабатывали диметилформамидом в течение 1 ч. ИК-спектр снимали на Specord-75-1R. Найдено: 
0,9 Вывод: не рак. Гистологиче- ское исследование: в ткани легкого признаки фиброза. Видны полости, выстланные цилиндрическим бронхиальным эпителием. Попавшие в препарат стенки бронхов без существенных особенностей. Таким образом, способ позволяет достоверно и объективно различать здоровую ткань легкого или ткань легкого, пораженную заболеванием, не связанным со злокачественным заболеванием перерождением от раковой ткани. Способ точен (вероятность ошибки 2%), требует малого количества биоптата ткани легкого (0,05-0,3 г), осуществляется за короткое время (1-2 ч), анализ обработанного образа может быть воспроизведен через продолжительные промежутки времени (до 3 лет), поскольку обработка образца ткани легкого по данному способу приводит к фиксации его химического состава. Обработка биоптата ткани предлагаемым способом позволяет повысить качество ИК-спектров за счет увеличения интенсивности аналитических полос поглощения. Способ дешев, т. к. диметилформамид является недорогим и доступным химическим продуктом. Кроме того, способ безопасен, т.к. исключает применение высокотоксичных и легковоспламеняющихся веществ.
Формула изобретения
СПОСОБ ПОДГОТОВКИ БИОПТАТА ДЛЯ РЕГИСТРАЦИИ ИНФРАКРАСНЫХ СПЕКТРОВ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ РАКА ЛЕГКОГО, включающий взятие биоптата и обработку его растворителем, отличающийся тем, что, с целью повышения безопасности и удешевления способа с одновременным повышением достоверности диагностики рака легкого за счет увеличения интенсивности анализируемых полос инфракрасного спектра, в качестве растворителя используют диметилформамид, а обработку биоптата осуществляют в течение 1-2 ч на водяной бане.MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Номер и год публикации бюллетеня: 29-2000
Извещение опубликовано: 20.10.2000
