Способ оценки качества спермы быков
Использование: в сельскохозяйственном животноводстве, в частности в процессах искусственного осеменения.животных. Сущность изобретения: способ предусматривает определение в полученной сперме подвижности и концентрации сперматозоидов . Дополнительно определяют время протонной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах. 2 табл.
СОК)3 СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) fetal, ted i"..") FU , .;,;i 1Й ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ :-.3Т Е - . К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4914127/15 (22) 26,02.91 (46) 07,05,93, Бюл, N 17 (71) Всероссийский научно-исследовательский институт племенного дела M Институт химической физики им. Н.Н. Семенова (72) А,С, Ерохин, В.И, Деряженцев, К.Д. Кучкина, Л.И. Мурза, А.И. Сергеев и В.Ф, Турбин (56) Инструкция по организации и технологии работы станций и предприятий по искусственному осеменению с.-х. животных, M.: Колос, .1 981, Изобретение относится к области искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. Цель изобретения — увеличение количества спермодоз, Цель достигается тем, что после предварительной визуальной микроскопической оценки подвижности и концентрации свежеполученной спермы производят измерение времени спин-спиновой релаксации в сперматозоидах, характеризующего состояние микровязкости их плазматической мембраны. Устойчивость. сперматозоидов к замораживанию зависит от структурного состояния их плазматической мембраны, B частности от ее микровязкости. Предлагаемый способ повышает точность прогноза высокой криоустойчивости, т.е, позволяет определить истинную подвижность сперматозоидов после оттаива1 Ж 1813424 А1 (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА СПЕРМЫ БЫКОВ (57)Использование: в сельскохозяйственном животноводстве, в частности в процессах искусственного осеменения животных, Сущность изобретения; способ предусматривает определение в полученной сперме подвижности и концентрации сперматозоидов. Дополнительно определяют время протонной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах. 2 табл. ния, что позволяет заранее увеличить степень разбавления свежеполученных эякулятов от быков с высокой криоустойчивостью и получить большее число замороженйых спермодоз от таких производителей. Прогноз высокой криоустойчивости спермы очень важен при комплектовании племпредприятий производителями. При этом возможно избежать покупки животных с низкой криоустойчивостью спермы и, следовательно, уменьшить затраты на их приобретение и содержание до выбраковки по данному признаку. Пример 1. Подготовка образца спермы для анализа. Берут 0,5" мл свежеполученной спермы. С целью ослабления сигнала протонов воды производят замещение протонов воды (HzO) в образце на дейтроны (DzO). Для этого сперму разбавляют десятикратно 1 -ным раствором NaCI в 1813424 Экономический эффект от применения изобретения обусловлен возможностью увеличения выхода замороженных спермодоз от одного производителя, Таблица 1 Время протонной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах быков в связи с их криоустойчивостью Абсолютный Время пропокаэатель тонной спинти сперматозоив баллах и- после замоспиновой релаксации выживаемости сперматозоидов (усл раживания (мс) ед) 0,201 3,8 15,2 15,2 0;250 4,8 19,8 0,275 Dg0 и центрифугируют при 2000 об/мин в течение 10 мин, В полученном образце измеряют время протонной спин-спиновой релаксации. Измерение проводят на приборе Миниспек" РС-120 фирмы "Брукер" ФРГ при следующих режимах: импульсная последовательность КПМГ, количество измеряемых точек на экспериментальной кривой 50; количество накоплений 100-400 раз, диайазон измерения кривой спада намагниченности 80 мкс — 4 мс. Математическая обработка полученной кривой производи.лась на ЭВМ по программе Т BIEXP", разработанной фирмой "Брукер", Анализ проводят при температуре+40 С в течение 10-20 мин, Пример 2, На центральной станции искусственного осеменения сельскохозяйственных животных(Моск, обл.) отобрали 11 быков голштинской породы с различной криоустойчивостью сперматозоидов. Свежеполученные эякуляты предварительно оценивали визуально по подвижности сперматозоидов, чтобы определить их пригодность к замораживанию, и затем измеряли время спин-спиновой релаксации, характеризующее микровязкость их мембраны, от которой зависит устойчивость к .замораживанию. Замораживали сперму в лактозожелточно-глицериновой среде. Оттаивали в 3; -ном растворе цитрата натрия при температуре +38 С. После замораживания-оттаивания оценивали подвижность сперматозоидов и абсолютный показатель их выживаемости при температуре +38 С, Результаты опыта представлены в табл. 1. Иэ табл. 1 видно, что с увеличением времени протонной спин-спиновой релаксации 4 (т.е. с уменьшением микровяэкости мембраны) возрастает криоустойчивость сперматозоидов, о чем можно судить по большей подвижности и выживаемости сперматозоидов после замораживания-оттаивания, При этом подвижность сперматозоидов до замораживания у всех быков была практически одинаковой, Распределение изученных эякулятов по "0 времени спин-спиновой релаксации и подвижности сперматозоидов после замораживания-оттаивания представлено в табл. 2. Из табл, 2 видно, что если время протонной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах до замораживания составляет 0,261-0,272 мс, то прогнозируемая подвижность сперматозоидов составит 4,7 — 4,9 балла. Следовательно, степень разбавления свежеполученного эякулята можно увеличить на 17 — 197, по сравнению со степенью разбавления, ориентированной на среднюю подвижность, равную 4 баллам. 30 Формула изобретения Способ оценки качества спермы быков, включающий визульное определение подвижности и концентрации сперматозоидов, отличающийся тем, что, с целью 35 увеличения выхода замороженных спермодоз, дополнительно определяют время протонной спин-спиновой релаксации в сперматозоидах. Продолжение табл. 1 Таблица 2 Составитель А,Ерохин Техред М.Моргентал Корректор 0; Густи Редактор Заказ 1794 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
